Park, Jae-Seuk;Kim, Jae-Yeal;Lee, Gwi-Lae;Yoo, Chul-Gyu;Han, Sung-Koo;Shim, Young-Soo;Kim, Young-Whan
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.45
no.1
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pp.176-183
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1998
Background: The total and differential cell count of bronchoalveolar lavage(BAL) fluid are useful assessing activity, prognosis and response to therapy in diffuse interstitial lung disease. But controversy exist as to the appropriate method in processing BAL fluid. Therefore we investigated the effect of gauze filtration, centrifugation and different storage time of BAL fluid on the total and differential cell count. Methods: We obtained BAL fluid from 6 persons with no active lung lesion and divided pooled BAL fluid into several siliconized glass tubes and filtered through 0, 1, 2, 4 folds of cotton guaze(pore size: 1mm), and compared total cell count using hemocytometer after trypan blue staining and differential cell count after Wright-Giemsa staining of cytocentrifuged preparations. And we also counted total and differential cell count after centrifugation(400g for 30 min) and various storage time(2hr, 24hr, and 48hr). Results: There was no difference in total and differential cell count according to folds of gauze filtraion. But without gauze filtration, mucus threads that hampered total and differential cell count were found in 2 cases (33%). Centrifugation resulted in loss of total cell count($24{\pm}18%$) without change in differential cell count. There was no change in total cell count after 2hr storage but significant cell loss was found after 24hr storage time(24hr : $28{\pm}21%$, 48hr : $41{\pm}24%$). However there was no change in differential cell count with 48hr storage time. Conclusion: Total and differential cell count of BAL fluid may be best performed after cotton gauze filtration without centrifugation and within 2 hours.
Kim, Eun A;Bang, Byoung Uk;Kim, Lucia;Ryu, Jeon Seon;Kwak, Seung Min;Lee, Hong Lyeol;Cho, Jae Hwa
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.57
no.5
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pp.476-479
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2004
Pulmonary siderosis is one kind of pneumoconiosis, occurs from chronic inhalation of iron or iron oxide. Inhaled iron dust is deposited in the intra-alveolar spaces, which leads to radiological changes and respiratory symptoms. It is diagnosed by iron exposure history, radiological changes, and the evidence of intra-alveolar iron deposit. We have experienced a case of pulmonary siderosis which was confirmed by bronchoalveolar lavage and transbronchial lung biopsy, so report it with a review of literature.
Background: The immediate hoot response to LPS is the production of proinflammatory cytokines that act as intercellular mediators in inflammatory reactions, including acute lung injury. These "early response" cytokines transmit signals from recognition cells to target or effector cells. This host response is further amplified by the expression of leukocyte chemoattractants, growth factors, and adhesion molecules, resulting in an array of proinflammatory events. This experiment was performed to define the lung origin of proinflammatory cytokines, such as TNF-$\alpha$, IL 6 in early periods of endotoxin induced acute lung injury (ALI). Method: The healthy male Sprague-Dawley, weighted 150 - 250g, were divided into saline control (NC) and endotoxemia-induced ALI (ETX-), and leukopenic endotoxemia-induced ALI (CPA-ETX-Group) which was induced by cyclophosphamide, 70 mg/kg i.p. injection. Acute lung injury was evoked by LPS, 5 mg/kg, intravenously administered. Bronchoalveolar lavage was performed at 0, 3, 6 h after LPS-treated to estimate the influx of phagocytes and concentration of total protein, and cytokines as TNF-$\alpha$ and IL 6 by a bioassy using MIT method. We also examined the localization of TNF-$\alpha$ and IL 6 protein in endotoxemia-challenged lung tissue by immunohistochemical stain (IH). Results: The total cell, macrophage and PMN count in BALF were elavated in ETX group compared to NC(p<0.05). In CPA-ETX group, total cell and macrophage count in BALF were not changed compared to NC. but PMN count was markedly reduced and it took part in less than 0.1 % of total BAL cells (p<0.01). The protein concentration in BALF were significantly increased in ETX and CPA-ETX group Compared to NC (p<0.05), but there was significant difference between ETX- and CPA-ETX group only at 6 h (p<0.05). This observation suggested that even if PMNs are involved in the pathogenesis of acute lung injury, their role cannot be viewed as essential The concentration of TNF-$\alpha$ and IL 6 in BALF was significantly increased in the ETX- and CPA-ETX group compared to NC. There was no difference between ETX- and CPA-ETX group. In IH, anti-TNF-$\alpha$- and anti-IL 6 antibody was strongly localized at interstitial monocytes and alveolar macrophages in endotoxemia-challenged lung tissue. From above point of view, activated alveolar macrophage/monocyte considered as a prominent source of proinflammatory cytokines in endotoxemia-challenged lung injury. Conclusion: The prominent source of proinflammatory cytokines in early periods of endotoxemia-induced lung injury will be the activated resident macrophages like an alveolar macrophage and interstitial monocytes. The pulmonary macrophage/monocyte will impact the initiation and continuance of lung injury without PMNs's certain inflammatory role, particularly in endotoxemia-induced acute lung injury.
