• 한국식품과학회지
• /
• 제34권2호
• /
• pp.249-254
• /
• 2002

발효식품의 제조에 유용한 starter 개발 및 probiotics로서 이용 가능성을 타진하기 위하여 항균성 물질을 생산하는 Lactobacillus amylovorus IMC-1 균주를 이용한 skim milk medium에서의 산생성, 단백질 분해활성, lactose 분해활성 및 유사구균과 혼합발효 그리고 병원성 세균에 대한 살균력 등을 검토하였다. L. amylovorus IMC-1은 10% skim milk에 yeast extract를 첨가하여 12시간 배양하였을 때 산도 0.8%이었고, 72시간째에는 2.7%로 우수한 산 생성력을 보였다. IMC-1 균주의 ${\beta}-galactosidase$ 활성은 균체 1 mg당 약 $39{\mu}M/minute$로 매우 강한 반면, $phospho-{\beta}-galactosidase$의 활성은 매우 낮았다. 또한 이 균주는 10% skim milk에서 배양 12시간째 $6\;{\mu}g/mL$, 72시간째에 $69\;{\mu}g/mL$의 유리 tyrosine을 생산하여 단백질 분해활성이 낮았다. 전기영동상의 band pattern으로부터 casein중 ${\alpha}-casein$을 주로 이용하며, ${\beta}-casein$은 거의 이용하지 못함을 알 수 있었다. 10% skim milk에서 IMC-1 균주 및 St. thermophilus NIAI 510의 단독 또는 혼합배양을 실시한 결과, 혼합배양, IMC-1 균주 및 St. thermophilus 순으로 산 생성력이 높았으며, 유산구균 단독배양 및 혼합배양에서는 시간이 경과함에 따라 치즈 향기가 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 또한 10% skim milk medium에서 혼합배양에 의한 최적의 유산발효 시간은 산 생성력 및 공존 균수 등을 고려할 때, yeast extract 0.1% 첨가시에는 16시간, 0.5% 첨가시에는 12시간 배양하는 것이었다. IMC-1이 생산한 항균성 물질은 Escherichia coli O157을 배양 24시간째 2 log정도 감소시켰고, 48시간 배양 후에는 피검균이 검출되지 않았다. 또한 Shigella flexneri는 배양 4시간째 2 log이상 감소하였고, 6시간 배양 후에는 검출되지 않아 항균성 물질은 강한 살균작용을 나타냄을 알 수 있었다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
• /
• 제19권10호
• /
• pp.1503-1507
• /
• 2006

Goats' milk adulteration with cows' milk is becoming a big problem. In the past, the urea-polyacrylamide gel electrophoresis assay with different motility of ${\alpha}S1$-casein has been applied for the identification of cows' milk adulteration. The detection sensitivity is 1.0%. The aim of this study was to develop a faster and more sensitive method to detect cows' milk which may be present in adulterated goats' milk and goats' milk powder. The published primer was targeted at highly conserved regions in bovine mitochondrial DNA (a 271 bp amplicon). This amplicon was cloned and sequenced to further confirm bovine specific sequence. The chelex-100 was used to separate bovine somatic cells from goats' milk or goats' milk powder samples. Random sampling of different brands of goats' milk powder and tablets from various regions of Taiwan showed the adulterated rate was 20 out of 80 (25%) in goats' milk powders and 12 out of 24 (50%) in goats' milk tablets. With this system, as low as 0.1% cows' milk or cows' milk powder in goat milk or goat milk powder could be identified. This chelex DNA isolation approach provides a fast, highly reproducible and sensitive method for detecting the adulteration of goats' milk products.

