본 연구에서는 국내산 자색고구마(Ipomoea batatas L. Lam.) 추출물을 제조하고 이들 추출물에 대하여 항산화 활성을 측정하였다. 자색고구마 추출물은 70% 에탄올 추출물과 그 추출물로부터 에틸아세테이트 분획으로 제조하였다. 추출물 및 분획의 수율은 건조 분말 당 각각 39.2% 및 3.49%이었다. 이들 추출물/분획에 대한 항산화 활성을 확인하기 위해 자유 라디칼(1,1-phenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) 소거활성과 루미놀 발광법을 이용한 총항산화능 그리고 세포손상에 대한 보호효과를 측정하였다. 자유 라디칼 소거활성($FSC_{50}$)은 70%에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획이 각각 $90.16{\mu}g/mL$와 $7.69{\mu}g/mL$를 나타내었다. 비교 대조군으로 사용한 (+)-${\alpha}$-tocopherol의 라디칼 소거활성은 $8.98{\mu}g/mL$로, 에틸아세테이트 분획의 라디칼 소거활성이 보다 큼을 알 수 있었다. 루미놀 발광법을 이용한 70% 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획의 총 항산화능($OSC_{50}$)은 각각 $5.75{\mu}g/mL$와 $1.92{\mu}g/mL$이었다. 비교 대조군으로 사용한 항산화 효능이 매우 우수한 L-ascorbic acid의 항산화능은 $1.50{\mu}g/mL$로 추출물의 에틸아세테이트 분획과 유사한 활성을 나타내었다. $^1O_2$로 유도된 사람 적혈구의 세포손상에 대한 보호 효과 실험에서 에틸아세테이트 분획은 농도 의존적($5{\sim}50{\mu}g/mL$)으로 세포보호 효과를 나타내었다. 에틸아세테이트 분획의 세포보호활성(${\tau}_{50}$)은 $5{\mu}g/mL$에서 45.6 min으로 모든 농도에서 비교 대조군인 (+)-${\alpha}$-tocopherol 보다 더 높은 세포보호 효과를 나타내었다. 이상의 결과들로부터 자색고구마의 에틸아세테이트 분획은 뛰어난 항산화능을 나타내며, 이는 피부노화 억제를 위한 항노화 기능성 화장품원료로 응용될 수 있는 가능성을 시사하였다.
본 연구에서는 범부채 뿌리 50% 에탄올 추출물 및 에틸아세테이트 분획물을 제조하고 이들의 항산화 및 항균 활성, 세포 보호 효능을 평가하였다. 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 자유라디칼 소거 활성($FSC_{50}$) 측정 결과, 50% 에탄올 추출물은 $621.5{\mu}g/mL$, 에틸아세테이트 분획물은 $253.0{\mu}g/mL$이었다. Luminol 발광법을 이용한 총 항산화능($OSC_{50}$)은 추출물과 분획물에서 각각 13.6 및 $3.0{\mu}g/mL$이었다. 항균 활성 측정에서 Staphylococcus aureus 및 Candida albicans에 대한 에틸아세테이트 분획물의 최소저해농도(minimum inhibitory concentration, MIC)는 각각 156 및 $1,250{\mu}g/mL$으로 나타났으며, 화장품에 사용하는 기존 방부제인 methyl paraben보다 유사하거나 더 높은 활성을 보여주었다. $^1O_2$로 유도된 세포 손상에 대한 보호 효과(${\tau}_{50}$)에서 50% 에탄올 추출물은 $4{\sim}64{\mu}g/mL$ 농도 범위에서 농도 의존적으로 세포 보호 활성을 나타냈다. $16{\mu}g/mL$ 농도에서 50% 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획물 및 (+)-${\alpha}$-tocopherol의 ${\tau}_{50}$은 각각 36.4, 45.0 및 45.8 min이었으며, 에틸아세테이트 분획물은 $^1O_2$로 유도된 세포 손상에서 (+)-${\alpha}$-tocopherol과 유사한 세포 보호 활성을 나타냈다. UVB로 유도된 HaCaT 세포 손상에서 에틸아세테이트 분획물은 $8{\mu}g/mL$에서 세포 내 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)을 최대 45.9%까지 감소시켰다. 과산화수소로 유도된 HaCaT 세포 손상에서도 에틸아세테이트 분획물은 $0.5{\sim}8.0{\mu}g/mL$에서 세포 생존율을 유의적으로 증가시켰다. 범부채 뿌리 에틸아세테이트 분획물의 성분 분석 결과, irisflorentin, irigenin, tectorigenin, resveratrol, iridin 및 tectoridin 등의 플라보노이드 및 폴리페놀 성분이 확인되었다. 결론적으로 범부채 뿌리 추출물 및 분획물은 화장품의 천연 항산화 및 항균 소재로서 적용 가능성이 있음을 시사한다.