Backgrounds : Authors evaluated the quantitative culture of bronchoalveolar lavage fluid(BALF) in patients who were being treated with antimicrobial agents and the characteristics of isolated microorganism. Method : A prospective study was done with 25 patients under mechanical ventilation and antimicrobial treatment in ICU and NCU of Yongdong Severance Hospital from Apr. to Sep. 1999. Patients were classified into two groups: control group (n=5) and patients with VAP (n=20). The threshold of quantitative culture of BAL fluid in the diagnosis of VAP was $10^4$ cfu/ml. Results : 1) In gram staining of BALF, one patient in the control group and four in the VAP group showed positive results. Quantitative culture of BALF showed no organisms in the patients in the control group and in 9 VAP patients. Therefore the overall sensitivity was 43.8%. 2) Frequency of isolated organisms cultured above diagnostic threshold was in the following order: E. cloaclae, S. aureus, K. pneumoniae, and A. baumani. S. aureus and Staphylococcus coagulase(-) were a11 resistant to oxacillin. Seven out of 10 isolated G (-) organisms were suspected to be organisms producing extended spectrum $\beta$-lactamase (ESBL). 3) The concurrence between gram staining of sputum aspiration and that of BALF was only in 1 case. And the concurrence of culture results was observed in 3 cases. Conclusion : The sensitivity of gram staining and quantitative culture of BALF from patients under antibiotic therapy and the concordance rate between conventional tracheal aspiration and BAL were low, facts which were important in interpretation the data. Since the frequency of drug resistance organisms was not different from that of foreign data, antibiotics must be prudently selected and used.
Background : Sarcoidosis is a systemic granulomatous disorder of unknown origin and characterized by accumulation of T cells and macrophages. Various cytokines may play crucial roles in the activation of T cells and macrophages, and thereby in the formation of granulomas. However, little is known about the balance between proinflammatory cytokines and antiinflammatory cytokines in the development of sarcoid granulomas and disease activities. In the present study, we measured IL-6, IL-8 and IL-10 in the bronchoalveolar lavage fluid(BALF) from patients with pulmonary sarcoidosis to find out whether there is an imbalance between proinflammatory cytokines and antiinflammatory cytokines in the lung. Methods: Fourteen subjects with the diagnosis of sarcoidosis and six healthy volunteers were included. BALF was concentrated ten-fold by pressure ultrafiltration and each cytokine levels were measured by EUSA method. Active sarcoidosis was defined by major organ involvement or clinically progressive diseases. Results: The mean IL-6 levels in the BALF of the active sarcoidosis group were significantly increased than in controls or inactive sarcoidosis group(p<0.05). Meanwhile, the IL-8 levels were increased and IL-10 levels were decreased in the active sarcoidosis group than in controls or inactive sarcoidosis group without significance(p>0.05). In active pulmonary sarcoidosis patients, the IL-6 levels in BALF correlated with the BALF CD4/CD8 ratio(r=0.768, p<0.05) and IL-8 levels(r=0.564, p<0.05). Conclusions : The data presented showed that pro-inflammatory cytokine IL-6 is important in the pathogenesis of sarcoidosis and decreased tendency of anti-inflammatory cytokine IL-10 might also be involved in the development of granulomatous inflammation in sarcoidosis.
Background : The therapeutic effects of surfactants on acute lung injury derive not only from their recruiting action on collapsed alveoli but also from their anti-inflammatory action in the alveolar sapce. This study evaluated the anti-inflammatory action of a surfactant in an acute lung injury model of rats by neutrophils were recollected from the BAL fluid and the NF-${\kappa}B$ activity of the neutrophilic nuclear protein was evaluated. Methods : Male Sprague-Dawley rats weighing approximately 300 gram were divided into 3 groups, which consisted of 6 rats respectively. In the control group, normal saline(3ml/kg) was instilled into the trachea twice with 30 minute interval. In two other groups, acute lung injury was induced by the intra-tracheal instillation of LPS(5mg/kg). Thirty minutes later, either a surfactant(ST group; 30mg/kg) or normal saline(NT group: 3ml/kg) was instilled via the trachea. Twenty-four hours after the LPS instillation, the BAL fluid was retrieved to measure the WBC count and cytokine(IL-$1{\beta}$ and IL-6) levels. The neutrophils were isolated from the BAL fluid and the nuclear protein was extracted to evaluate the NF-${\kappa}B$ activity using a eletrophoretic mobility shift assay(EMSA). Results : The WBC count of the BAL fluid of the ST group($3,221{\pm}1,914{\times}10^3/{\mu}l$) was higher than that of the control group($356{\pm}275{\times}10^3/{\mu}l$)(p<0.05) and lower than that of the NT group($5,561{\pm}1,757{\times}10^3/{\mu}l$)(p<0.05)). The BAL fluid level of IL-$1{\beta}$ from the NT group($2,064{\pm}1,082pg/ml$) was higher than those of the ST group($360{\pm}234pg/ml$)(p<0.05) and the control group(0pg/ml)p<0.05) and control group($49{\pm}62pg/ml$)(p<0.05). The NF-${\kappa}B$ activity of the neutrophilic nuclear protein in the ST group and NT group was similar. Conclusion : The surfactant, attenuates the alveolar inflammation in the acute lung injury of rats model. However, its anti-inflammatory action does no't appear to be mediated by the inhibition of NF-${\kappa}B$ activity.