• 한국수산과학회지
• /
• 제48권2호
• /
• pp.178-186
• /
• 2015

Protease inhibitors (PI) of trypsin and papain as target proteases from the roe of bastard halibut Paralichthys olivaceus were fractionated out using ammonium sulfate precipitation (A), DEAE 650M anion exchange chromatography (D), and Sephacryl S-300 gel filtration (S). The recovery percentages of the fractions with the strongest inhibitory activity for each fractionation method were 13% for the A4 fraction, 21.2% for the D3 fraction, and 21.3% for the S2 fraction, with specific inhibitory activities of the fractions toward trypsin and casein of 168, 139, and 218 U/mg, respectively, while no inhibition of papain was observed. The $IC_{50}$ for the trypsin-specific substrate $N{\alpha}$-benzoyl-$\small{L}$-arginine-p-nitroanilide (BAPNA) was 0.65, 1.55, 2.26, and 2.85 mg/mL for the A4, S2, A3, and D3 fractions, respectively. These results suggest that chromatographic fractionation methods (D and S) based on the molecular mass and charge of the protein were more effective at fractionating PI than was ammonium sulfate precipitation based on protein solubility, and that the bastard halibut roe extract acts as a serine protease inhibitor. Therefore, the PI fraction from fish roe might be useful for inhibiting proteases in foodstuffs, and could constitute an alternative food-grade inhibitor for the surimi industry.

• 한국가축번식학회지
• /
• 제20권4호
• /
• pp.453-458
• /
• 1997

형질전환 동물의 후손에서 transgene은 멘델의 법칙에 따라 유전된다고 일반적으로 인식되어져 왔다. 따라서 본 연구에서는 transgene이 이러한 인식과 일치하는지를 여러 세대를 통하여 확인하고 후손에서 어떻게 유전되는지를 연구하기 위하여 형질전환 생쥐를 생산하여 본 연구의 모델로 삼았다. 수정된 생쥐의 embryo에 DNA를 microinjection하는 방법으로 MMTV-LTR (long terminal repeat), bovine ($\alpha$s1-casein cDNA, 그리고 SV 40 splicing과 polyadenylation site 등의 sequence를 포함한 3.0Kb의 DNA가 주입되었다. 여기에서 태어난 새끼는 dot blot과 Southern blot에 의하여 transgene의 존재여부가 확인되어 founder line이 만들어졌다. 그들의 자손은 PCR에 의해서 transgene이 유전되는지를 확인하였다. F0의 72마리 새끼중에서 4마리의 Founder가 transgene을 가지고 있었다(5.6%). F0에서 F1으로의 유전(transmission)은 각각 33.3, 7.7, 0, 62.5%이었다. Transgene은 F1에서 F2로 각각 63.6, 5.9, 68.8% 유전되었고, F2에서 F3로 각각 85.7, 0, 88.2% 유전되었다. 따라서 본 연구 모델에 의하면 transgene은 멘델의 법칙을 따르는 경우와 deletion이 되는 경우로 각각 관찰되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제42권3호
• /
• pp.267-274
• /
• 2014

초고압 공정(HPP)은 비가열 공정 중 하나로 식품 중의 세균 증식을 억제하는 방법으로 근래 들어 산업적으로 각광받고 있다. 현재 우유의 살균은 대부분 가열살균법에 의존하고 있으나, 가열살균은 우유의 영양소 및 이화학적 특성을 변화시키는 단점이 있다. 따라서 본 연구에서는 초고압 처리가 우유의 미생물학적 및 이화학적 특성에 미치는 영향을 알아보았다. 우유를 $15^{\circ}C$에서 600 MPa의 압력조건으로 3분간 처리했을 시 일반세균 및 유산균의 수는 2-3 Log CFU/ml 수준으로 감소하였으며, 대장균군은 HPP 처리 후 $4^{\circ}C$에서 15일 저장 기간 중에 검출되지 않았다. HPP 처리에 따른 유단백의 변성을 알아보고자 유단백의 전기영동 패턴을 분석한 결과, HPP 처리 우유가 가열살균 우유에 비하여 단백질 변성도가 낮게 나타났다. 또한 HPP 처리 우유의 경우 비타민 및 무기질의 함량 변화는 상대적으로 낮았으나, protease, lipase 및 alkaline phsophatase와 같은 우유 효소는 불활성화 시키는 특징을 나타내었다. 이러한 결과는 HPP가 우유의 영양소 파괴 및 이화학적 특성을 변화시키지 않으면서 우유의 미생물 제어에 사용될 수 있음을 제시한다.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제42권12호
• /
• pp.1930-1939
• /
• 2013