This study was carried out to investigate the inhibitory effects of vitamin E on the oxidative damage of cellular lipids and proteins in free radical reaction induced by $FeCl_3$, and ascorbic acid. In this experiment, a vitamin E treated rat group was administered with 100mg/kg body weight of $dl-{\alpha}-tocophery$ 1 acetate and an untreated rat group was administered with the same volume of corn oil. And then assays of malondialdehyde and carbonyl group in total homogenate, mitochondrial and microsomal fraction of rat liver were carried out at the scheduled time. The results obtained from this study were summarized as follows; 1. Lipid peroxidation levels in vitamin E administered rat liver cells were significantly (p<0.05) decreased at the intervals between 1 hour and 4 hours in liver homogenate, at all times except for 1 hour point in mitochondrial fraction, and also at the intervals between 0.5 hour and 3 hours in microsomal fraction compared with those of the control rat liver cell. 2. Protein oxidation levels in vitamin E administered rat liver cell were also significantly (p<0.05) decreased at the intervals between 1.5 hours and 4 hours in liver homogenate, at over 4 hours in liver mitochondrial fraction, and at the intervals between 0.5 hour and 3 hours in liver microsomal fraction compared with those of the control rat liver cells.
예전부터 치약이 모발성장을 촉진시킬 수 있는 잠재력을 갖고 있다고 제안되어 왔지만 발모효과에 대한 과학적 검증과 치약 내 주요 활성성분에 대한 연구는 보고된 바가 없다. 따라서 본 연구에서는 치약을 이용하여 피부 각질세포의 성장 및 C57BL/6 마우스의 제모된 등쪽 피부에 국소적으로 적용하여 모발의 성장 촉진 여부를 평가하였다. 본 연구 결과 치약의 구성 성분으로서 문헌에서 발모 효과가 있다고 알려진 𝛼-tocopherol acetate와 l-menthol, stevioside 혼합액과, 이들을 제외한 치약 조성 성분들의 혼합액을 각각 두 그룹의 C57BL/6 마우스의 제모된 피부에 국소적으로 적용한 경우, 치약 성분의 혼합액은 발모효과를 보이지 않았고, 𝛼-tocopherol acetate과 l-menthol, stevioside 혼합액이 포함되었을 경우에는 마우스에서 발모 효과가 나타났다. 따라서, 치약을 구성하는 보조성분들인 α-tocopherol acetate과 l-menthol, stevioside 혼합물은 in vivo에서의 모발성장에 있어 잠재력을 갖고 있음을 확인하였다. 또한 치약을 처리한 그룹의 마우스와 발모 유효 성분으로 추정되는 𝛼-tocopherol acetate과 l-menthol, stevioside를 혼합 처리한 그룹의 마우스, 그리고 대조군의 마우스의 등쪽 표피를 취하여 전사체 분석을 진행한 결과 대조군에 비해서 각각의 처리군에서 유의적으로 발현된 유전자 패턴은 매우 유사함을 보였다. 또한 기능유전체적 분석을 하였을 때, 두 그룹에서 공통적으로 발모 조절 관련 기능의 유전자들이 매우 큰 비율의 변화를 보였다. 두 그룹에서 발현이 변화한 발모관련 유전자들로는 케라틴과 케라틴 관련 단백질, forkhead box, sonic hedgehog 등이 관찰되었다. 따라서, 치약의 발모 효과는 𝛼-tocopherol acetate과 l-menthol, stevioside 혼합물의 효과에 기인하는 것으로 생각된다.
This experiment was conducted to explore the efficacy of ${\alpha}$-tocopherol acetate (AT), a commercial supplement containing tocopherols, in commercial broilers. Three hundred and thirty Ross broiler chicks (4-d old) were randomly distributed and allotted to five dietary treatments for six weeks. Each treatment comprised 3 pens as replicates containing 22 chicks per pen. The five dietary treatments were: 0 mg/kg AT (negative control); 10 mg/kg AT; 50 mg/kg AT; 100 mg/kg AT; and 200 mg/kg AT; respectively, supplied totally by the supplement under study. Supplementation of AT improved weight gain significantly (p<0.05), with higher values in the 100 and 200 mg/kg AT fed group than the control during all phases of study, but feed intake remained unaffected. The nutrient digestibility studies conducted after 15 and 35 days of experimental feeding showed significantly higher digestibility of CP, ether extract and gross energy, in these two groups over the control diet. Carcass traits like dressing percentage and the color of the breast meat did not differ significantly due to treatments, but significantly (p = 0.0152) lower abdominal fat percent was noted in the 200 mg/kg fed group. Higher (p = 0.0003) tibia bone strength was noticed in groups fed diets above 50 mg/kg AT because of higher bone mineral content. The serum levels of tocopherols were not influenced but the muscle tocopherols content showed a positive linear trend with the dietary levels supplemented. The thio-barbituric acid reactive substances (TBARS) level in meat also suggested that supplemental AT has a protective role in rancidity. Overall, it could be concluded that AT supplementation at higher levels was found beneficial for growth and increased chicken meat quality.
