Botanical antimicrobial agent-grapefruit seed extract mixture (BAAG) have an unknown compounds which exhibit the antibiotic activities aganist microorganisms including bacteria and fungi. We have examined the effects of BAAG on the physiological function of Botrytis cinerea which was isolated from necrotic lesions of decayed fruits and vegetables such as cucumbers, grapes, tomatoes, and red peppers during storage. In the results of enzymatic activities related to the energetic metabolism there was no inhibitory effect of BAAG on the activities of several enzymes in vitro including glucose 6-phosphate dehydrogenase and malate dehydrogenase, while there was inhibitory effect of BAAG on the activities of hexokinase and succinate dehydrogenase. O-nitrophenyl-$\beta$-D-galactopyranoside(ONPG), the artificial substrate of $\beta$-galactosidase was hydrolyzed in the presence of BAAG, indicating that the membrane was pertubated by the BAAG. From the results we suggested that the antibiotic activity of BAAG is due to the change of membrane permeability of the cell. BAAG was fractionated and purified by silica gel and sephadex column chromatography. Among active fractions two peaks were identified as naringin and limonin when they were analyzed by by NMR and Fast atomic bombardment.
This study's aim is to isolate and characterize plant growth promoting Enterobacter species for the biological control of gray leaf spot in pepper. Screening was carried out from the rhizosphere of Agropyron tsukushiensi var. transiens (Hack.) Ohwi in Dok-do. Rhizobacterial isolates were partially identified by 16S rDNA sequencing and Enterobacter species were tested for plant growth promoting capabilities and the induction of systemic resistance in pepper against gray leaf spot caused by Stemphylium solani. Isolates were tested for production of indole-acetic acid and siderophore, and for phosphate solubilization. The application of isolates was effective in controlling gray leaf spot in pepper with E. asburiae (KNUC5007) and E. cancerogenes (KNUC5008 and KNUC5010) having the highest efficacy in reducing gray leaf spot severity. This is the first report of the biological control of gray leaf spot in pepper using rhizobacteria and it is hoped that this study will increase the utilization of Enterobacter species as plant growth promoters and biocontrol agents.
A CJ9 bacterial strain, which showed antifungal and antibacterial activities, was isolated from meju and identified as Bacillus polyfermenticus based on Gram staining, biochemical properties, as well as its 16S rRNA sequence. B. polyfermenticus CJ9 showed the antimicrobial activity against the various pathogenic molds, yeasts, and bacteria. The antibacterial activity was stable in the pH 5.0~9.0, but the activity was lost at $37^{\circ}C$ for 24 hr. The antifungal activity was stable in the pH range of 3.0~9.0 and reduced at $121^{\circ}C$ for 15 min, but antifungal activity was not completely destroyed. The antibacterial activity was completely inactivated by proteinase K, protease, trypsin, and $\alpha$-chymotrypsin. The antifungal activity was also completely inactivated by protease and $\alpha$-chymotrypsin, and reduced its activity by proteinase which indicated that the antifungal and antibacterial compounds have proteineous nature. The apparent molecular mass of the partially purified antifungal compound, as indicated by using the direct detection method in Tricine-SDS-PAGE, was approximately 1.4 kDa. The molecular mass of the antibacterial compound could not be determined because of its heat-liable characteristic.
Five hundred strains of actinomycetes were screened for inhibitory activity against the phytopathogenic fungi; Alternaria alternata, Botryotinia fuckeliana, Colletotrichum acutatum, Colletotrichum gleosporioides, Corticium sasaki, Cylindrocarpon destructans, Fusarium oxysporium, Magnaporthe grisea, Phytophthora infestans, Phytium ultimum, and Thanatephorus cucumeris. The strain CNU-A91231 (Korea Agricultural Culture Collection #20938) showed a strong activity against the phytopathogenic fungi and it was identified as Streptomyces griseofuscus based on the sequence of 16s rDNA. Practical and simple media for the strain S. griseofuscus CNU-A91231 was developed at the conditions ($28^{\circ}C$ and pH 6 with aeration) for efficient bacterial growth. Alanine, glutamine, proline and ammonium ion were good nitrogen sources for the bacterium. Addition of the major salts including Na, Cl, Ca, P, K, and Mg into molasses did not increase the growth of S. griseofuscus. Addition of fertilizers containing amino acids significantly enhanced growth of the bacterium. The optimal medium was formulated as molasses + 1% of glutamate fermentation waste powder. All the conditions and components used in this study did not affect the antifungal activity of S. griseofuscus. The bacterium and the medium in this study can be used as a bio-antifungal agent for plant farming.
Since 1997, Korean Ministry of Knowledge Economy and Ministry of Environment have established data on some 400 basic raw and subsidiary materials and process like energy, petro-chemical, steel, cement, glass, paper, construction materials, transportation, recycling and disposal etc by initiating establishment of LCI database. Regarding agriculture, Rural Development Administration has conducted establishment of LCI database for major farm products like rice, barley, beans, cabbage and radish etc from 2009, and released that they would establish LCI database for 50 items until 2020 later on. The domestic LCI database for seeds, seedling, agrochemical, inorganic fertilizer and organic fertilizer etc is only at initial stage of establishment, so overseas LCI databases are brought and being used. However, since the domestic and overseas natural environments differ, they fall behind in reliability. Therefore, this study has the purpose to select organic farming materials, survey the production process for various types of organic farming materials and establish LCI database for the effects of greenhouse gas emitted during the process in order to select carbon basic units for agricultural production system compliant in domestic situation instead of relying on overseas data and apply life cycle assessment of greenhouse gas emitted by each crop during the process. As for selecting methods, in this study organic farming materials were selected in the method of direct observation of material and bottom-up method a survey method with focus on the organic farming materials admitted into rice production. For the basic unit of carbon emission amount by the production of 1kg of organic farming material, the software PASS 4.1.1 developed by Korea Accreditation Board under Ministry of Knowledge Economy was used. The study had the goal to ultimately provide basic unit to calculate carbon emission amount in executing many institutions like goal management system and carbon performance display system etc in agricultural sector to be conducted later on. As a result, emission basic units per 1kg of production were calculated to be 0.0088kg-$CO_2$ for charcoal, 0.1319kg-$CO_2$ for grass liquid, and 0.2804kg-$CO_2$ for microbial agent.