본 연구에서는 천연 식품으로부터 면역증진능을 갖는 식품 소재를 검색하기 위한 연구의 일환으로 골대사 약화 상태의 마우스에게 청국장 배합 사료를 투여했을 때 카제인 배합사료에 비하여 가질 수 있는 세포 매개성 면역능의 증강 효과를 규명하기 위한 목적으로 실시되었다. 제 1단계로서 난소적출군은 저칼슘 식이, Sham군은 AIN-76 식이를 6주간 공급한 후, 각 군을 청국장 배합 사료군 혹은 카제인 배합사료군으로 나누어 8주간 제 2단계의 식이를 공급하였다. 면역 지표로는 비장세포 증식능, 혈중 T 림프구 아형수와 혈중 사이토카인(IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-${\gamma}$, TNF-${\alpha}$)의 분비량을 측정하였다. 그 결과 난소적출군에서 청국장배합 사료군의 비장 세포 증식능이 카제인 배합 사료군보다 유의적으로 높았으며, 혈중 T 림프구 아형 비율인 CD4/CD8의 비율도 청국장 배합 사료군에서 더 높았다. 혈중 사이토카인 분비량을 측정한 결과 난소적출군에서 청국장 배합 사료 투여군의 IL-6와 TNF-${\alpha}$ 분비량이 카제인 배합 사료 투여군에 비해 유의적으로 낮았다. 난소적출 마우스의 면역능에 청국장 배합 사료가 미치는 영향으로 카제인 배합사료에 비하여 비장 세포 증식능 활성화, 골 대사와 연관있는 대표적 사이토카인인 IL-6와 TNF-${\alpha}$ 분비 억제 및 조절 등을 들 수 있다. 뿐만 아니라, 체중 증가량을 조절하는 역할을 하는 것으로 관찰되었다. 따라서 청국장 배합 사료는 난소적출 마우스 면역계의 조절 기전에 작용하여 면역세포 활성을 촉진시키고 효과적으로 작용할 수 있으리라 사료된다. 이러한 연구 결과를 토대로 기능성 식품 개발에 기초연구 자료가 될 것으로 기대되며 향후 청국장의 면역 활성물질의 분리 및 동정을 위한 연구의 뒷받침이 될 수 있을 것으로 생각된다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제26권6호
• /
• pp.507-514
• /
• 1998

국내 전통식품인 청국장으로부터 강력한 fibrinolytic activity를 갖는 K-54주를 분리, 동정한 결과 B. subtilis로 확인되었으며 이 균으로부터 강력한 갖는 효소를 정제하였다. 정제도는 약 66.9배 증가하였으며 약 10.1%의 수율을 보였다. B. subtilis K-54에서 분리한 fibrinolytic enzyme의 최적 활성 pH가 8-12사이였으며 50-75$^{\circ}C$사이에서 최적 활성을 보였다. 정제된 효소의 분자량은 약 29 kDa이었고, 등전점은 8.67로 나타났으며 Vmax값은 47.16%, Km값은 0.31(3.1 mg/$m\ell$)였다. N-말단 아미노산 서열 분석 결과 B. subtilis K-54주에서 정제한 fibrinolytic enzyme는 Ala-Gly-Ser-Val-Pro-Try-Gly-Ser이었으며 serine protease저해제인 PMSF에 강력한 활성 저해를 보여 serine protease계열의 효소임을 확인할 수 있었다.

