Park, Kyung Tae;Jang, Bo Kook;Lee, Ki Cheol;Lee, Cheol Hee
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.10a
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pp.49-49
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2018
본 연구는 관상가치가 높아 조경 및 관상소재로 개발이 가능한 큰개관중의 전엽체 증식 및 포자체 형성에 적합한 배양조건을 구명하고자 수행되었다. 실험재료는 무가온 온실에서 채집한 포자를 기내에서 발아시켜 전엽체를 획득한 후 8주 간격으로 계대배양하여 실험에 사용하였다. 배지종류에 따른 전엽체의 기내 증식 및 형태형성의 영향을 알아보고자 배양된 전엽체 300mg을 메스로 다진 다음 농도를 1/4, 1/2, 1, 2배로 조절한 MS와 Knop배지에 8주간 배양하였다. 그 결과, 1MS배지에서 전엽체의 생체중이 5.5g으로 가장 많이 증가하였다. 1MS를 제외한 타 처리구는 생체중의 증가수준이 1.1-3.0g에 머물러 1MS배지보다 저조한 수준을 보였다. 현미경을 이용한 전엽체의 관찰결과, 1MS배지는 엽육의 색이 녹색으로 생육이 양호하였다. 전엽체의 증식이 가장 저조하였던, 2MS와 1/4MS는 생육의 저조뿐만 아니라 노화현상도 관찰되었다. 포자체 형성을 위한 최적의 토양조건을 알아보고자, 원예상토, 피트모스, 펄라이트 및 마사토의 비율을 5종류로 달리하여 배양토를 혼합하였다. 혼합된 토양은 사각분($7.5{\times}7.5{\times}7.5cm$)에 충진하여 기내배양된 전엽체 1g을 증류수와 함께 10초간 분쇄한 다음 토양표면에 분주 후 10주간 재배하였다. 그 결과, 원예상토가 높은 비율로 첨가된 혼합조건에서 포자체의 형성이 우수하였다. 그중 원예상토와 마사토를 2:1(v:v)로 혼합한 토양, 원예상토와 펄라이트를 2:1(v:v)로 혼합한 토양에서 포트 당 각 357.0, 339.8개의 포자체가 형성되었다. 또한 형성된 포자체의 생육을 조사한 결과 원예상토와 마사토를 2:1(v:v)로 혼합한 토양에서 생체중, 엽수, 엽장, 엽폭, 근수, 근장 및 SPAD value 등의 생육수치가 우수하였다. 따라서 큰개관중의 전엽체 증식에 적합한 배지는 1MS로 판단되었으며, 포자체 대량생산을 위해서는 원예상토와 마사토를 2:1(v:v)로 혼합한 토양이 적합하다고 판단된다.
Lee, Sang Hee;Kim, Young Jin;Yang, Hwan Rae;Kim, Jong Bo
The Journal of the Convergence on Culture Technology
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v.4
no.4
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pp.325-329
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2018
There are two kinds of calla belonging to the Zantedeschia spp. depending on the growing condition. Between them, various colored calla with flower shape and flower color are very popular as cut flowers. However, colored calla is very low in natural reproduction rate, and it takes a long time to obtain a flowering bulb. So it is urgent to establish a large breeding system of good varieties. In this study, various plant growth hormone treatments were carried out to improve the growth of the plants in calla. Root formation was the highest at 81.5 % in basal MS medium, and the formation of shoot and multiple shoots were the highest at 100.0 % and 36.4 % in the combined treatment of BA 2.0 mg/L and IBA 1.0 mg/L, respectively. In fresh weight, the highest growth rate was observed with 11.2 times increase in BA 2.0 mg/L single treatment. Auxin and cytokinin mixed treatment were widely used in previous studies and positive effects on the growth of calla plants will help to establish the micro-propagation system.
Attempts were made to regenerate plants from petiole explane of Forest Pimpinella barchycarpa via repetitive somatic embryogenesis. Effective induction of somatic emb교ogenesis was achieved on both MS and modified $B_{5}\;(mB_{5})$ media containing BA + 2,4-D or BA + 2,4-D + NAA under light condition (16-h photoperiod/day) cultures. The explants exposed to the ligt produced numerous somatic embryos while those kept under the dark did not form any on the same medium. Somatic embryos at different developmental stages were observed to arise within a individual explants. Plantlets could be regenerated on $mB_{5}$ basal medium or $mB_{5}$ containing 0.1 mg/L NAA Secondary adventive embryos were formed on the surface of the somatic embryos. Therefore, repetitive somatic embryogenesis could be achieved by secondary embryogenesis. Although the treatment of 2,4-D or NAA alone was effective in callus formation and growth, but not in induction of somatic embryogenesis. Some explants, cultured on NAA-containing media in darkness, produced only adventive roots. The embryogenic potential was maintained for two years when subcultured to BA and 2,4-D containing media with 5 weeks inteval. Regenerated plantlets were maintained on $mB_{5}$ or MS basal media for 4 to 6 more weeks and transferred to soil of an artificial mixture for acclimation. Most plantlets (more than 97%) survived, and grew without any deformity.