본 연구에서 마디풀 추출물의 항산화 활성을 평가한 결과, DPPH법과 화학발광법에 의하여 마디풀 추출물의 에틸 아세테이트 분획과 아글리콘 분획은 강력한 항산화제로 알려진 (+)-${\alpha}$-tocopherol과 $\small{L}$-ascorbic acid 보다도 우수한 항산화 효능을 나타내었다. 세포막 보호 효과 또한 연구되었다. 마디풀 추출 에틸 아세테이트 분획과 아글리콘 분획 모두 지질과산화 연쇄반응의 차단제인 (+)-${\alpha}$-tocopherol (${\tau}_{50}=38min$)에 비교하여 더 우수한 세포 보호 활성을 나타냄을 확인하였다(${\tau}_{50}=314.7min$ and 264.6 min at $10{\mu}g/ml$). 마디풀 추출물의 TLC, HPLC, LC/ESI-MS/MS, 그리고 NMR을 이용하여 주성분을 분석한 결과, 마디풀 추출물의 에틸 아세테이트 분획의 주성분은 myricitrin, avicularin, quercitrin으로 확인되었으며 마디풀 추출물의 아글리콘 분획의 주성분은 myricetin, quercetin, kaempferol로 확인되었다. 이상의 결과들로 다양한 종류의 플라보노이드를 함유한 마디풀 추출물은 에틸 아세테이트와 아글리콘 분획에서 여러가지 활성산소종에 대한 총항산화능과 $^1O_2$으로 유도된 적혈구 파괴에 대한 세포 보호 효과가 큰 것으로 나타났다. 이는 마디풀 추출물이 기능성 화장품 원료로서의 응용 가능성이 있음을 시사한다.
천년초는 한국에서 자생하는 손바닥선인장으로 예전부터 민간에서 약재로 사용되어져 왔다. 천년초를 70% 에탄올로 추출한 후 이를 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올, 물 층으로 순차 분획하여 항산화 활성이 우수한 에틸아세테이트 획분을 얻었다. 에틸아세테이트 획분을 가지고 TLC를 실시하여 10개의 fraction으로 분리하였고 이중 항산화 활성이 가장 우수하게 나온 3번째 fraction을 취한 후 silica gel chromatography를 사용하여 정제하였다. 총 10개의 분획을 채취한 후 항산화 활성이 우수한 4번째 분획을 채취하여 HPLC를 사용하여 정제하였다. 정제물은 EI-MS를 사용하여 분자량을 측정하였고 $^1H$-NMR과 $^{13}C$-NMR spectrum을 측정하여 검증한 결과 taxifolin으로 확인되었다. 이를 가지고 항산화 활성을 검증한 결과 $\alpha$-tocopherol, BHA와 비교하여 뒤지지 않는 효과를 보여주었고 항균 활성을 검증한 결과 그람 양성, 음성의 식중독균에 모두 benzoic acid보다 우수한 활성을 보여주었다.