• 한국축산식품학회지
• /
• 제37권3호
• /
• pp.402-409
• /
• 2017

A novel peptide having free radical scavenging activity was separated, using an on-line high-performance liquid chromatography (HPLC) - ABTS screening method, from bovine skim milk fermented by Lactococcus lactis SL6 (KCTC 11865BP). It was further purified using reverse phase-HPLC (RP-HPLC) and sequenced by RP-HPLC-tandem mass spectrometry. The amino acid sequence of the identified peptide was determined to be Phe-Ser-Asp-Ile-Pro-Asn-Pro-Ile-Gly-Ser-Glu-Asn-Ser-Glu-Lys-Thr-Thr-Met-Pro-Leu-Trp (2,362 Da), which is corresponding to the C-terminal fragment of bovine ${\alpha}_{s1}$-casein (f179-199). The hydroxyl radicals scavenging activity ($IC_{50}$ $28.25{\pm}0.96{\mu}M$) of the peptide chemically synthesized based on the MS/MS data showed a slightly lower than that of the natural antioxidant Trolox ($IC_{50}$ $15.37{\pm}0.52{\mu}M$). Furthermore, derivatives of the antioxidant peptide were synthesized. The antioxidative activity of the derivatives whose all three proline residues replaced by alanine significantly decreased, whereas replacement of two proline residues in N-terminal region did not affect its antioxidative activity, indicating that $3^{rd}$ proline in C-terminal region is critical for the antioxidative activity of the peptide identified in this study. In addition, N-terminal region of the antioxidant peptide did not show its activity, whereas C-terminal region maintained antioxidative activity, suggesting that C-terminal region of the peptide is important for antioxidative activity.

• Preventive Nutrition and Food Science
• /
• 제7권2호
• /
• pp.139-145
• /
• 2002

Hen egg-white lysozyme, ovalbumin, egg-yolk phosvitin, acid-precipitated soy protein and $\alpha$$_{sl}$ milk casein were covalently linked with galactomannan through a controlled dry-heating at 6$0^{\circ}C$ under 79% relative humidity without any chemical reagent. Neoglycosylation by the covalent binding of polysaccharide chains brought a significant improvement into the surface functionalities of food proteins. Excellent emulsifying properties and foaming properties were observed in all protein-galactomannan conjugates. Bacterial mutagenesis tests and animal dose test were done to evaluate the food safety of the protein-galactomannan conjugates. The neo-glycoproteins were negative for Ames test using Salmonella typhimurium TA100 (hisG46) and TA98 (hisD3052) strains, and rec-assay using Bacillus subtilis Hl7 (rec) and M45 (re $c^{+}$) strains. All substances were also nontoxic for oral administration to rats. L $D_{50}$ 's of these substances were all more than 7.5 g/kg body-weight of rat. No effect was also observed in the weight increases and the concentrations of total cholesterol, triglyceride and phospholipids in blood serum of the administrated rats with 7.5 g/kg conjugates. Thus, Maillard-type protein-polysaccharide conjugates prepared by covalent attachment of galactomannan to food proteins were proposed to be useful as a safe functional biopolymer in this study.y.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제17권9호
• /
• pp.1469-1476
• /
• 2007

Jeot-gal is a traditional Korean fermented seafood and has long been used for seasoning. We isolated 188 strains from shrimp, anchovy, and yellow corvina Jeot-gal, and screened sixteen strains that showed strong fibrinolytic activities on a fibrin plate. Among those strains, the strain that had the largest halo zone was chosen and identified as Bacillus licheniformis by using 16S rDNA sequencing and an API CHB kit. The fibrinolytic activity of Bacillus licheniformis was characterized and designated as bpKJ-31. The active component of bpKJ-31 was identified as a 37 kDa protein, designated bacillopeptidase F, by internal peptide mapping and N-terminal sequencing. The optimum activity of bpKJ-31 was shown at pH 9 and $40^{\circ}C$, with a chromogenic substrate for plasmin. It had high degrading activity for the $B{\beta}$-chain and $A{\alpha}$-chain of fibrin(ogen), and also acted on thrombin, but not skim milk and casein. The amidolytic activity of bpKJ-31 was inhibited by 1 mM phenylmethanesulfonyl fluoride, but 1 mM EDTA did not affect the enzyme activity, indicating that bpKJ-31 is an alkaline serine protease, like a plasmin. The bpKJ-31 showed approximately 14.3% higher fibrinolytic activity than the plasmin. These features of bpKJ-31 make it attractive as a health-promoting biomaterial.