The most effective conditions of In vitro culture and ex vitro sporophyte formation from prothallus were studied for mass propagation of Dyropteris varia. The most effective medium of prothallus proliferation was Murashige and Skoog's basal medium supplemented with 10:50mM of $NH_4^+:NO_3^-$ and 2% sucrose. The optimum pH level was 5.8 and prothallus growth was promoted on medium containing $0.6{\sim}0.8%$ agar. Almost of the tested growth regulators (NAA, IAA, 2,4-D, BAP, kinetin and 2ip) were inhibitory in prothallus proliferation as the concentration of growth regulators became higher. The highest number of sporophytes was obtained by transplanting prothallus on compost only than on any other soil compositions. Sporophyte formation was promoted remarkably by soaking prothallus with $100{\mu}M\;GA_3$ for 3 hours.
Kiwi (Actinidia deliciosa) is exotic plant and thus susceptible to cold climate in the middle part of Korean peninsular. Several hybrids have recently been developed to enhance cold tolerance by crossing them with domestic species (A. arguta), We have developed an efficient micropropagation technique for the hybrids using both axillary bud and callus culture systems. Shoot proliferation from axillary buds was possible on St medium supplemented with 0.2 mg/L Bh and 3.0 mg/L GA$_3$. In vivo cuttings of the proliferated shoots were more effective for root induction and subsequent survival than in vitro rooting. More than 95% of the plantlets were successfully transferred to field. Effective callus induction was achieved on MS or B$_{5}$ medium with 2,4-D or NAA. Although callus induction could be made from any combinations of media and auxins, shoot regeneration was observed only from the callus induced on medium containing NAA.A.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2020.12a
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pp.54-54
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2020
지구온난화에 따라 농업부문 신재생에너지의 중요성이 증대되고 있으며, 화본과 식물은 바이오에너지작물의 중요한 소재를 제공하고 있다. 화본과 식물의 기내대량증식연구의 일환으로 홍띠식물의 기내 재생 식물체의 유전적 안정성에 대한 기초자료를 제공할 목적으로 기내배양으로 재분화시킨 홍띠(Imperata cylindrica 'Rubra') 재분화 식물체 중 녹색체 재생식물체를 대상으로 ISSR 표지를 사용하여 유전적 안정성을 조사하였다. 재분화식물체는 MS (Murashige and Skoog, 1962)배지에 생장조절제를 첨가한 배지에서 배양하였다. 생장점 부위를 적출하여 캘러스를 유도하고(0.1 mg/L 2,4-D와 2 mg/L BA), 캘러스 증식(0.1 mg/L 2,4-D와 0.05 mg/L BA), 신초 재분화( 0.01 mg/L NAA와 2 mg/L BA) 후 MS배지에서 식물체를 양성하고 순화시켰다. 배양은 26±2℃, 25 µmol/m2/s, 14h/10h (day/night) 광조건 하에서 실시하였다. 재분화식물체는 홍띠 및 녹색 재분화식물체 2 종류로 나타났는데, 이는 생장점에서는 홍띠가 분화되었음에도 불구하고 생장점 주변조직에서 유래한 녹새체가 분화된 후 우세하게 자라서 녹색재생체가 우점하는 것으로 추정된다. ISSR 분석은 대조구로 모식물체 홍띠를(8개체), 재분화식물체는 녹색체 중, 1년간 노지포장에서 재배중인 녹색체(10개체)와 실험실내 화분에서 재배중인 시료를(10개체) 사용하였다. ISSR 밴드패턴을 비교한 결과, 재분화체는 실내포트 재배식물체 10.3%, 노지1년 재배식물체 8.3%로 대조구의 4.1%보다 유전적 다형성 비율이 2배 이상 높게 나타났다. 또한 재분화식물체들의 유전적 유사도를 평가하고 군집분석을 실시하였다.
The experiments were conducted to obtain culture conditions on optimal cultural conditions for propagation of a topical orchid, Haemaria discolor, through shoot tip cultrue in vitro. Survival percentage of shoot tip explant, in initial culture media was higher in H$_3$P$_4$ medium than in Murashige and Skoog's medium. Explants, cultured in H$_3$P$_4$ medium containing 1.0 mg/L kinetin, showed more shoot elongation when compared with those on other media. When the distal part of stem (pseudobulb) was longitudinally sectioned into half and cultured in H3P4 medium containing 0.1 mg/L 2ip, 0.1, or 1.0 mg/L kinetin, shoots from axillary bud were much more elongated under light condition.
