본 연구에서는 온라인 감염 씨감자 비파괴선별 시스템을 구축하고 감염 씨감자 선별을 위한 통계적 모델을 개발하여 적용함으로써 선별시스템의 성능을 평가하였다. 선별모델 개발을 위해 토양병 및 잠복 감염의 대표적인 병원성 세균인 pectobacteruim atrosepticum을 인위적으로 씨감자에 감염시켜 씨감자 내부에 병징이 발현되도록 하여 실험하였다. 구축된 선별시스템을 통해 감염 및 정상 씨감자의 투과스펙트럼을 획득한 후 최소자승판별법(partial least square-discriminant analysis)을 이용하여 감염 씨감자 검출모델을 개발하였다. 개발된 모델의 검정결정계수는($R^2$) 0.943이었고 분류의 정확도는 99%(n=80) 이상으로 우수한 선별성능을 보였다. 개발된 온라인 감염 씨감자 선별시스템은 씨감자 선별뿐만 아니라 다양한 농산물의 감염을 검출하는 기반기술로 응용이 가능할 것으로 판단된다.
우리나라의 씨감자 생산체계는 기본종, 기본식물, 원원종, 원종, 보급종 등 5단계의 증식체계를 거쳐 씨감자를 생산농가에 보급하고 있으나 보급률은 25% 정도 밖에 안되는 실정이다. 또한 씨감자 증식과정에서 토양중 괴경이나 지상부 경엽이 병해충에 쉽게 노출되기 때문에 병해충의 감염을 완전히 차단하는 것은 불가능하다. 따라서 현재의 증식단계를 줄여야 씨감자의 품질이 향상될 것이므로 이것을 실현하기 위해서는 상위단계 씨감자의 생산력을 획기적으로 증대시킬수 있는 기술이 전제되어야 한다(구, 2002). (중략)
씨감자 생산은 보통 조직배양 $\longrightarrow$기본종$\longrightarrow$기본식물$\longrightarrow$원원종$\longrightarrow$원종$\longrightarrow$보급종의 6단계의 증식과정을 거치면서 이루어진다. 씨감자 생산에서 가장 중요한 것은 바이러스에 감염되지 않은 무병 씨감자의 생산이다. 이를 위하여 정부에서는 엄격한 생산 계획과 관리 하에 격리된 포장에서 씨감자를 생산하여 보급하고 있으나, 보급율은 25%에 불과한 실정이다. (중략)
전북지방의 씨감자 생산적지를 선정하기 위한 기초자료로서 고랭지대인 전북 무주군 무풍면 상오정 1대(700-800m)와 평야지인 전주에서 대관령 고랭지 시험장산 원종 남작(Solanum tuberosum Var. Irish Cobbler, Shimabara)과 무주산 재래종 씨감자(품종미상)를 재배하면서 씨감자의 바이러스 이병율 및 재배기간중의 지역별 감염율등을 혈청학적으로 검정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 우리나라에서 현재 유통되고 있는 씨감자의 감자 바이러스 혼합감염율은 $50.88\%$이며 바이러스별로는 Potato virus Y(PVY)$(34.87\%)$$(40.33%)$$(41.00\%)$< Potato Virus(PVX)$(87.10\%)$로서 PVX가 가장 높은 이병율을 나타내고 있었다. 2. 감자바이러스의 1년차 감염율은 무주지방이 $11.7\%$, 전주지방이 $18.95\%$로서 무주지방이 낮고 특히 곤충매개가 심한 PVY의 감염율은 $6.45\%$ 밖에 안되어 이는 씨감자 생산지로서 적합함을 인정할 수 있었다. 3. 씨감자 자체의 바이러스 이병율은 대관령산이 $41.75\%$, 무주 재래종이 $42.17\%$로서 대관령산과 비슷하였고 작황은 대관령 산이 좋았다.