Twenty crossbred (HF${\times}$Tharparkar) dry pregnant cows were divided into four equal groups. They were supplemented with 1,000 I.U. $\alpha$-tocopheryl acetate from 0 (group I), 15 (group II), 30 (group III) and 60 (group IV) days before parturition to 1month of lactation. All the cows were kept under similar feeding and management conditions. Blood plasma samples collected on specific days were analyzed for $\alpha$-tocopherol, retinol, total antioxidant activity (FRAP), immunoglobulin and calcium. Plasma $\alpha$-tocopherol concentration at 30 days prepartum averaged 3.5, 4.1, 4.4 and $3.9{\mu}g/ml$ and decreased by 50.0, 41.4, 34.1 and 33.3 percent on the day of parturition in the four respective groups. After calving, plasma vitamin E started to recover earlier in groups II, III and IV as compared to group I. Mean plasma $\alpha$-tocopherol concentration at 21 days postpartum was significantly higher in groups II, III and IV (2.9, 3.5 and $3.1{\mu}g/ml$) compared to group I ($1.9{\mu}g/ml$) cows. Plasma retinol concentration also showed a substantial decrease in all the groups on the day of calving but recovered to its normal value at 3 weeks postpartum. Plasma total antioxidant activity averaged 901, 895, 859 and $875{\mu}mol/l$ in the four respective groups on 30 days prepartum and decreased on the day of calving in all the groups, but the decrease was less in groups III and IV. Plasma immunoglobulin concentration was higher in group IV, followed by groups III, II and I, respectively, showing better immune status of vitamin E supplemented cows due to less oxidative stress. Supplementation of vitamin E resulted in higher plasma calcium concentration. The data showed that vitamin E supplementation should be started at least 30 days prepartum to reduce oxidative stress in periparturient cows.
An experiment was conducted using 20 male buffalo calves to study the effect of vitamin E and selenium supplementation on their immune response and plasma ${\alpha}$-tocopherol and selenium status. These buffalo calves (10-12 months old, average body weight $75.30{\pm}2.20 $ kg) were randomly allotted to four treatments on the basis of their body weights and were fed on wheat straw and concentrate mixture to meet their nutrient requirements of 500 g/d body weight gain. The buffalo calves were fed either a control diet (neither supplemented with Se nor VE) or diets supplemented with Se at 0.3 ppm (+Se), DL-alpha tocopheryl acetate at 300 IU (+VE), and both DL-alpha tocopheryl acetate at 300 IU and Se at 0.3 ppm (+Se+VE). These experimental diets were fed for 180 days. Blood samples were collected at day 0 and subsequently at 45 day intervals up to 180 days of experimental feeding to monitor plasma ${\alpha}$-tocopherol and Se concentrations. To assess humoral immune response, all calves were sensitized with formalin inactivated Pasteurella multocida antigen at 135 days of experimental feeding and blood was collected on 0, 7, 14, 21 and 28 days post vaccination (DPV) to measure antibody production using indirect ELISA. Cell mediated immune response of calves was assessed after 180 days of experimental feeding by in vivo delayed type hypersensitivity (DTH) reaction using phytohaemaglutinin-P (PHA-P) as a mitogen. Results revealed that feeding of VE and Se improved the plasma levels of these nutrients. Plasma levels of Se were affected by supplementation of both VE (p<0.001) and Se (p<0.001); however, no interaction ($Se{\times}VE$) was observed. Supplementation of Se improved the humoral immune response (p<0.008), whereas, VE showed a tendency towards improvement in cell mediated immune response (p<0.064). It was concluded that vitamin E and Se supplementation improved the status of these micronutrients and humoral immune response in buffalo calves.
This study was conducted to investigate the effect of dietary oxidized oil and ${\alpha}$-tocopherol level on growth and body composition of juvenile flounder. To prepare oxidized diets, squid liver oil was oxidized by aeration at $25^{\circ}C$ for 30 days. The six diets were prepared to contain 6% fresh or oxidized squid liver oil as the lipid sources in combination with three levels of ${\alpha}$-tocopheryl acetate at 0, 80 and 800 mg/kg diet. Triplicate groups of fish ($3.9{\pm}0.1$) were fed to apparent satiation twice a day for 8 weeks. Survival was not significantly different among treatments. Weight gain, feed efficiency, daily feed intake, protein efficiency ratio and condition factor of fish fed the fresh oil diets were significantly higher than those of fish fed the oxidized oil diets (P<0.05). The increase of the vitamin E level in diets did not result in any significant improvement on growth performance of fish fed both oil diets. The vitamin E content of the liver and dorsal muscle increased with increasing dietary vitamin E level at both oil diet groups. A decreasing trend in vitamin E content of the tissues was observed in fish fed the oxidized oil diets at the same dietary vitamin E level. Significantly higher moisture content and lower crude lipid content were observed in the whole body of fish fed the oxidized oil diets than fish fed the fresh oil diets (P<0.05). Dietary lipid source affected the fatty acid content of the whole body; higher contents of saturated and monoenoic fatty acids, and lower n-3 HUFA contents such as 20:5n-3 and 22:6n-3 were observed in fish fed the oxidized oil diets than those of fish fed fresh oil diets. The results of this study suggest that the dietary oxidized oil may impair the growth performance, and an increase in ${\alpha}$-tocopheryl acetate supplementation have no beneficial effect on growth and feed efficiency of juvenile flounder.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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