Among 203 avian pathogenic Escherichia coli (APEC) isolated from poultry with colibacillosis in korea, 14 isolates were selected from total 68 isolates transferred R plasmid and classified into 5 groups on the basis of antimicrobial minimal inhibitory concentration (MIC) pattern, farm source and O serotype. An association between clonal origin and R plasmid of them was investigated by R plasmid profile, restriction endonuclease analysis and pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). The strains that showed the same or very similar antimicrobial MIC pattern, but different farm source and O serotype, revealed different PFGE pattern, which seemed to be different clonal origin. And the strains that showed the same MIC pattern and O serotype, revealed different PFGE pattern, seemed to be originated from different clone. Also the strains showing the same MIC pattern and farm source, but different O serotype, revealed to be different clonal origin. The strains that showed the same or similar MIC pattern, farm source, and O serotype, revealed identical or similar PFGE pattern, which seemed to belong to be one clone. Meanwhile, horizontal transfer of R plasmid seems to be common in APEC with regardless of O serotype and clone of the strains. These results indicate that rapid and accurate epidemiological survey of APEC can be possible by the combination of O serotyping, plasmid profiling and PFGE analysis following the classification of them into groups of antimicrobial drug resistance pattern.
Supardy, Nor Afifah;Ibrahim, Darah;Sulaiman, Shaida Fariza;Zakaria, Nurul Aili
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권6호
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pp.872-881
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2012
The inhibitory effect of the Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 strain caused by the hexane extract of Halimeda discoidea (Nor Afifah et al., 2010) was further evaluated by means of the microscopy view and its growth curves. The morphological changes of the K. pneumoniae ATCC 13883 cells were observed under the scanning electron microscope (SEM) and transmission electron microscope (TEM) after they were treated at minimum inhibitory concentration (MIC; 0.50 mg/ml) (Nor Afifah et al., 2010) for 12, 24, and 36 h. The results showed the severity of the morphological deteriorations experienced by the treated cells. The killing curve assay was performed for 48 h at three different extract concentrations (1/2 MIC, MIC, and 2 MIC). An increase in the extract concentration of up to 2 MIC value did significantly reduce the number of cells by approximately 1.9 $log_{10}$, as compared with the control. Identification of the potential compounds of the extract responsible for the antibacterial activity was carried out through the gas chromatography-mass spectrum (GC-MS) analysis of the active subfraction, and the compound E-15-heptadecenal was identified and suggested as the most potential antibacterial compound of this extract. The subsequent cellular degenerations showed by the data might well explain the inhibitory mechanisms of the suggested antibacterial compound. All of these inhibitory effects have further proven the presence of an antibacterial compound within H. discoidea that can inhibit the growth of K. pneumoniae ATCC 13883.
This study was performed to investigate the anti-microbial activity of extract from Korean fermented soybean paste (doen-jang) against 16 types of oral microbes, and to determine the minimum inhibition concentration (MIC) of the extract for three major microbes causing human oral diseases (Streptococcus mutans, Porphyromonas gingivalis, and Candida albicans). The extract was prepared using ethyl acetate and it was treated with the oral microbes at a concentration of 5.00 mg/ml (0.5%). The anti-microbial activity and MIC were measured using broth dilution method. Significant reduction of microbial activities of 16 types of oral microbes occurred when the soybean paste extract was added to the broth compared to the control (p<0.01), and striking inhibition (more than 99%) was observed in ten types. S. mutans, which causes dental caries, showed MIC at a concentration of 1.25 mg/ml for the extract. P. gingivalis, which causes adult periodontal disease, showed MIC at a concentration of 2.50 mg/ml for the extract. C. albicans, which causes denture stomatitis and angular stomatitis, showed MIC at a concentration of 20 mg/ml for the extract. These results indicate that ethyl acetate extract of doen-jang showed strong anti-microbial effect against 16 types of oral microbes, and the anti-microbial effect of the extract against oral microbes was stronger against bacteria than against fungi. The anti-microbial effect might be possibly enhanced by the fermentation of soybeans.
The aim of this study was to determine the minimal inhibitory concentration(MIC) of cefixime, which is a 3rd generation of cefalosporin, against 6 species of putative periodontopathogens; Fusobacterium nucleatum, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens, Tannerella forsythia and Porphyromonas gingivalis. The efficacy of cefixime was examined by comparing it with that of several antibiotics(amoxicillin, $Augmentin^{(R)}$ ciprofloxacin, metronidazole, and tetracycline), which were used as the control. The MIC was measured using a microdilution method. The MIC of cefixime against the putative periodotopathogens, as a single use regimen, was relatively lower than that of the other antibiotics. The MIC of cefixime/metronidazole against P. intermedia ChDC KB14, P. nigrescens ChDC KB50, F. nucleatum ChDC PV-F37, F. nucleatum ChDC F130, and F. nucleatum ChDC F175, as a simultaneous regimen, was lower than that of the other antibiotics. The concentration of cefixime in the crevicular fluid of volunteers who received 250mg every 12 hours for 3 days was $9{\mu}g/ml$ after 9 hours. In conclusion, cefixime showed good antimicrobial activity in a single treatment or as a combined therapy with amoxicillin, $Augmentin^{(R)}$ or metronidazole against 6 periodontopathogens.
