• 제목/요약/키워드: ${\alpha}$-chymotrypsin

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Isolation of Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides DU-0608 with Antibacterial Activity from Kimchi and Characterization of Its Bacteriocin

  • Cha, Dong-Soo;Ha, Duk-Mo
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제6권4호
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    • pp.270-277
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    • 1996
  • A bacteriocin-producing strain, DU-0608, was isolated from Kimchi and identified as Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides. The bacteriocin from isolate was inhibitory against Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus and several strains of lactic acid bacteria. The bacteriocin was inactivated by pepsin, trypsin, $\alpha$-chymotrypsin, protease, $\alpha$-amylase and lipase, but not by catalase or by heating at $100^{\circ}C$ for 60 min. The molecular weight of the bacteriocin was estimated approximately 6 kDa. The inhibitory effect was bactericidal and rapid. Following treatment with isolate bacteriocin, cells of indicator strain (Lactobacillus sake JCM 1157) were damaged at the end regions of the cell wall, whereas the cells treated with nisin were damaged at many places around the cell wall.

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열수 및 효소적 가수분해로 제조된 틸라피아 비늘 젤라틴 가수분해물의 ACE 저해 활성 (Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitory Effects of Gelatin Hydrolysates Prepared from Tilapia mossambica Scales by Hot Water and Enzymatic Extraction)

  • 안용석;이원우;이승홍;안긴내;고창익;오창경;오명철;김동우;전유진;김수현
    • 한국수산과학회지
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    • 제42권5호
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    • pp.426-433
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    • 2009
  • Fish scales have potential in functional food preparation due to their antioxidant and antihypertensive properties. We investigated the angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitory activity of Tilapia mossambica scale extracts. Hydrolysates of tilapia scales were prepared by enzymatic extraction using five proteases (${\alpha}$-chymotrypsin, Alcalase, Kojizyme, Protamex and trypsin) after scales were treated with hot water for 3 hr. Scale enzymatic hydrolysates prepared using both hot water and enzyme treatments exhibited elevated hydrolysis (about 25%-55%) compared to only enzyme treatment (about 15%-45%). Enzymatic hydrolysates (1 mg/mL) prepared by both hot water and enzyme treatments also showed significantly increased ACE inhibitory activities from about 20%-75%. The pattern of ACE inhibitory activities was similar to the degree of hydrolysis. Alcalase and ${\alpha}$-chymotrypsin hydrolysates displayed the highest ACE inhibitory activities ($IC_{50}$ = 0.83 mg/mL and 0.68 mg/mL, respectively). In addition, the ACE inhibitory effects of $IC_{50}$-chymotrypsin hydrolysates increased with decreasing molecular weight (5 kDa>, 10 kDa> and 30 kDa>), with the 5 kDa> fraction displaying the highest ACE inhibitory activity (about 89.9% and $IC_{50}$ = 0.1 mg/mL). We suggest that the peptide compounds of enzymatic hydrolysates prepared from tilapia scale enhances ACE inhibitory activity and might be useful as an antihypertensive material.

멸치육 단백질 효소가수분해물의 항산화작용 (Antioxidative Activity of Enzymatic Hydrolysates Derived from Anchovy Muscle Protein)

  • 염동민;이태기;박영호;김선봉
    • 한국수산과학회지
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    • 제30권5호
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    • pp.842-849
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    • 1997
  • Pepsin, trypsin, $\alpha-chymotrypsin$, papain, bromelain, 복합효소, Novozym 89, Neutrase 0.51., Protamex 및 Alcalase 0.6L 등으로 가수분해하여 얻은 멸치육 단백질 효소 가수분해물의 항산화작용을 살펴본 결과, 항산화작용이 매우 우수한 것으로 나타났으며 특히 생체내 소화효소의 하나인 pepsin과 식품가공용 단백분해효소인 Protamex에 의한 가수분해물의 항산화작용이 우수한 것으로 나타났다. 이들의 다른 항산화제와의 상승작용에 있어서는 $\alpha-tocopherol$과는 상승작용이 있는 것으로 나타났으나 BHT에 대해서는 BHT 자체의 강한 항산화능으로 상승작용을 확인할 수 없었다. 금속이온 $(Fe^{3+},\;Cu^{2+})$에 대한 봉쇄작용 또한 우수한 것으로 나타났으며, 특히 pepsin, $\alpha-chymotrypsin$ 및 papain유래 가수분해물이 $Cu^{2+}$이온에 대하여 높은 억제작용을 나타내었다. Pepsin유래 멸치육 단백질 효소가수분해물을 이온교환크로마토그래피 및 겔 크로마토그래피에 의하여 분획하고 얻어진 획분별 항산화작용은 P-2 (fraction No. $26\~31$)획분에서 가장 큰 것으로 나타났다. 이 때 가수분해전후 및 활성획분의 아미노산조성은 aspartic acid와 glutamic acid가 증가한 반면 alanine, cysteine, tyrosine 및 phenylalanine은 감소한 것으로 나타났다.

