Park, Hyo-Jin;Kim, Ji-Yeon;Jung, Kyung-In;Kim, Tae-Jin
IMMUNE NETWORK
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v.9
no.4
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pp.138-146
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2009
Background: The MHC region of the chromosome contains a lot of genes involved in immune responses. Here we have investigated the mouse NG29/Cd320 gene in the centrometrically extended MHC region of chromosome 17. Methods: We cloned the NG29 gene by RT-PCR and confirmed the tissue distribution of its gene expression by northern blot hybridization. We generated the NG29 gene expression constructs and polyclonal antibody against the NG29 protein to perform the immunofluorescence, immunoprecipitation and flow cytometric analysis. Results: The murine NG29 gene and its human homologue, the CD320/8D6 gene, were similar in the gene structure and tissue expression patterns. We cloned the NG29 gene and confirmed its expression in plasma membrane and intracellular compartments by transfecting its expresssion constructs into HEK 293T cells. The immunoprecipitation studies with rabbit polyclonal antibody raised against the NG29-NusA fusion protein indicated that NG29 protein was a glycoprotein of about 45 kDa size. A flow cytometric analysis also showed the NG29 expression on the surface of Raw 264.7 macrophage cell line. Conclusion: These findings suggested that NG29 gene in mouse extended MHC class II region was the orthologue of human CD320 gene even though human CD320/8D6 gene was located in non-MHC region, chromosome 19p13.
Objective: The aim of this study was to investigate the protective effect of wheat phytase as a structural decomposer of inflammatory nucleotides, extracellular adenosine triphosphate (ATP), and uridine diphosphate (UDP) on HT-29 cells. Methods: Phosphatase activities of wheat phytase against ATP and UDP was investigated in the presence or absence of inhibitors such as L-phenylalanine and L-homoarginine using a Pi Color Lock gold phosphate detection kit. Viability of HT-29 cells exposed to intact- or dephosphorylated-nucleotides was analyzed with an EZ-CYTOX kit. Secretion levels of pro-inflammatory cytokines (IL-6 and IL-8) in HT-29 cells exposed to substrate treated with or without wheat phytase were measured with enzyme-linked immunosorbent assay kits. Activation of caspase-3 in HT-29 cells treated with intact ATP or dephosphorylated-ATP was investigated using a colorimetric assay kit. Results: Wheat phytase dephosphorylated both nucleotides, ATP and UDP, in a dose-dependent manner. Regardless of the presence or absence of enzyme inhibitors (L-phenylalanine and L-homoarginine), wheat phytase dephosphorylated UDP. Only L-phenylalanine inhibited the dephosphorylation of ATP by wheat phytase. However, the level of inhibition was less than 10%. Wheat phytase significantly enhanced the viability of HT-29 cells against ATP- and UDP-induced cytotoxicity. Interleukin (IL)-8 released from HT-29 cells with nucleotides dephosphorylated by wheat phytase was higher than that released from HT-29 cells with intact nucleotides. Moreover, the release of IL-6 was strongly induced from HT-29 cells with UDP dephosphorylated by wheat phytase. HT-29 cells with ATP degraded by wheat phytase showed significantly (13%) lower activity of caspase-3 than HT-29 cells with intact ATP. Conclusion: Wheat phytase can be a candidate for veterinary medicine to prevent cell death in animals. In this context, wheat phytase beyond its nutritional aspects might be a novel and promising tool for promoting growth and function of intestinal epithelial cells under luminal ATP and UDP surge in the gut.
Background: Aberrant expression of the microRNA-29 family is associated with tumorigenesis and cancer progression. As transport carriers, tumor-derived exosomes are released into the extracellular space and regulate multiple functions of target cells. Thus, we assessed the possibility that exosomes could transport microRNA-29c as a carrier and correlations between microRNA-29c and apoptosis of bladder cancer cells. Materials and Methods: A total of 28 cancer and adjacent tissues were examined by immunohistochemistry to detect BCL-2 and MCL-1 expression. Disease was Ta-T1 in 12 patients, T2-T4 in 16, grade 1 in 8, 2 in 8 and 3 in 12. The expression of microRNA-29c in cancer tissues was detected by quantitative reverse transcriptase PCR (QRT-PCR). An adenovirus containing microRNA-29c was used to infect the BIU-87 human bladder cancer cell line. MicroRNA-29c in exosomes was measured by QRT-PCR. After BIU-87 cells were induced by exosomes-derived microRNA-29c, QRT-PCR was used to detect the level of microRNA-29c. Apoptosis was examined by flow cytometry and BCL-2 and MCL-1 mRNA expressions were assessed by reverse transcription-polymerase chain reaction. Western blotting was used to determine the protein expression of BCL-2 and MCL-1. Results: The expressions of BCL-2 and MCL-1 protein were remarkably increased in bladder carcinoma (p<0.05), but was found mainly in the basal and suprabasal layers in adjacent tissues. The expression of microRNA-29c in cancer tissues was negatively correlated with the BCL-2 and MCL-1. The expression level of microRNA-29c in exosomes and BIU-87 cells from the experiment group was higher than that in control groups (p<0.05). Exosome-derived microRNA-29c induced apoptosis (p<0.01). Although only BCL-2 was reduced at the mRNA level, both BCL-2 and MCL-1 were reduced at the protein level. Conclusions: Human bladder cancer cells infected by microRNA-29c adenovirus can transport microRNA-29c via exosomes. Moreover, exosome-derived microRNA29c induces apoptosis in bladder cancer cells by down-regulating BCL-2 and MCL-1.