인삼의 잎에서 발생한 잿빛곰팡이병의 병반으로부터 병원균인 Botrytis cinerea의 224개 균주를 단포자 분리하여 실험에 사용하였다. 분리한 B. cinerea는 한천희석법을 사용하여 procymidone, carbendazim, carbendazim과 diethofencarb 합제의 균사생장 억제 효과를 $EC_{50}$(균사생장을 50% 억제하는 농도)과 MIC(균사생장을 100% 억제하는 최소농도) 값을 조사하였다. Procymidone에 대한 MIC값을 가지고서 병원균을 분류하면 0.8과 $4.0{\mu}g/ml$ 사이에 속하는 그룹과 $20{\mu}g/ml$ 이상인 그룹으로 크게 분류할 수 있었다. 2005년에 분리한 균주들은 지역별로 procymidone에 대한 감수성의 변화가 매우 다양하게 나타났다. 실험에 사용한 procymidone의 각각의 농도에 대한 균사 생장 억제 양상을 가지고 병원균을 각각 감수성($EC_{50}$ 값이 $2.0{\mu}g/ml$ 이하), 중도저항성($EC_{50}$ 값이 2.0과 $5.0{\mu}g/ml$ 사이), 저항성($EC_{50}$ 값이 $5.0{\mu}g/ml$ 이상) 등의 3개의 그룹으로 분류할 수 있었다. 이 기준으로 분류하였을 때, procymidone에 대해서 저항성인 B. cinerea의 비율은 2005년에 19.3%가 2006년에는 27.5%로 상승하였으며, 저항성 그룹의 평균 $EC_{50}$ 값도 $10.0{\mu}g/ml$에서 $237.3{\mu}g/ml$으로 상승하였다. Procymidone과 carbendazim의 경우에 다중저항성을 보이는 균주는 90개로 전체의 40.2%이었으며, 합제와의 다중저항성을 보이는 균주는 9개 밖에 없었다.
천연 생리활성물질의 개발과 수산미이용자원의 효율적 이용방안을 모색하기 위하여 별불가사리, 오징어먹즙, 성게껍질, 우렁쉥이 껍질, 구멍쇠미역, 산말, 모자반, 참빗풀 등을 대상으로 물, 에테르, 아세톤, 메탄올로 순차 용매추출하여 각 용매 추출구간별, 시료별 항균성을 검색하였다. 시료추출구간별 평균수율은 물 추출구, 에테르 추출구, 아세톤 추출구 및 메탄올 추출구에서 각각 20, 1.4, 2.8 및 1.1%로 나타나 물추출구의 수율이 가장 높았다. B. subtilis에 대한 항균력 검색 결과, 모자반 에테르 추출구와 메탄올 추출구에서 각각 MIC가 80 및 70 ${\mu}g/disk$로 나타나 비교적 강한 항균력을 가지는 것으로 나타났다. S. aureus에 대한 항균효과는, 모자반의 에테르 추출구, 아세톤 추출구 및 메탄올 추출구의 MIC가 각각 160, 180 및 70 ${\mu}g/disk$로 나타나 비교적 높은 항균성을 보였으며, 참빗풀의 에테르 추출구와 아세톤 추출구에서도 각각 MIC가 50 및 170 ${\mu}g/disk$로서 낮은 농도에서도 항균효과를 나타내었다. 추출구간별 항균효과를 보면, 비극성용매인 에테르 추출구에서 모든 시료의 MIC가 700 ${\mu}g/disk$ 이하로 나타나 에테르 추출구에 S. aureus에 대해 매우 강한 항균효과를 가지는 물질이 존재하는 것으로 나타났다.
50가지 생약재를 95% 에탄올과 물추출하여 식중독 세균인 S. aureus와 E. coli O157:H7에 대한 항균활성을 조사하였다. 한천배지확산법에 따른 생육저해효과를 측한 결과, S. aureus 에 대하여 우슬>목단피>지실>황백, 건강, 민들레 순으로, E. coli O157:H7에 대하여 목단피>우슬>건강>지실, 황백 순으로 활성을 나타내었다. MIC는 S. aureus에 대하여 우슬이 156.25 $\mu$g/mL, 목단피와 황백이 625 $\mu$g/mL로 나타났으며, E. coli O157:H7에 대하여 우슬과 목단피의 MIC는 각각 625, 312.5 $\mu$g/mL로 높은 항균력을 나타내었다. 가장 높은 활성을 보인 우슬과 목단피를 용매분획(hexane, CHC1$_3$, ethyl acetate, butanol)하여 한천배지 확산법에 의한 두 균에 대한 생장저해 효과를 측정하였다. 우슬은 ethyl acetate 분획물에서, 목단피는 CHC1$_3$과 ethyl acetate 분획물에서 각각 높은 활성을 나타내었다.