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추출방법에 따른 대황 추출물의 항산화 및 소화효소 저해 효과 (Antioxidant and digestive enzyme inhibitory effects of Eisenia bicyclis extracted by different methods)

  • 김진학;박나영;이신호
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제23권1호
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    • pp.97-103
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    • 2016
  • 미역과에 속하는 대황 물 추출물의 항산화활성과 탄수화물 및 단백질 소화효소 저해능을 추출방법을 달리하여 비교 검토하였다. 환류냉각추출물(RE), 초음파추출물(SE), 고온가압추출물(AE), 저온고압추출물(LE)의 수율과 주요 성분함량은 AE, RE, SE, LE 순으로 높았다. 고온가압추출물(AE)의 수율, 라미나린, 후코이단, 폴리페놀, 플라보노이드 함량은 각각 55.21%, 39.03%, 24.75%, 115.68 mg GAE/g, 36.67 mg RHE/g을 나타내었다. DPPH radical 소거능 모든 시료에서 농도 의존적으로 증가하였으며, 500 mg% 농도에서 AE(86.60%), RE(83.09%), SE(84.41%), LE(80.45%) 순이었다. ABTS radical 소거능은 50 mg% 농도에서 모두 98% 이상의 높은 활성을 나타내었다. 아질산염 소거능은 모든 실험군에서 농도 의존적으로 증가하였고 AE, RE, SE, LE 순으로 높았으며, 500 mg% 농도에서 추출방법에 관계없이 98% 이상의 높은 활성을 나타내었다. 탄수화물 소화효소 중 amylase 저해 효과는 50 mg% 농도에서 AE(64.76%), RE(58.57%), SE(54.76%), LE(45.48%)순으로 나타났으며, ${\alpha}$-glucosidase 저해효과는 5 mg% 농도에서 AE(86.71%), RE(81.87%), SE(75.21%), LE(72.65%) 순으로 나타났다. 단백질 분해 효소 중 trypsin 저해 효과는 50 mg% 농도에서 AE(24.37%), RE(22.76%), SE(19.97%), LE(15.95%)순으로 나타났으며, ${\alpha}$-Chymotrypsin 저해효과는 50 mg% 농도에서 AE(49.05%), RE(43.60%), SE(40.63%), LE(38.10%) 순이었으며, 대황 추출방법은 $121^{\circ}C$에서 15분간 열처리하는 고온가압 추출방법이 가장 양호하였다.

수은 노출에 따른 기수산 물벼룩의 대사 관련 유전자의 발현 양상 (Transcriptional Modulation of Metabolism-Related Genes in Brackish Water Flea Diaphanosoma celebensis Exposed to Mercury )