최근 감자 바이러스의 발생 양상은 과거에는 PLRV의 이병율이 높았으나 현재에는 PVY의 발생이 많아지고 있는 추세인데 이는 '대서'와 '추백' 같은 감수성 품종의 재배 면적의 증가와 바이러스 이병율이 높은 재배 환경에서의 채종 때문일 것이다. 특히 2기작 감자 포장에서의 당대 감염율을 보더라도 '대서'와 '추백'의 이병율이 높아 감수성 품종으로 '수미'와 '대지'는 이병율이 비교적 낮아 저항성으로 나타났다. 또한 2기작 감자 재배지대에서 PVY에 감수성인 '추백' 품종의 안전한 씨감자 생산을 위해서 주위에 일반감자 재배가 없는 격리가 양호한 환경에서의 채종과 그렇지 못한 환경에서의 채종을 비교하여 재감염 정도를 조사하였는데 조직 배양후 2세대 걸친 노지 재배에서 바이러스 이병율이 약 3배의 차이를 보여 씨감자 생산에서 채종 환경의 중요성을 입증한 결과로 판명되었다.
우리나라 씨감자에 발생하고 있는 잠복성바이러스의 종류와 이들의 감염상태를 조사하기 위하여 감자 원원종포, 원종포 그리고 원예시험장 등에서 수집한 외관상 무병 건전하게 보이는 감자와 외관상 바이러스병징이 뚜렷한 감자를 대상으로 혈청학적방법에 의해 바이러스 검정을 실시했다. 검정대상 바이러스는 Potato Virus X(PVX), Potato Virus S(PVS), Potato Virus M(PVM), 그리고 Potato Virus Y (PVY)의 4종이며, 바이러스의 검정은 van Slogteren의 미량침강법에 따라 실시했다. 결과는 다음과 같다. 1. 씨감자 생산포장에서 수집한 감자잎에서 PVX, PVS, PVM, 그리고 PVY가 검출되었는데 우리나라 감자에서 PVM이 검출되었다는 실험적 보고는 이것이 처음이다. 2. 외관상 건전하게 보이는 씨감자의 거의 $100\%$ PVX와 PVS에 약 $10\%$가 PVX+PVS+PVM에, 약 $4.5\%$가 PVX+PVS+PVY에, 그리고 $1\%$ 정도가 PVX+PVS+PVM+PVY에 각각 혼합감염되어 있었다. 3. PVX와 PVS만이 검출된 식물은 대부분 병징이 음폐되어 있었으나 PVX, PVS와 함께 PVY가 검출된 식물은 대부분 뚜렷한 병징을 나타내고 있었다. 4. 혈청학적 미량탐강법은 육안적인 관찰만으로는 검정이 어려운 PVX, PVS, PVM 및 mild strain의 PVY를 씨감자 생산지에서 대규모의 식물은 대상으로 신속정확히 검정하는데 애우 편리한 방법으로 생각된다.
2001년 이후 2005년까지 북측의 씨감자 생산은 남북 협력으로 순조롭게 진행되어 일부는 이미 3급종자(G3)까지 공급되어 증식되고 있는 실정이다. 특히 씨감자 생산 체계의 상위단계인 조직 배양과 양액씨감자(G0) 생산에서는 성공적이었으며, 다음 단계인 1급(G1)$\sim$4급종자(G4)를 어떻게 무병, 격리 조건에서 감염율을 적게 유지, 증식, 관리하느냐에 달려 있다고 해도 과언이 아닐 것이다. 벌써 상위단게 씨감자 생산의 효과가 나타나기 시작하고 있어, 특히 남북한의 지속적인 협력이 절실하다고 할 수 있다.
