Choi, Soon-Yong;Park, Hee Yun;Paek, Aron;Kim, Gil Seob;Jeong, Seong Eun
Molecules and Cells
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v.28
no.6
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pp.575-581
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2009
Ornithine decarboxylase (ODC) is a rate-limiting enzyme in the biosynthesis of polyamines, which are essential for cell growth, differentiation, and proliferation. This report presents the characterization of an ODC-encoding cDNA (SlitODC) isolated from a moth species, the tobacco cutworm, Spodoptera litura (Lepidoptera); its expression in a polyamine-deficient strain of yeast, S. cerevisiae; and the recovery in polyamine levels and proliferation rate with the introduction of the insect enzyme. SlitODC encodes 448 amino acid residues, 4 amino acids longer than B. mori ODC that has 71% identity, and has a longer C-terminus, consistent with B. mori ODC, than the reported dipteran enzymes. The null mutant yeast strain in the ODC gene, SPE1, showed remarkably depleted polyamine levels; in putrescine, spermidine, and spermine, the levels were > 7, > 1, and > 4%, respectively, of the levels in the wild-type strain. This consequently caused a significant arrest in cell proliferation of > 4% of the wild-type strain in polyamine-free media. The transformed strain, with the substituted SlitODC for the deleted endogenous ODC, grew and proliferated rapidly at even a higher rate than the wild-type strain. Furthermore, its polyamine content was significantly higher than even that in the wild-type strain as well as the spe1-null mutant, particularly with a very continuously enhanced putrescine level, reflecting no inhibition mechanism operating in the putrescine synthesis step by any corresponding insect ODC antizymes to SlitODC in this yeast system.
To construct useful yeast strain for bioethanol production, we improved yeast harboring various phenotypes by using yeast protoplast fusion method. In this study, S. cerevisiae BYK-F11 strain which have ethanol tolerance, thermotolerance and ${\beta}-glucanase$ activity and P. $stipitis{\Delta}ura$ strain which has xylose metabolism pathway were fused by genome shuffling. P. $stipitis{\Delta}ura$ strain was constructed for protoplast fusion by URA3 gene disruption, resulting in uracil auxotroph. By protoplast fusion, several fused cells were selected and BYKPS-F8 strain (fused cell) showing both karyotypes from two parent strains (S. cerevisiae BYK-F11 and P. $stipitis{\Delta}ura$ strain) among 22 fused cells was finally selected. Sequentially, various phenotypes such as ${\beta}-glucanase$ activity, xylose utility, ethanol tolerance, thermotolerance and ethanol productivity were analyzed. The BYKPS-F8 strain obtained ${\beta}-glucanase$ activity from BYK-F11 strain and 1.2 fold increased xylose utility from P. $stipitis{\Delta}ura$ strain. Also, the BYKPS-F8 strain showed thermotolerance at $40^{\circ}C$ and increased ethanol tolerance in medium containing 8% ethanol. In this fused cell, 7.5 g/l ethanol from 20 g/l xylose was produced and the multiple phenotypes were stably remained during long term cultivation (260 hr). It was proved that novel biological system (yeast strains) is easily and efficiently bred by protoplast fusion among yeasts having different genus.
1) To study the productivity of single cell protein from the n-paraffin utilizing yeast, 235 yeast strains were isolatea from 90 samples 2) Optimum cell growth temperature of three strains selected was 40~45$^{\circ}C$ and these were identified as Candida tropicalis, Candida krusei and Torulopsis molischiana. 3) A-28 strain easily assimilated tetradecane, hexadecane and octadecane, but B-8 strain and C-15 strain assimilated more hexadecane than other n-paraffins. 4) Out of the selected three strains, the mass doubling time, specific growth rate and cell yield were 3.4~4.0 hours, 0.170~0.215, 86~98%, respectively. 5) Crude protein, fat, fiber, ash and nitrogen free extract of the selected three strains were found to be 48.2~61.2% 3.7~8.0%, 3.5~4.2%, 5.6~6.7%, 23.5~31.8%, respectively, and thiamine and riboflavin contents of dried yeast cell were 0.78~0.93 mg% and 6.03~7.3 mg%, respectively. 6) Yeast protein contained evenly most of amino acid, but the sulfur-containing amino acids were particularly low.
Kim, Hye Ryun;Kim, Jae-Ho;Bai, Dong-Hoon;Ahn, Byung Hak
Mycobiology
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v.41
no.3
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pp.139-144
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2013
Makgeolli is a traditional cloudy-white Korean rice wine with an alcohol content of 6~7%. The present study investigated the morphological characteristics, carbon-utilizing ability, fatty acid composition, alcohol resistance, glucose tolerance, and flocculence of Saccharomyces cerevisiae Y98-5 and Pichia anomala Y197-13, non-S. cerevisiae isolated from Nuruk, which is used in brewing Makgeolli. Similar morphological characteristics were observed for both isolated wild yeast strains; and the carbon source assimilation of Y197-13 differed from that of other P. anomala strains. Strain Y197-13 was negative for D-trehalose, mannitol, arbutin, I-erythritol, and succinic acid. The major cellular fatty acids of strain Y197-13 included C18:2n6c (33.94%), C18:1n9c (26.97%) and C16:0 (20.57%). Strain Y197-13 was Crabtree-negative, with 60% cell viability at 12% (v/v) ethanol. The flocculation level of strain Y197-13 was 8.38%, resulting in its classification as a non-flocculent yeast.
