To clarify characteristics of yolk protein of abalone, yolk protein was purified from the ovarian egg extracts of mature female Haliotis discus hannai by a gel chromatography of sepharose CL-4B. From the results of immuno-electrophoresis and Ouchterlony's diffusion test to male and female sera and ovarian egg extracts using antibodies raised against mature female and male sera and male sera and ovarian egg extrascts, it was identified that the mature female serum had female specific serum protein and its antigenecity shared with ovarian egg extracts. A single type of yolk protein was purified from ovarian egg extracts, and it was composed of two subunits. Their molecular weights were estimated to be approximately 166 KDa and 113 KDa by SDSPAGE. The antiserum against yolk proteins cross-reacted with a mature female specific serum protein and extracts of hepatopancreas of vitellogeing females, but did not reacted with extracts of hepatopancreas of mature male.
To identify the histological site of synthesis of yolk protein precursor, vitellogenin, by immunocytochemical method in the freshwater crab Eriocheir japonicus, we purified the yolk protein, vitellin, from crude egg extracts, and prepared the anti-rabbit serum against vitellin. Then, the site of vitellogenin synthesis was demonstrated by immunotytochemical method with PAP(peroxidase-antiperoxidase) reaction using the rabbit antiserum aganist vitellin. Female specific serum protein was identified in female serum by immunoelectrophoresis and Ouchterlony's immunodiffusion test for mature male and female sera. Based on the immunoelectrophoresis and Ouchterlony's diffusion test for mature male and female sera and crude egg extracts using antiserum against vitellogenic female serum absorbed with male serum, the female specific serum protein was identified as vitellogenin, detected in female serum only. The major yolk protein, vitellin, was purified from the crude egg extracts by DEAE-cellulose ion exchange chromatography, followed by sepharose CL-4B gel filteration chromatography. The molecular weight of vitellin was estimated to be about 245,000 dalton by sepharose CL-4B gel filteration chromatography. from the results of immunological analysis for vitellin, it was found that the vitellin antiserum contained the antibody against vitellogenin. In the results of immunocytochemical reaction by PAP method with the rabbit antiserum against vitellin, the vitellogenic oocytes and the hepatopancreas of mature female showed positive PAP reaction, but not in follicle cells and previtellogenic oocytes nf ovary, muscle of female and mature male hepatopancreas. Therefore, it showed that the hepatopancreas of mature female is the site of vitellogenic synthesis.
Germ cell development during oogenesis, ovarian maturation and first sexual maturity in female Ruditapes philippinarum were investigated by cytological and histological observations. R. philippinarum is dioecious. During vitellogenesis, the Golgi complex, glycogen particles, and mitochondria were involved in the formation of lipid droplets and lipid granules in the cytoplasm of the early vitellogenic oocyte. In the late vitellogenic oocyte, cortical granules, the endoplasmic reticulum, and mitochondria were involved in the formation of proteid yolk granules in the cytoplasm. At this time, exogenous lipid granular substance and glycogen particles in the germinal epithelium passed into the oocyte through the microvilli of the vitelline envelope. The spawning period was once a year between early June and early October, and the main spawning occurred between July and August when seawater temperature was approximately $20^{\circ}C$. The reproductive cycle of this species can be categorized into five successive stages: early active stage(January to March), late active stage(Februaryto May), ripe stage(April to August), partially spawned stage(May to October), and spent/inactive stage (August to February). Percentages of female clams at first sexual maturity of $15.1{\sim}20.0mm$ in shell length were 52.6%(50% of the rate of group maturity was 17.83mm in length), and 100% for the clams >25.1mm.
Vitellogenesis is the process by which yolk accumulates in developing oocytes. The initiation of vitellogenesis represents an important control point in oogenesis. When females of the model insect Drosophila melanogaster molt to become adults, their ovaries lack mature vitellogenic oocytes, only producing them after reproductive maturation. After maturation, vitellogenesis stops until a mating signal re-activates it. Juvenile hormone (JH) from the endocrine organ known as the corpora allata (CA) is the major insect gonadotropin that stimulates vitellogenesis, and the seminal protein sex peptide (SP) has long been implicated as a mating signal that stimulates JH biosynthesis. In this review, we discuss our new findings that explain how the nervous system gates JH biosynthesis and vitellogenesis associated with reproductive maturation and the SP-induced post-mating response. Mated females exhibit diurnal rhythmicity in oogenesis. A subset of brain circadian pacemaker neurons produce Allatostatin C (AstC) to generate a circadian oogenesis rhythm by indirectly regulating JH and vitellogenesis through the brain insulin-producing cells. We also discuss genetic evidence that supports this model and future research directions.
