Background: Poor disease management and irregular vector control could predispose sheltered animals to disease such as feline Bartonella infection, a vector-borne zoonotic disease primarily caused by Bartonella henselae. Objectives: This study investigated the status of Bartonella infection in cats from eight (n = 8) shelters by molecular and serological approaches, profiling the CD4:CD8 ratio and the risk factors associated with Bartonella infection in shelter cats. Methods: Bartonella deoxyribonucleic acid (DNA) was detected through polymerase chain reaction (PCR) targeting 16S-23S rRNA internal transcribed spacer gene, followed by DNA sequencing. Bartonella IgM and IgG antibody titre, CD4 and CD8 profiles were detected using indirect immunofluorescence assay and flow cytometric analysis, respectively. Results: B. henselae was detected through PCR and sequencing in 1.0% (1/101) oral swab and 2.0% (1/50) cat fleas, while another 3/50 cat fleas carried B. clarridgeiae. Only 18/101 cats were seronegative against B. henselae, whereas 30.7% (31/101) cats were positive for both IgM and IgG, 8% (18/101) cats had IgM, and 33.7% (34/101) cats had IgG antibody only. None of the eight shelters sampled had Bartonella antibody-free cats. Although abnormal CD4:CD8 ratio was observed in 48/83 seropositive cats, flea infestation was the only significant risk factor observed in this study. Conclusions: The present study provides the first comparison on the Bartonella spp. antigen, antibody status and CD4:CD8 ratio among shelter cats. The high B. henselae seropositivity among shelter cats presumably due to significant flea infestation triggers an alarm of whether the infection could go undetectable and its potential transmission to humans.
Atopic dermatitis is a chronic inflammatory skin disease characterized by pruritic and erythromatous skin lesions. In this study we examined the suppressive effects of SJJY on der f induced atopic dermatitis in NC/Nga mic, and concluded as follows: Oral administration of SJJY significantly decreased the severity score in the skin lesions at the dosage of 6.6 mg/25g/day for 8 weeks. SJJY significantly suppressed the infiltration of inflammatory cells into skin compared with control, and decreased the expression of CD4, CD8, CD20 and CCR3 in the skin lesions. SJJY significantly decreased the level of IgE in the serum compared with control, and the levels of IgM, IgG2a and IgG2b were also decreased. SJJY significantly decreased the levels of IL-6, but not TNF-a, in the serum compared with control. The levels of IFN-$\gamma$ was significantly increased in the supernatant of CD3/CD28 activated cultured splenocytes from the SJJY treated mice. The levels of IL-4 and IFN-$\gamma$ in the supernatants was much less in the der f activated splenocytes from SJJY treated mice than control. SJJY significantly increased the total number of cells in lymph node, while decreased the total number of skin compared with control. SJJY increased the number of CD3+ and CD4+ cell compared with control, while decreased the number of CD4+/CD25+ and CCR3+ cells in the PBMC. SJJY increased the number of CD3+, CD4+, CD8+, CD4+/CD25+, NKT+, CD3+/CD69+ cells compared with control, while decreased the number of B220+/IgE+, B220+/CD23+ cells in the lymph node. SJJY significantly decreased the number of CD3+/CD69+, CCR3+, B220+/IgE+, CD11b+/Gr-1+ compared with control in the skin lesions. Taken together, these results suggested that SJJY has suppressive effects on atopic dermatitis by the regulation of immune system and has potential as a therapeutics for atopic dermatitis. Further studies on molecular mechanisms on immune regulation are needed.
Objectives: This study was carried out to investigate 1he effects of Sasammaickmoondong-tang(SME) on colonic mucosal lesions induced by indomethacin in mouse. Methods: The normal group is 1hat no inflammation elicitated mouse. Control group is that gastro-inflammation elicitated mouse. Sample group is that SME administered mouse after gastro-inflammation elicitation. Results: In the common morphology and histochemical change, control group was observed various injury-mucous surface cell, micro-villi, paneth cell, surface epithelial cell, goblet cell-by hemorrhagic erosion, while sample group was as same as normal group. In the immunohistochemical change, 1he distributions of COX-1, Bcl-2, and BrdU treated with SME noticeably increased than control group(P<0.05). The distributions of TUNEL, $NF-{\kappa}B$, COX-2, $IL-2R-\alpha$, NK-1.1, ICAM-1, and CD11b/18 treated with SME noticeably decreased than control group(P<0.05). And the distribution of SBA was as same as normal group. Conclusions: According to the above results, it is supposed that Sasammaickmoondong-tang is applicable to colonic mucosal lesions.