Heterologous secretory expression of endoglucanase E (Clostridium thermocellum) and ${\beta}$-glucosidase 1 (Saccharomycopsis fibuligera) was achieved in Saccharomyces cerevisiae fermentation cultures as an ${\alpha}$-mating factor signal peptide fusion, based on the native enzyme coding sequence. Ethanol production depends on simultaneous saccharification of cellulose to glucose and fermentation of glucose to ethanol by a recombinant yeast strain as a microbial biocatalyst. Recombinant yeast strain expressing endoglucanase and ${\beta}$-glucosidase was able to produce ethanol from ${\beta}$-glucan, CMC and acid swollen cellulose. This indicates that the resultant yeast strain of this study acts efficiently as a whole cell biocatalyst.
Parthiban Subramanian;Jeong-Seon Kim;Jun Heo;Yiseul Kim
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.51
no.4
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pp.531-534
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2023
We report the draft genome sequence of the yeast strain Hormonema macrosporum POB-4, capable of producing the biosurfactant glycocholic acid, one of the bile acids. A majority of genes with known function were associated with metabolism and transport of amino acid and carbohydrate as well as secondary metabolites biosynthesis, transport, and catabolism. We observed genes of eleven C-N hydrolases and two CoA transferases which have been reported to be involved in the biosynthesis of glycocholic acid. Further experimental studies can help to elucidate the specific genes responsible for biosurfactant production in strain POB-4.
1. Study was made to investigate effects of desoxyribonucleates on copper-resistance in yeast. 2. It is found that the resistant strain there exists the phenomic lag. 3. In the occurrence of the resistant strain there exists the phenomic lag. 4. Desoxyribonucleate isolated from copper resistant culture is capable of inducing the resistant strain, which is the same type as donor of the resistant type. It accelerated the rate of variation to the resistant, but it is of no effect on the resistant strain. 5. Desoxyribonucleate derived from non-resistant type inhibits growth of the resistant strain and delays the initial phase of growth. However, it is of no effect on the sensitive strain. It is concluded that desoxyribonucleate derived from resistant culture is capable of inducing the resistance, however, nonresistant type desoxyribonucleate is of no effect on inducing the resistance.
Coprinellus congregatus secreted a laccase isozyme when the culture was transferred to an acidic liquid medium (pH 4.1). The laccase cDNA gene (clac2) was used as a probe for cloning of the genomic laccase gene (lac2) including the promoter (Plac2). The open reading frame (ORF) of lac2 had 526 deduced amino acids and four conserved copper binding domains as other fungal laccases. Recombinant plasmid (pRSlac2p-cDNA) of lac2 cDNA with its own promoter was transformed in Saccharomyces cerevisiae. Expression of the transformed lac2 gene was induced by oxidative stress ($H_2O_2$) in yeast and the survival rate of the transformed yeast strain was greatly increased when compared with that of the control strain transformed with pRS316 yeast vector.
The yeast strain 504D, isolated from salted shrimp soup, showed the best proteolytic activity under alkaline condition. The yeast formed vegetative cells in almost optimal media for yeasts, but formed only pseudohyphae in the MM medium containing citric acid and true hyphae in the MM medium containing N-acetylglucosamin and ${\beta}$-D-glucose. The yeast was classified as hemiascomycetes to form ascospores by sexual reproduction, and formed blastospores and athrospores by asexual reproduction. The yeast strain did not assimilate almost of the carbon sources, nitrate and nitrite, but some organic acids and alcohols. The fatty acids of whole cells were composed of 53.67% unsaturated fatty acids and 14.58% saturated, and, especially, C17:1 was observed in this strain but not in two control yeasts. However, almost of all results were very similar to the morphological and physiological characteristics of Yarrowia lipolytica KCCM 12495 and KCCM 35426, except for a little differences which are the composition of fatty acids and the manner of mycellium formation. Therefore, the isolated yeast strain 504D is identified as a Yarrowia lipolytica.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.27
no.6
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pp.1059-1064
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1998
Fermented beverage using lactic acid bacteria isolated from kimchi was investigated. Lactic acid bacteria KL 1, KD 6, KL 4 strains from kimchi, or obtained Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Leuconostoc mesenteroides with and without yeast(Saccharomyces cerevisiae) were inoculated in fruit vegetable juice for single and mixed culture fermentation. During the fermentation by bacterial strain and yeast for 1~3 days at 30oC, various fermentation behaviors were observed. The growth rate of mixed culture of KL 1 and yeast was higher than that of single culture by KL 1 alone during the fermentation. The amount of organic acid produced by the mixed culture fermentation of KL 1 and yeast was 0.82%(3 day) or 0.58%(1 day) and with the final pH of 3.3(3 day) or 4.2(1 day). These mixed culture systems of isolated strains or other bacterial strains had almost similar results of growth rate and acid production. Among several bacterial strains, KL 1 was suitable for the mixed culture fermentation with yeast in terms of desirable fermentation behavior and organoleptical quality. The selected strain, KL 1 was identified as Leuconostoc spp. through the series of tests on carbohydrate fermentation and biochemical characteristics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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