Han Chang-Haa;Yang Mun-Ho;Paek Jae-Min;Lim Sang-Koo;Kim Kwang-Hyun
Journal of Aquaculture
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v.8
no.1
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pp.1-19
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1995
In red seabream, Pagrus major the female specific protein in the vitellogenic female serum was identified by Ouchterlony's immunodiffusion test and immunoelectrophoresis. The female specific serum protein might be vitellogenin based on the results of the immunological analysis for the male and vitellogenic female sera and crude egg extracts. Also, it was identified by the immunodiffusion test that the purified yolk protein from ovarian egg extracts has antigenic identities shared with the female specific serum protein. To study the relationship between the maturational stages of gonad and plasma levels of vitellogenin, these were measured from the late resting period (January) to the vitellogenic preiod (April) by the modified enzymeimmunoassay (EIA) using antiserum against yolk protein. The level of plasma vitellogenin began to increase in February (previtellogenesis stage) and continuously increased with the ovarian growth during the vitellogenesis period (March to April). The plasma vitellogenin levels were significantly different between the females and the males in February. Validation for the modified EIA system. was tested .The absorbance curve of serial dilutions of serum from the vitellogenic female was paralleled to the standard curve of yolk protein; $109\pm5.6\%$ recovery was achieved by the modified EIA. And the intraassay coefficients of variation were less than 10% within the concentration ranging from 31.3 ng/ml to 1,000 ng/ml. These findings suggest that the sex determination in adult red seabreams could be possible by using the modified EIA as early as in February.
The observation using an electron microscope shows that the maturation of the oocyte of African giant snail, Achatina fulica, proceeds over three stages. The oocyte of stage 1 is a small elliptic cell $(220\times400{\mu}m)$ whose light nucleoplasm contains two nucleoli. In its cytoplasm, a number of mitochondria, rough endoplasmic reticula, and ribosomes are found, while yolk granules are not. The nucleus of the oocyte of stage 2 is relatively large in comparison with the volume of cytoplasm, and contains one nucleolus. In the nuclear envelope comprising inner and outer double membrane, there are found a lot of nuclear pores for materials to pass through. A number of mitochondria, Golgi complex and lipid yolk granules appears in the cytoplasm, and proteinous yolk granules begin to form and mature in the vacuoles of various sizes ($0.8\sim3.0{\mu}m$ in diameter). The oocyte of stage 3 has an enlarged nucleolus. Material transportation through nuclear pore is not found any longer. The cytoplasm in this stage is filled with proteinous and lipid yolk granules. The microvilli are developed around the egg plasma membrane.
The oogenesis of the Microphysogobio yaluensis was investigated using light microscopy. Various developmental oocytes appeared in the ovary of the M. yaluensis. The oogenesis is largely divided into four stages: nuclear-chromatin stage, peri-nucleoli stage, vitellogenesis (yolk vesicle and yolk granule stages), and mature stage. The nuclear-chromatin is distributed in a large germinal vesicle as threads. The peri-nucleoli stage has many acidic nucleoli lining at the inner side of the nuclear membrane and an egg envelope just weakly starts. As the oogenesis gradually proceeds, they change to the vitellogenesis stage. The oocyte become to drastically increase and the marginal area of the ooplasm is covered with many vacuoles showing no negative reactions with hematoxylin and eosin staining, called the yolk vesicle stage. Many yolk vesicles-owned oocyte largely increase and as the development continues, its ooplasm is changed from the yolk vesicles to the yolk granules of eosinophilic. At the mature stage, lots of granules merged into a big yolk mass, acidophilic. Even at the mature stage, the egg envelope was still thin between the ooplasm and the follicular layer of the oocyte.
Vitellogenesis during oogenesis, reproductive cycle and first sexual maturity of the female Neptunea (Barbitonia) arthritica cumingii was investigated by light and electron microscope observations. In the early vitellogenic oocyte, the Golgi complex and mitochondria were involved in the formation of lipid droplets and yolk granules. In late vitellogenic oocytes, the rough endoplasmic reticulum and multivesicular bodies were involved in the formation of proteid yolk granules in the cytoplasm. A mature yolk granule was composed of three components: main body(central core), superficial layer, and the limiting membrane. The spawning season was between May and August and the main spawning occurred between June and July when the seawater temperature rose to approximately $18{\sim}23^{\circ}C$. The female reproductive cycle can be classified into five successive stages: early active stage(September to October), late active stage(November to February), ripe stage(February to June), partially spawned stage(May to August), and recovery stage(June to August). The rate of individuals reaching the first sexual maturity was 53.1% in females of 51.0 to 60.9mm in shell height, and 100% in those over 61.0mm.
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2002.10a
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pp.218-219
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2002
어류의 성 성숙중의 암컷 혈액에는 수컷에서는 출현하지 않는 암컷 특이 난황 단백질, 즉 난황 전구 물질 (vitellogenin, VTG)이 출현한다. 이 물질은 자성호르몬 (17$\beta$-estradiol, E2)의 영향에 의해 간에서 합성되며 발달중인 난소에 들어간 후 난모세포의 난황물질을 구축하고, 수정 후 배 발생 중에 영양물질로써 이용된다(Wallace and Selman,1981). 또한, VTG는 미성숙한 암컷 및 수컷에 E2처리에 의해 합성되어지기도 한다(Mommsen and Walsh, 1988). (중략)
Uptake and accumulation of vitellogenin into ovary were traced by radiolabeled vitellogenin produced in the fat body. Vitellogenin reached the oocytes through the follicle cells and the intercellular space and penetrated the oocyte membrane via the endocytotic vesicles and then accumulated to the growing yolk granules.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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