This study aimed to evaluate the anti-asthmatic effects of Seonpye-tang (SPT) using OVA-induced asthmatic mice model. Scavenging activity of SPT on DPPH free radical and SOD-like activity of SPT were measured at final concentration 62.5, 125, 250, 500 (${\mu}g/m{\ell}$), RBL-2H3 cells were treated with DNP IgE for 24hr, and treated with SPT (1, 10, 100 ${\mu}g/m{\ell}$) for 1hr, followed by treatment with DNP-HSA for 1hr at $37^{\circ}C$. The level of IL-4 and TNF-${\alpha}$ were measured by ELISA. Asthmatic mice model was conducted by repeated challenge of OVA using C57BL/6 mice. Each group was treated with distilled water, SPT (400 mg/kg and 200 mg/kg) extract or cyclosporin A (10 mg/kg) for the later 8 weeks. Immune cells subpopulation, eotaxin, IL-5 and TNF-${\alpha}$ in BALF were analyzed. SPT dose-dependently increased Scavenging activity on DPPH free radical and SOD-like activity. SPT significantly ameliorated the increase of total cells number and eosinophil including of immune cell subpopulation of $CD3^+/CD69^+$, $CCR3^+$, $B220^+/CD22^+$, $B220^+/CD45^+$ and $B220^+/IgE^+$ cells in BALF comparing to control group. Eotaxin and IL-5 level in BALF were significantly decreased by SPT. These results strongly suggest that SPT would be a effective candidate for herbal-originated anti-asthmatic drug. However, this drug should be further studied for characterization of the accurate action and underlying mechanisms using variant disease model in the future.
The purpose of this research is to evaluate the effect of Mahaenggamseok-tang-gagambang (MGTG) on airway hyper- responsiveness (AHR), immune cells, cytokines and lung tissue in OVA-induced asthmatic mice. C578L/6 mice were injected, inhaled and sprayed with OVA for 12 weeks (3times a week) for asthma sensitization and challenge. Two experimental groups were treated with different concentrations of MGTG (400 mg/kg and 200 mg/kg) extract and cyclosporin A (10 mg/kg) for the later 8 weeks. Enhanced pause (Penh) levels were measured by whole body plethysmography. Immune cells were analyzed by flow cytometer in peripheral blood monocyte cell (PBMC) and lung cells. The IL-1b, IL-12, IFN-${\gamma}$, OVA-lgE, IL-4, IL-5, TNF-${\alpha}$ were analyzed by ELISA kit in serum and splenocyte+a-cCDS/a-CD28. Enhanced pause (Penh) levels of the MGTG groups (400 mg/kg and 200 mg/kg) were decreased significantly compared with that of control group. The numbers of MGTG groups (400 mg/kg and 200 mg/kg) on lung total cells were decreased significantly compared with that of control group. The numbers of MGTG groups (400 mg/kg and 200 mg/kg) on $CD3^+/CD69^+$, $B220^+/CD22^+$, $B220^+/CD23^+$, $B220^+/lgE^+$, $CCR3^+$ cells were decreased significantly compared with that of control group. The number of MGTG group (400 mg/kg) on $CD3^+/CD49b^+$ cells was decreased significantly compared with that of control group. The level of MGTG groups (400 mg/kg and 200 mg/kg) on IL-4, IL-5, IL-12, TNF-${\alpha}$, OVA-lgE were decreased significantly compared with that of control group. The level of MGTG group (400 mg/kg) on IL-1b, IL-1S, OVA-lgE were decreased significantly compared with that of control group. These results demonstrate that MGTG could be a desirable alternative therapy for allergic asthma by inhibiting the expression of immune cells, the activation of inflammatory mediator.
Objectives The purpose of this study is to investigate the effect of YHJST on atopic dermatitis in an experiment using an NC/Nga mice induced by DNCB, which has histological and clinical similarities to the condition in humans. Methods To investigate the effect of YHJST on atopic dermatitis(AD), we evaluated atopic dermatitis-like skin lesions by clinical skin index and analyzed immunological parameters in peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) and performed skin histology in ears and dorsal skin of NC/Nga ato-mouse. Results YHJST medicines decreased Serum level of IgE, IL-6, TNF-$\alpha$. Also total number of $CD69^+$, $CD3^+$ in PBMCs, absolute cell number of $CCR3^+CD3^+$, $CD11b^+Gr-1^+$ in Dorsal skin tissue, Serum IgG1, IgM, IgG2a and IgG2b decreased significantly. Furthermore YHJST is extremely effective to histological symptoms; dermal and epidermal thickening, hyperkeratosis and inflammatory cell infiltration and suppressed histologic infiltration of $CD4^+$ & $CCR3^+$ in ear and dorsal skin lesions significantly. YHJST decreased gene-expression of IL-6, TNF-$\alpha$, CCR3, Eotaxin mRNA than that of control group. Conclusions YHJST on atopic dermatitis to atopic dermatitis NC/Nga mouse induced DNCB was incredibly effective.