하령 감자는 전분함량이 높고, 역병에 저항성이며 맛이 좋은 품종으로 2005년도에 신품종으로 등록되었다. 2010년 저장 중인 하령 씨감자에서 심한 표피의 괴저와 표면이 융기되고 원형의 괴저 병반이 생기는 괴경 괴저 증상이 발생하였다. 괴경 괴저 증상의 감자를 PVY 진단용 프라이머를 이용한 RT-PCR 분석 결과 모두 PVY가 검출되었다. 괴저증상 감자에서 검출된 $PVY^{Hkr}$ 외피단백질의 유전자 염기서열을 분석하였고 $PVY^{Kor}$, $PVY^N$, $PVY^{NTN}$, $PVY^O$, $PVY^C$ 계통과 상동성을 비교한 결과 $PVY^{Hkr}$은 2005년에 보고된 $PVY^{Kor}$와 2개의 염기를 제외하고 정확히 일치하였다. PVY 감염이 저장 중인 하령 품종에서 같은 병징을 일으키는지 확인하기 위해 5품종의 감자(하령, 수미, 대서, 대지, 추백)와 2종의 바이러스(PVY, PLRV)를 이용하여 생물검정을 실시하였다. 그 결과, 괴경 괴저 증상은 PVY에 감염된 저장 중인 하령 품종에서만 나타났다.
최근 씨감자 채종지에서 PVX, PVY 감염증상과 유사한 비(非)바이러스성 모자이크증상(Non virus-induced mosaic symptom, NVMS)이 매년 $5{\sim}20%$ 정도 발생하고 있어서 씨감자포장검사원과 농민간에 많은 마찰이 발생하고 있는 실정이다. 본 실험에서는 NVMS의 원인을 구명하고자 의심주와 건전주의 재배적, 병리적, 화학적 분석을 실시하였고, NVMS를 일으키는 원인중의 하나로 생각되는 감자밭 제초제에 대한 약해증상 유기실험을 포장과 실내에서 실시하였다. 이상모자이크 증상주가 심겨진 근권토양의 이화학적 특성 (pH, EC) 및 토양 내 각종 성분(유기물 $P_2O_5$, K, Ca, Mg. $NO_3$) 함량을 분석하여 이상모자이크 발생률과의 상관분석을 실시한 결과 어떠한 상관성도 보이지 않았다. 또한 바이러스항혈청(PVY, PVX)을 이용한 ELISA 검정과 투과(透過)전자현미경(TEM) 검경에서도 어떠한 바이러스 입자도 검출되지 않았다. 지표식물인 Nicotiana tabacum과 N. sylvestrus를 이용한 접종에서도 PVX와 PVY 감염증상이 보이지 않았다. 감자밭용 제초제 처리 결과 Pendimethalin.linuron EC+paraquat SL 처리구에서는 61.1%의 NVMS 발생률을 보였으며, Pendimethalin EC+paraquat SL 처리구에서는 47.2%, Oxadiazon pendimethalin EC+paraquat SL 처리구에서는 19.4%의 발생률을 보였다. 따라서 Pendimethalin 성분이 함유된 제초제 처리가 감자의 NVMS 발생 원인으로 판명되었다. 수량에서는 처리간 유의성을 보이지 않았으나, 다만 Dicamba 처리구에서 무처리 대비 23%의 수량감소가 있었다. 또한 전년도 제초제 처리한 괴경을 파종하여 후대검정한 결과 어떠한 이상모자이크 증상도 관찰되지 않았다.
Pathogenic fungi and bacteria such as Pectobacterium atrosepticum, Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus, Verticillium albo-atrum, and Rhizoctonia solani were the major microorganism which causes diseases in seed potato during postharvest process. Current detection method for disease-infected seed potato relies on human inspection, which is subjective, inaccurate and labor-intensive method. In this study, a reflectance spectroscopy was used to classify sound and disease-infected seed potatoes with the spectral range from 400 to 1100 nm. Partial least square discriminant analysis (PLS-DA) with various preprocessing methods was used to investigate the feasibility of classification between sound and disease-infected seed potatoes. The classification accuracy was above 97 % for discriminating disease seed potatoes from sound ones. The results show that Vis/NIR reflectance method has good potential for non-destructive sorting for disease-infected seed potatoes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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