A monoclonal antibody AP64 IgM binds to human acute nonlymphocytic leukemia (ANLL) cell line HL60 and also cross-reacts with the homologous antigen in a rat ANLL cell. This antibody mediated by complement, has leukemia a suppression effect. In this study, we generated a recombinant single-chain variable domain fragment (ScFv) which were derived from $V_H$ and $V_L$ cDNA of AP64 IgM-secreting hybridoma by RT-PCR. The two variable regions were joined with a single 15 amino acid linker $(G_4S)_3$. This recombinant ScFv was expressed as a single polypeptide chain from Escherichia coli BMH 71-18. The recombinant ScFv was purified by applying the periplasmic extract to $Ni^+$-NTA-agarose affinity column and detected with westernblot. The purified recombinant ScFv recognized a surface antigen (about 30 kDa) of HL60 cell line which is the same antigen detected by parental AP64 IgM. But the affinity of ScFv for a surface antigen of HL60 was lower than that of the parental AP64 IgM, which needs to be further improved. Overall, the recombinant ScFv specific to HL60 might be a useful bioreagent for either diagnostic or therapeutic purposes.
To make a better use of the beneficial bacterial inoculants in the agricultural practice, dry forms of bacterial fertilizer or pesticides are prepared with carrier materials. During the drying process of bacterial inoculant, most of the cells face a severe osmotic pressure and dehydration, and die off. Our study describes the effect of osmoprotectants such as trigonelline and trehalose on the survival of bacterial cells in high salt concentration and drying conditions. A fluorescent Pseudomonas, strain SSL3, used in this study, could grow in high salt concentration of upto 5% but the cells could not overcome the growth retardation at over 7% of salt concentration. The addition of trigonelline, even on small amount, in liquid medium containing 4% NaCl was detrimental to the cell. However, the addition of trehalose of upto 10 mM to the liquid medium containing 4% NaCl, enhanced cell growth. The cell growth was retarded when 150mM trehalose was added to the medium. Upon dry formulation of cells, trehalose was added. And the dry cells were inoculated into the soil to determine the effect of osmoprotectants on the survival of the cells. The survival of the cells, both in wet or dry soil, was improved by the addition of trehalose during the dry cell formulation. The positive effect of trehalose on the cell survival at $-20^{\circ}C$ and $-70^{\circ}C$ was oven more pronounced. The FTIR (Fourier transformation infra-red) spectroscopic analysis showed that the change of the 2nd amide group was reduced by adding trehalose to the medium containing 4% NaCl. These results suggest that trehalose can protect the cell membrane from dryness or high concentration of salt, thereby diminishing the sudden change of the protein structure of the cell membrane and, as a consequence, improving the cell survival.
Background: Extended-spectrum ${\beta}$-lactamases(ESBL) are enzymes that confer resistance to oxyimino-${\beta}$-lactams as well as to penicillins and cephalosporins. Strains of Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli that produce ESBL have been increasingly prevalent in many countries. The purpose of this study was to investigate the ESBL production rate of K. pneumoniae and E. coli at the in Yeungnam University Medical Center. Materials and Methods: Thirty-one isolates of K pneumoniae and twenty-five isolates of E. coli were examined for ESBL by double disk synergy test, using 20/$10{\mu}g$ ticarcillin/clavulanic acid and $30{\mu}g$ oxyimino-${\beta}$-lactam(ceftazidime, ceftaxime, ceftriaxone and aztreonam) disks. Results: Fifty-two percent of K. pneumoniae and sixteen percent of E. coli isolates revealed double disk synergism. Majority of ESBL-producing strains(fifty-five percent) were isolated from patients in the intensive care unit. Conclusion: ESBL production of K. pneumoniae and E. coli were also common at the Yeungnam University Medical Center and pose a serious problem for antimicrobial therapy.
For developing standard method for diease, pest and weed control in environmental friendly 'Ssam' vegetable cultivation, this study was carried out to investigating agriculture material use in organic agriculture and no pesticide cultivation for lettuce, kale, leafy perilla and korean cabbage. The 28.6% of investigated farmer carried out seed sterilization by seed selection with salt solution and soaking in chitosan that not validated. For raising seedling periods, the 55.6% of farmer did not use environmental-friendly agriculture material for, diease control and the 50% of farmer used one time for. pest control. Therefore, the control of disease and pest could be achieved with one or two times use of environmental-friendly agriculture material. Seed sterilization was carried out by soil solar sterilization, one time per year in 71.4% of farmer. Weed was controled by black PE film for weed germination of furrow in many farmer, by man-power weeding for weed of ridge in 85% of farmer and by machine weeding and mulching in some farmer. During cultivation period, the major pest were Aphis gossypii in lettuce, Plutella xylostella in kale, Plutella xylostella and Phyllotreta striolata (Fabricius) in korean cabbage and Pyrausta panopealis (Walke) in feat perilla. The many farmers used environ-mental-friendly agriculture material for control of pest over 10 times for spring season, and more used sold materials in market than home-made materials. In result, it needs to develop standardized method and validate cultivation methods for control of disease and pest, and seed sterilization treatment environmental-friendly 'Ssam' vegetable.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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