In order to micropropagate uniform plantlets of Alocasia cadieri Chantrier in vitro, the shoot tips were cultured on media containing various concentrations of BA and thidiazuron (TDZ). Multiple shoot formation from shoot tips was very effective on medium containing 0.1mg/L TDZ. The formed shoots from shoot tips were separated into a shoot, and cultured on media with BA, TDZ, and NM combination for proliferation. The shoots were multiplied very vigorously on medium with 0.5mg/L TDZ and 0.5mg/L NAA. The rooting and growth of multiplied shoots were more effective on medium with 2.0g/L activated charcoal, rather than those with IBA and NAA. Rooted plantlets show high survival in soil mixed with perlite 1: vermiculite 1 or vermiculite alone.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2019.04a
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pp.57-57
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2019
본 연구는 관상 및 조경용으로 개발이 가능한 남방계 양치식물인 점고사리[Hypolepis punctata (Thunb.) Mett.]의 전엽체 증식 및 포자체 형성에 적합한 배양조건을 구명하고자 수행되었다. 무가온 온실에서 성숙한 포자엽을 채집한 후 포자를 기내에서 발아시켜 전엽체를 획득하였으며, 8주 간격으로 계대배양 하여 실험의 재료로 사용하였다. 배지종류에 따른 전엽체의 증식 및 형태형성을 확인하고자, 배양된 전엽체 0.3g을 메스로 잘게 다진 후, 농도를 1/4, 1/2, 1, 2배로 조절한 MS배지에 8주간 배양하였다. 이후 선발된 배지를 기준으로 sucrose, 활성탄, 질소급원의 농도를 조절하여 전엽체의 증식과 형태형성을 확인하였다. 그 결과, 1MS배지에서 전엽체의 생체중이 초기 접종량인 0.3g에 비해 10.7배 증가한 3.2g으로 가장 높은 증가율을 보였다. 형태관찰에서도 장정기의 형성이 관찰되었으며, 전엽체의 쿠션조직이 비교적 잘 발달하였다. 전엽체 증식에 가장 좋은 효과를 보인 1MS배지를 기준으로 sucrose의 농도를 0-4%로 달리하여 실험한 결과, 1%의 처리구에서 6.7g으로 가장 높은 생체중을 보였다. 활성탄의 농도를 0-0.8%로 첨가한 네 처리구 중에서는 0.8%의 처리구에서 14.2g으로 무처리구에 비해 생체중이 2배 이상 증가하였다. 전엽체의 형태 또한 정상적인 발달을 보였다. 질소급원의 비율을 30-120mM로 조절한 배지에서는 60mM의 처리구에서 4.9g으로 가장 높은 생체중을보였다. 이후 포자체 형성을 위한 최적의 토양조건을 구명하고자, 원예상토, 피트모스, 펄라이트 및 마사토의 비율을 달리하여 5종류의 배양토를 조성하였다. 혼합된 토양은 사각분($7.5{\times}7.5{\times}7.5cm$)에 충진 하였으며, 배양된 전엽체 1g을 증류수와 함께 10초간 분쇄한 다음 준비된 토양표면에 분주하여 재배하였다. 12주간의 재배 결과, 원예상토를 단용한 토양에서 포자체의 수가 포트당 250.0개로 가장 많이 형성되었으며, 포자체의 생육 또한 다른 처리구에 비해 우수한 결과를 보였다. 한편 피트모스가 혼합된 토양에서는 포자체가 형성되지 않았다. 따라서 점고사리의 전엽체 대량증식에 적합한 배지는 sucrose 1%와 질소급원의 농도를 60mM, 활성탄을 0.8% 첨가한 1MS배지로 판단되며, 포자체 대량생산을 위해서는 원예상토를 단용한 토양이 적합하다고 판단된다.
A photoautotrophic micropropagation methodology in liquid culture medium has a number of advantages for large-scale propagation of plants. This paper describes an improved system for the mass propagation via somatic embryogenesis of the medicinal plant Kalopanax septemlobus Nakai. Somatic embryo-derived young plantlets of K. septemlobus were cultured either under heterotrophic conditions with sucrose on half-strength MS medium with $30gL^{-1}$ sucrose, under heterotrophic conditions without sucrose, or under photoautotrophic conditions (MS liquid medium without sucrose under forced aeration) for four weeks before transferring the plantlets for acclimatization. Plantlets grown under photoautotrophic conditions had more leaves, higher chlorophyll content, a higher net photosynthetic rate (NPR), and a higher survival rate. The results indicate that the photoautotrophic conditions with a forced ventilation system are effective in enhancing the growth of plantlets and the rate of net photosynthesis. The plantlets grown under photoautotrophic conditions had a high survival rate (92%) upon ex vitro transplantation. Our study shows that autotrophically produced plantlets acclimatize better and sooner upon ex vitro transplantation than conventionally cultured plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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