목적 : OVA에 유도된 천식 쥐 모델에 향소산가미방을 투여한 후 $PPAR{\gamma}$의 변화를 조사하여 향소산가미방의 천식 치료 기전을 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : 8주된 암컷 BALB/c 마우스에 첫 날과 14일 후에 20 ${\mu}g$의 OVA를 알루미니윰 하이드록사이드 1mg과 혼합한 후 총 200 ${\mu}g$를 복강 내로 주입하여 감작시켰다. 처음 감작시킨 날로부터 21,22,23일 후에 천식 모델에 사용하는 초음파 분무기를 이용하여 세 번째 감작시켜서 천식 마우스 모델을 만들었다. 천식 마우스 모델을 만드는 기간 중 OVA를 복강 내로 주입한 후 19일째에 24시간의 간격으로 향소산가미방을 7일 동안 경구 투여하여 향소산가미방의 효과를 조사하였다. 기관지폐포세척술은 마지막 감작 후 72시간 후에 실행하고 기관지폐포 세척액의 총 세포수를 측정하였다. $PPAR{\gamma}$의 발현은 천식 마우스 모델의 폐와 향소산가미방을 투여한 마우스 모델의 폐를 적출한 후 Western blotting 방법을 아용하여 측정하였다. 병리 조직학적 검사는 hematoxylin 2 and eosin-Y 염색을 이용하여 조사하였다. 결과 : 정상 군과 비교하여 OVA감작 천식 쥐 모델에서는 72시간 후에 총 세포 수가 증가하였다. 특히 OVA감작 천식 군에서 증가된 호산구의 수가 향소산가미방을 투여 한 쥐 군에서는 유의하게 감소하였다. OVA감작 천식 쥐 모델에서 72시간 후에 정상 군과 비교하여 핵 내에서의 $PPAR{\gamma}$단백질의 발현이 약간 증가하였다. 그러나 향소산가미방을 투여한 쥐 모델에서는 세포질과 핵 내에서 $PPAR{\gamma}$단백질의 발현이 유의하게 증가하였다. 조직학적 검사상 정상 군과 비교하여 OVA 감작된 천식 쥐 모델에서는 폐포, 세기관지, 기도내강 주변에 많은 염증 세포들이 있었다. 그러나 가미향소산 을 투여 한 후에는 염증 세포들이 유의하게 감소하였다. 결론 : 가미향소산은 $PPAR{\gamma}$작용제로서 역할을 하며, 천식에 대한 치료제 또는 예방제를 개발하는 데 후보 물질이 될 것으로 사료된다.
Background: The lung is the most common site of metastasis and usually it manifests as a single or multiple nodules in chest X-ray. But less commonly the cancer spreads through the lymphatics and X-ray shows diffuse reticulonodular densities. Sometimes, patient is presented with respiratory symptoms only with interstitial lung infiltration before the signs of primary tumor and in that cases, the differential diagnosis with other interstitial lung disease is required. We have experienced 5 such cases, who were diagnosed as lymphangitic carcinomatosis by transbronchial lung biopsy. Methods: Clinical manifestation, pulmonary function test, modified thin section CT, bronchoalveolar lavage and transbronchial lung biopsy were done. Results: The primary tumor was gastric cancer in 3, lung cancer in 2. Pulmonary function test showed restrictive pattern with low DLco in 2 patients and obstructive pattern in one. Bronchoalveolar lavage showed lymphocytosis in 4 patients and malignant cells were found in one patient. Transbronchial lung biopsy revealed malignant cells localized to the lymphatics (peribronchial, perivascular and perialveolar). Cell type was adenocarcinoma in 4 and squamous cell carcinoma in one. Conclusion: Rarely lymphangitic carcinomatosis can be presented as diffuse interstitial lung disease and easily diagnosed by transbronchial lung biopsy.
The aim of this study was to evaluate spontaneous and LPS stimulated proinflammatory cytokines and chemokine release of alveolar macrophages in the patients with pulmonary tuberculosis and healthy individuals, as a control. Alveolar macrophages recovered from bronchoalveolar lavage fluids were cultured with or without LPS 0.1, 1, or 10 ${\mu}g/ml$ for 24 and 48 hours in 37C, 5% CO2. TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6 and IL-8 amount were evaluated using ELISA kit from the supernatants. There were a significant increase in the spontaneous 24 hours release of TNF-$\alpha$ and IL-6 from the involved segments of tuberculosis patients compared with uninvolved segments and normal control There were also increasing trends of release of them after LPS stimulation in involved segments, but not significant. IL-1$\beta$ and IL-8 were not evaluated from the involved segments of tubeculosis and there were not significant differences of them between uninvolved segments of tuberculosis and normal control. It is concluded that cytokine release of alveolar macrophages in the pulmonary tuberculosis was markedly increased, and it was localized to the alveolar macrophages from the involved segments.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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