  • 전민정;유제원;이영미
    • 한국해양생명과학회지
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    • 제7권2호
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    • pp.145-153
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    • 2022
  • 수은은 생물 축적과 먹이사슬을 통한 생물 농축되며, 미량에서도 유해한 영향을 나타내기 때문에 해양 환경 내에서 중요한 문제가 되고 있다. 그러나 해양 소형 갑각류에 대한 수은의 생물 영향은 다른 금속에 비해 연구가 미흡하다. 본 연구에서는 기수산 물벼룩 Diaphanosoma celebensis을 아치사 농도(0.2, 0.4, 0.8 ㎍/l)의 무기 수은(HgCl2)에 48시간 노출시킨 후, 대사 관련 유전자의 발현 양상을 조사하였다. 해독효소 유전자 5종(cytochrome P450; cyp360A1, cyp361A1, cyp4AP3, cyp4C122, cyp370C5)과 소화효소 6종(alpha amylase (AMY), alpha amylase related protein (AMY-like), trypsin (TRYP), chymotrypsin-like protein (CHY), lipase (LIP), pancreatic lipase-related protein (PLRP))의 유전자 발현을 quantitative real time reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR)을 이용하여 분석하였다. Cyp 유전자의 경우 clan2에 속하는 cyp370C5와 clan4에 속하는 cyp4AP3 유전자의 발현이 농도 의존적으로 유의하게 증가하였다. 한편 소화효소 유전자 중에서는 단백질 소화와 관련 있는 TRYP 유전자의 발현이 농도 의존적으로 증가하였다. 이러한 결과는 cyp370C5와 cyp4AP3가 수은 독성을 해독하는 과정에서 중요한 역할을 담당할 것으로 보이며, 수은이 소화효소 유전자의 발현을 조절함으로써 에너지 대사에 영향을 미칠 수 있음을 제시한다. 본 연구는 해양 소형 갑각류에서 수은에 대한 분자 수준의 영향을 이해하는데 도움이 될 것이다.

멸치육 효소 가수분해물의 Angiotensin 전환효소 저해작용 (Angiotensin Converting Enzyme Inhibitory Activity in Enzymatic Hydrolysates of Anchovy Muscle Protein)

  • 이태기;박영범;박덕천;염동민;김인수;구연숙;박영호;김선봉
    • 한국수산과학회지
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    • 제31권6호
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    • pp.875-881
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    • 1998
  • 젓갈 및 자건품으로 소비량이 많은 멸치의 기능특성해석 및 기능성 조미 소재 제조의 일환으로 단백질 분해효소에 의한 멸치 육단백질 가수분해물의 peptide-nitrogen 생성량과 ACE 저해작용을 검토하였다. 소화효소와 식품공업용 단백질분해효소를 이용한 탈지 멸치육 가수분해물의 $50\%$ ethanol 가용성 peptide-nitrogen 생성량은 반응 8시간을 전후로 하여 거의 일정수준에 도달하였고, ACE 저해효과 역시 높게 나타났다. 따라서, 가수분해 8시간째의 각 효소 가수분해물의 peptide-nitrogen의 함량과 ACE 저해효과를 검토한 결과, 소화효소의 경우, $\alpha$-chymotrypsin으로 가수분해시켰을 때, $50\%$ ethanol 가용성 peptide-nitrogen의 생성량과 ACE 저해효과가 높은 것으로 나타났다 또한, 식품공업용 단백질분해 효소를 사용한 경우는 Alcalase 0.6L를 사용하였을 때가 $50\%$ ethanol 가용성 peptide-nitrogen의 생성량 및 ACE 저해효과가 가장 우수하였고, Protamex에 의해서는 $50\%$ ethanol 가용성 peptide-nitrogen의 생성량은 적었지만, ACE 저해효과는 높게 나타났다. ACE 저해효과가 우수한 멸치육 효소 가수분해물의 $50\%$ ethanol 가용성 획분의 아미노산 조성은 대부분의 가수분해물에서 glutamic acid의 함량이 가장 많았고, 그 다음으로 aspartic acid. cysteine 및 leucine의 순이었다.

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Bacteriocin 생산균주의 분리 및 성질 (Isolation and Properties of Bacteriocin-producing Microorganisms)

  • 유진영;이이선;남영중;정건섭
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.8-13
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    • 1991
  • 원유로부터 bacteriocin을 생산하는 미생물을 분리하고 이 균주들을 중심으로 Lactobacillus plantarum을 target organism으로 하여 항균력을 비교하였다. 분리된 항균성물질들은 Gram양성 및 음성균에 대하여 넓은 항균 spectrum을 보였으며 선발균주 중 최종적으로 항균력이 가장 높은 1112-1을 우량균주로 선발하였다. 선발한 1112-2 균주의 항균성물질 230 IU/ml 첨가시에 Lactobacillus plantarum의 생육은 완전히 억제되었으며 500IU/ml 첨가시 E.coli의 생육은 대조구조에 비하여 11 억제되었다.