황련 추출물의 충치 예방효과 가능성을 확인하고자 S. mutans JC-2에 대하여 황련 추출물 및 그의 주요 활성성분의 항균효과, 산생성 억제효과, GTase 활성 억제효과, 균체부착 억제효과를 조사하였다. 메탄올 추출물은 물추물에 비하여 S. mutans에 대해 강한 항균효과를 나타내었으며, 이들 추출물의 S. mutans에 대한 최소저지농도(MIC)는 각각 $130\;{\mu}g/mL$, $200\;{\mu}g/mL$이었다. 황련의 주요 활성성분인 berberine과 palmatine의 MIC는 각각 $50\;{\mu}g/mL$, $110\;{\mu}g/mL$로 황련 추출물에 비하여 강한 항균활성을 나타내었다. 메탄올 추출물, berberine, palmatine을 $121^{\circ}C$, 15분간 열처리했을 때 항균효과가 전혀 감소하지 않아, 열에 매우 안정함이 확인되었다. S. mutans의 산생성에 대해서도 MIC 농도에서 메탄올 추출물, berberine, palmatine 모두 배양 24시간째에 산생성을 완전하게 억제하였다. GTase 활성 억제효과는 $300\;{\mu}g/mL$ 농도에서 메탄올 추출물, berberine, palmatine이 각각 23.2, 46.1, 17.1%의 억제율을 보였고, 물 추출물은 억제효과가 없었다. 반면에 S. mutans의 부착에 대해서는 생장 부분저해농도에서 물 추출물과 메탄올 추출물, beberine, palmatine의 경우 저해율이 각각 59.2%, 13.3%. 4.2%, 41.7%로써 물 추출물과 palmatine이 높은 저해율을 나타내었다. 이상의 결과로부터 황련 추출물의 충치억제효과는 주요 활성성분인 berberine과 palmatine의 S. mutans에 대한 항균효과, GTase 활성억제와 균체 부착 억제효과 등에 기인한 것이라 여겨지며, 황련 추출물이 충치예방을 위한 기능성 천연소재로서 매우 우수한 것으로 판단되었다.
Methicillin-resistant Staphlococcus aureus(MRSA)는 다양한 항생제에 저항성을 나타내며 제 3세대 cephalosporin계가 보급된 1980년대 이후 원내 감염의 중요 원인균으로 대두되고있다. 그러나 MRSA 동정의 오류나 실수로 인한 부적절한 치료에 문제가 있으며 항생제의 오용으로 인한 다제약제 내성획득이 임상에서 심각한 문제가 되거 있다. 따라서 MRSA 감염의 적절한 치료는 이 원인 균의 신속하고 믿을 수 있는 동정을 필요로 한다.본 연구에서는 분자 생물학적인 동정법을 확립하기 위하여 항생제의 내성 기구인 페니실린 결합 단백질 2‘(PBP2')를 암호화하는 mec A 유전자를 PCR 방법으로 증폭하여 MIC test 결과와 비교하여 MRSA를 동정하는데 PCR법이 유용한지를 판명하였다.각 환자의 다종 검체로부터 S. aureus 120균주를 분리하여 oxcillin으로 MIC test를 한 결과 MRSA의 비율로는 농에서는 MRSA가 61.9%로 가장 높게 판명되었다. 120균주 중 MRSA 40균주, MSSA 40균주를 성별하여 PCR 방법으로 동정하여 MIC test와 비교 한 결과, MRSA 1균주(2.5%), MSSA는 2균주(5%)의 차이만이 MIC test와 상이성을 나타내었다. 이러한 결과로 볼 때 PCR법으로 MRSA를 동정하는 것은 유용하며 일상검사 업무로서 활용성이 높을 것으로 판단되었다.
Objective : This experimental study was performed to investigate the effect of herbal eye drops, Sean-tang and Coptidis rhizoma on Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Pseudomonas aeruginosa keratitis. Methods : After administering herbal eye drops (Sean-tang, Coptidis rhizoma) on Staphylococcus ausreus, Staphylococcus. epidermidis and Pseudomonas aeruginosa, I measured MIC and the size of inhibition zone. MIC was measured by dropping to $50{\mu}{\ell}$ according to density(l00%, 10%, 1%, 0.1%). Anti-bacterial potency was measured by the size of inhibition zone with change of volume. Result : On Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Coptidis rhizoma showed the highest anti-bacterial potency and on Pseudomonas aeruginosa, Sean-tang, Coptidis rhizoma was nor anti-bacterial potency. Conclusions : The present author think that the herbal eye drops, Sean-tang and Coptidis rhizoma can be used to cure Staphylococcus aureus, Staphyloccus epidermidis keratitis and if further study is performed, the use of the herbal eye drops will be valuable and beneficial in the clinical medicines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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