Adhesion events of monocytes represent an important step in inflammatory responses induced by chemokines. The ${\beta}1$-integrin CD29 is a major adhesion molecule regulating leukocyte migration and extravasation. Although several adhesion molecules have been known as regulators of CD29, the molecular interactions between CD29 and its regulatory adhesion molecules (such as CD98 and CD147) have not been fully elucidated. Therefore, in this study, we examined whether these molecules are functionally, biochemically, and cell-biologically associated using monocytic U937 cells treated with aggregation-stimulating and blocking antibodies, as well as enzyme inhibitors. The surface levels of CD29, CD98, and CD147 (but not CD43, CD44, and CD82) were increased. The activation of CD29, CD98, and CD147 by ligation of them with aggregation-activating antibodies triggered the induction of cell-cell adhesion, and sensitivity to various enzyme inhibitors and aggregation-blocking antibodies was similar for CD29-, CD98-, and CD147-induced U937 cell aggregation. Molecular association between these molecules and the actin cytoskeleton was confirmed by confocal microscopy and immunoprecipitation. These results strongly suggest that CD29 might be modulated by its biochemical and cellular regulators, including CD98 and CD147, via the actin cytoskeleton.
Purpose: We intended to researched the relations between abdominal temperature and leukorrhea. Methods: We selected the 26 leukorrhea patients and 17 control group. We measured 4 points abdominal temperature (Chung-wan(CV12), Kwan-won(CV4), Gui-rae(ST29)) by DITI. We checked the difference of temperature between CV12, CV4, ST29 of leukorrhea group and control group. And we checked the difference of temperature between CV12 and CV4 / Lt. ST29 and Rt. ST29 / CV12 and Lt. ST29 / CV12 and Rt. ST29 / CV4 and Lt. ST29 / CV4 and Rt. ST29. For statistics, we used Mann-Whitney test, SPSS 12.0 for windows. Results: The difference of temperature between CV12, CV4 and ST29 which are abdomen shows statistically insignificant result in this study. But, the difference of temperature between (${\Delta}T$) CV4 and Rt. ST29 which are abdomen shows statistically significant result. Conclusion: The leukorrhea patients show higher temperature CV12, CV4 and ST29 than control group. In lower abdomen, the temperature between leukorrhea and control group shows little difference.
The purpose of this study is to investigate hypotensive effect of BDR-29, new herbal preparation of Cassiae Semen, Prunellae Spica, Uncariae Ramulus et Uncus, and Tribuli Semen, in stroke-prone spontaneously hypertensive rats (SHR-SP). SHR-SP were treated with BDR-29 at a dose of 100, 200 mg/kg/day orally for 13 weeks. In the BDR-29 treat group, mean blood pressure and systolic blood pressure were significantly reduced (p<0.05). In phenylephrine-precontracted arota and carotid artery, BDR-29 induced endothelium-dependent vascular relaxation. Hematological findings and biochemical examination revealed no evidence of specific toxicity related to BDR-29. In addition, BDR-29 was markedly attenuated intima-media thickness of thoracic aorta with progression of atherosclerosis. SHR-SP were treated with BDR-29 were significantly increased eNOS expression in arota. These results indicated that BDR-29 improves blood pressure as well as initial atherosclerotic lesion.
Park, Soo-Jung;Lee, Woong-Hee;Goo, Tae-Won;Yun, Eun-Young;Hwang, Jae-Sam;Kim, Ho;Shong, Min-Ho;Kwon, O-Yu
Journal of Life Science
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v.10
no.2
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pp.150-156
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2000
This experiment was performed to evaluate the effect of TSH (thyroid-stimulating) on the ERp29 (endoplasmic reticulum resident 29 kDa protein) gene expression in the rat thyrocytes of FRTL-5 cells. Although ERp29 mRNA was constantly expressed, its expression began to increase remarkably from 10-9 M TSH. and its maximum expression was at 5×10-9 M TSH (about 3.5 fold). On the other hand, the effect of TSH on the abundance of ERp29 mRNA started within 6 h, and peaked at 8 h (about 2.5 fold). Actinomycin D (transcription inhibitor) strongly blocked this effect while cycloheximide (translation inhibitor) did not. The half-life of ERp29 mRNA was about 4.5 h in the presence or absence of TSH that was not affected by the stability of ERp29 mRNA. The effect of TSH on the ERp29 gene expression was specific, while other growth factors (transfferin, insulin, and hydrocortisone) did not alter its expression. Our data indicate for the first time that the expression of ERp29 is regulated transcriptionally by TSH in the thyrocytes.
A. niger H-18 and A. fumigatus E-29 wrer selected for their strong abilities to produce cellulase. The λd numerical values of the cotton fabrics inoculated with A. niger H-18 and A. fumigatus E-29 were 580 nm for the both strains of molds. By the growth of molds, lightness, original color scale, and grey scale of the fabrics gradually decreased while chroma increased. The minimum inhibitory concentrations of mold-proofing agents, such as Leperon WL, 8-hydroxyquinoline copper acetate, trimethylol melamine and dimethyl ethylene urea was 50 ppm. Glycoxale was not effective at the above mentioned concentration. Since Leperon WL, trimethylol melamine and dimethyl ethylene urea effectively inhibited the growth of A. niger H-18 and A. fumigatus E-29, tensile strength and elongation of the fabrics were not changed. however, cotton fabrics treated with glycoxale of the fabrics were not changed. However, cotton fabrics treated with glycoxale and inoculated with A. niger H-18 and A. fumigatus E-29 showed decreased in tensile strength by 31.1% and 33.9%, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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