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Characterization of an Amylase-sensitive Bacteriocin DF01 Produced by Lactobacillus brevis DF01 Isolated from Dongchimi, Korean Fermented Vegetable

  • Kang, Tae-Kyu;Kim, Wang-June
    • 한국축산식품학회지
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    • 제30권5호
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    • pp.795-803
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    • 2010
  • A DF01 strain that inhibits tyramine-producing Lactobacillus curvatus KFRI 166 was isolated from Dongchimi, a traditional Korean fermented vegetable, and identified as Lactobacillus brevis by biochemical analysis and reverse transcriptase sequencing of 16S rRNA. The antimicrobial compound produced by L. brevis DF01 was secreted at a maximum level of 640 AU/mL in late exponential phase in MRS broth, and its activity remained constant during stationary phase. The activity of bacteriocin DF01 was totally inactivated by $\alpha$-chymotrypsin, pronase E, proteinase K, trypsin, and $\alpha$-amylase, but not by catalase, which indicates the compound was glycoprotein in nature. The activity was not affected by pH changes ranging from 2 to 12 or heat treatment (60, 80, and $100^{\circ}C$ for 30 min), but was reduced after autoclaving. Bacteriocin DF01 had bacteriolytic activity and a molecular weight of approximately 8.2 kDa, as shown by tricine-SDS-PAGE analysis. Therefore, bacteriocin DF01 can be used in the manufacture of fermented meat products due to its inhibition of tyramine-producing L. curvatus and non-inhibition of L. sake, which is used as a starter culture for meat fermentation.

Effect of Enzymatic Hydrolysis of 7S Globulin, a Soybean Protein, on Its Allergenicity and Identification of its Allergenic Hydrolyzed Fragments Using SDS-PAGE

  • Keum, Eun-Hee;Lee, Sang-Il;Oh, Sang-Suk
    • Food Science and Biotechnology
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    • 제15권1호
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    • pp.128-132
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    • 2006
  • This study was undertaken to investigate the effect of peptic and chymotryptic hydrolyses of 7S globulin, the major allergen of soybean protein, on its allergenicity, as measured by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), and to identify the allergenic hydrolyzed fragments of 7S globulin using SDS-PAGE. When 7S globulin was hydrolyzed by pepsin, the allergenicity was reduced by over 50%. However, the allergenicity of 7S globulin reduced by peptic hydrolysis was recovered in the sera from 5 out of 10 patients following sequential chymotryptic hydrolysis. Two fragments, with molecular weights 20-25 and 13-16 kDa, among the hydrolysate of 7S globulin by sequential pepsin and chymotrypsin showed reactivity with sera from 10 soybean-allergenic patients. As a result of the theoretical hydrolyses of ${\beta}$-conglycinin, which is a major protein of 7S globulin, it is suggested that the 20-25 kDa fragments were the fragments of the ${\alpha}$-subunit of ${\beta}$'-conglycinin and that the 10-16 kDa fragments were from the ${\alpha}$'-subunit.

Purification and Characterization of a Major Fibrinolytic Enzyme from Bacillus amyloliquefaciens MJ5-41 Isolated from Meju

  • Jo, Hyeon-Deok;Lee, Hwang-A;Jeong, Seon-Ju;Kim, Jeong-Hwan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제21권11호
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    • pp.1166-1173
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    • 2011
  • Meju is a traditional Korean fermented soy product used as a key element for soy sauce and doenjang. Bacilli with antimicrobial activity were isolated from meju prepared by traditional methods at Sunchang county, Jeollabukdo, Korea. Six isolates were identified as Bacillus amyloliquefaciens by recA gene sequencing and RAPD-PCR. One isolate, B. amyloliquefaciens MJ5-41, showed the strongest fibrinolytic activity. A 27 kDa active fibrinolytic enzyme, AprE5-41, was purified from the culture supernatant of MJ5-41 grown on LB by chromatographic methods. The optimum pH and temperature for purified AprE5-41 were 7.0 and $45^{\circ}C$, respectively. AprE5-41 quickly degraded $A{\alpha}$ and $B{\beta}$ chains but not the ${\gamma}$-chain of fibrinogen. AprE5-41 exhibited the highest specificity for N-succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe p-nitroanilide, a known substrate for ${\alpha}$-chymotrypsin, cathepsin G, and subtilisin BPN'. The structural gene, aprE5-41, was cloned by PCR and successfully expressed in B. subtilis.