Park, K-W.;Yoo, J.Y.;Choi, K.M.;Yang, B.S.;Im, G.S.;Seol, J.G.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제22권1호
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pp.20-25
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2009
Xenotransplantation of pig organs into humans is a potential solution for the shortage of donor organs for transplantation. However, multiple immune barriers preclude its clinical application. In particular, the initial type of rejection in xenotransplantation is an acute cellular rejection by host $CD8^+$ cytotoxic T lymphocyte (CTL) cells that react to donor major histocompatibility complex (MHC) class I. The human cytomegalovirus (HCMV) glycoprotein Unique Short (US) 2 specifically targets MHC class I heavy chains to relocate them from the endoplasmic reticulum (ER) membrane to the cytosol, where they are degraded by the proteasome. In this study we transfected the US2 gene into minipig fetal fibroblasts and established four US2 clonal cell lines. The integration of US2 into transgenic fetal cells was confirmed using PCR and Southern blot assay. The reduction of Swine Leukocyte Antigen (SLA)-I by US2 was also detected using Flow cytometry assay (FACS). The FACS analysis of the US2 clonal cell lines demonstrated a substantial reduction in SLA-I surface expression. The level (44% to 76%) of SLA-I expression in US2 clonal cell lines was decreased relative to the control. In cytotoxicity assay the rate of $CD8^+$ T cell-mediated cytotoxicity was significantly reduced to 23.8${\pm}$15.1% compared to the control (59.8${\pm}$8.4%, p<0.05). In conclusion, US2 can directly protect against $CD8^+$-mediated cell lysis. These results indicate that the expression of US2 in pig cells may provide a new approach to overcome the CTL-mediated immune rejection in xenotransplantation.
Objectives : This study was conducted to evaluate the anti-hyperlipidemia effect of Scutellariae Radix, Aucklandiae Radix and Bupleuri Radix(SAB). Methods : FL83B cells were mouse liver hepatocytes, and we used this cell line. FL83B cells were treated with 0.5 mM oleic acid(OA) for 24 h, SAB extract was treated. After OA treatment, intracellular triglyceride (TG) and free fatty acid contents were measured with AdiopoRed™ assay and Free Fatty Acid Quantitation assay kit, respectively. Further, we evaluated several lipogenesis and metabolic markers such as sterol regulatory element-binding transcription factor-1c (SREBP-1c), acetyl-CoA carboxylase (ACC), fatty acid synthase (FAS), 3-hydroxy3-methyl-glutaryl CoA reductase (HMGCR), hormone-sensitive lipase (HSL), carnitine palmitoyltransferase (CPT-1), peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPARα), and cluster of differentiation (CD36) using RT-PCR and Western-blot analysis. Results : OA markedly increased intracellular TG and free fatty acid, which plays a key role in reducing hepatic lipid accumulation, in FL83B cells. These increases were alleviated by SAB extract. The mRNA and protein expression of Fatty acid(FA) oxidation factors (CPT-1, PPARα), lipolysis factor(HSL), FA transporter(CD36), cholesterol synthesis factors (HMGCoA) and Lipodenesis (SREBP-1c, FAS, and ACC-1) were significantly increased by treatment of SAB extract in the OA-induced fatty liver cell model. Conclusions : In summary, the treat of SAB extract showed a significant reduction of the influx of fatty acids into hepatocytes, promoted the oxidation of fatty acids, and regulated fat synthesis-related factors, thereby regulating the accumulation of TG and free fatty acids.
Background: There are at least two different subsets of B cells, B-1 and B-2. The characteristic features and function of B-2 cells in addition to the effect of steroids on B-2 cells are well-known. Although B-1 cells have different features and functions from B-2 cells, the effect of steroids on B-1 cells is not completely understood. Therefore, this study examined the effects of dexamethasone on peritoneal (or B-1 cells) and splenic B cells (or B-2 cells). Methods: Purified B cells were obtained from the peritoneal fluid and the spleens of mice. The isolated B cells were cultured in a medium and after adding different concentrations of dexamaethasone. The cell survival rate was measured by flow cytometry using propidium iodide. The expression level of the B cell surface marker was analyzed by flow cytometry. During the culture of these cells, immunoglobulin secreted into the culture supernatants was evaluated by an enzyme-linked immunosorbent assay. Results: The survival rate of peritoneal and splenic B cells decreased with increasing dexamethasone concentration. However, the rate of peritofieal B cell apoptosis was lower than that of splenic B cells. CDS and B7.1 expression in peritoneal B cells and CD23 and sIgM expression in splenic B cells after the dexamethasone treatment were reduced. When B cells were treated with dexamethasone, the spontaneous IgM secretion decreased with increasing dexamethasone concentration. Conclusion: Dexamethasone induces apoptosis in peritoneal and splenic B cells. However, peritoneal B cells are less sensitive to dexamethasone. The dexamethasone suppressed expression of the surface markers in peritoneal B cells is different from those in splenic B cells.
Objective : The purpose of this research is to examine the effects of Scutellariae Radix(SR) extract on immune cells in ovalbumin(OVA)-induced asthmatic mice. Methods : In vitro, C57BL/6 mice were exposed to OVA for 6 weeks. The mice lungs were taken out, chopped, grinded with collagenase and activated by rIL-3/rIL-5. The lung cells were treated with SR extract and analyzed by a flow cytometer. Results : The population of granulocytes/lymphocytes, CD3e-/CCR3+, CD69+/CD3e+, CD23+/B220+, CD4+ cells in the SR group in vitro decreased and population of CD8+ cells in the 100 and $10{\mu}g/m{\ell}$ SR group in vitro decreased, compared with that of control group. Conclusion : The results of this study support a role for SR as an effective treatment for asthma in its experimental success in significantly decreasing inflammation and asthma reactions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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