Among the new yeast strains which were isolated from soils by incubating in the xylan containing minimal medium at 3$0^{\circ}C$, one strain(XB-33) was finally selected by the results of extracellular xylanase production test. The characteristics of XB-33 was almost consistent with those of the Cryptococcus ater. The formation of xylanase activity was induced by xylan and repressed by xylose or glucose. The xylanase was partially purified from the culture supernatant with DEAE-Sephadex A5O chromatography. The enzyme had a pH optimum for activity at 5.0 and its stability range was pH 5-7. The temperature optimum was at 5$0^{\circ}C$, but the enzyme activity was greatly lost by heating at 7$0^{\circ}C$ for 60 minutes. The hydrolysis products from xylan by crude enzyme detected by TLC, were xylose and n series of higher oligosaccharides. The Km value of xylanase was 20 (mg/ml).
Proceedings of the Korea Technical Association of the Pulp and Paper Industry Conference
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2011.04a
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pp.93-99
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2011
Proton-NMR spectroscopic method was applied to kinetics study of concentrated sulfuric acid hydrolysis reaction. Xylan was used as model compounds. Without neutralization steps in proton-NMR methods, this analysis method is valid for analysis of xylose, furfural and formic acid in acid hydrolyzates.
Journal of Korea Technical Association of The Pulp and Paper Industry
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v.46
no.6
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pp.1-7
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2014
Dissolving part of xylan and lignin in lignocellulosic biomass by base can be used as pretreatment technique. Cork oak was pretreated with sodium hydroxide solution and the pretreatment effects were evaluated with two critical factors - NaOH concentration and pretreatment temperature. Some of xylan and lignin were removed by base pretreatment. At $90^{\circ}C$ and 13% NaOH pretreatment, 22.0% of lignin and 78.8% of xylan removed by base treatment. Enzymatic hydrolysis of cork oak which was pretreated at higher temperature or concentration was further improved. After pretreatment of cork oak with 13% NaOH at $90^{\circ}C$, the conversion rate of cellulose to fermentable sugars were reached up to 91.3%. At ethanol fermentation with enzymatic hydrolysate from different pretreatment conditions, all enzymatic saccharification liquids were well fermented by Saccharomyces cerevisiae.
The endoxylanase (642 bp; 213 amino acids) and $\beta$-xylosidase (1,602 bp; 533 amino acids) genes from Bacillus sp. were amplified by PCR and separately inserted into the downstream of the yeast ADH1 promoters, resulting in the pAEDX-1 (7.63 kb) and pAEX (8.47 kb) plasmids, respectively. When the yeast transformants, S. cerevisiae SEY2102 harboring pAEDX-1 or pAEX, were grown on YPD medium, the total activities of the enzymes were approximately 9.8 unit/ml for endoxylanase and 2.9 unit/m1 for $\beta$-xylosidase. When the three kinds of xylan from oat spelts, birch wood, and corncob were hydrolyzed by treating with recombinant endoxylanase and $\beta$-xylosidase, it was found that xylose, xylobiose, and xylotriose were produced. To efficiently hydrolyze xylan, various reaction conditions such as amount of enzymes, substrate type, substrate concentration, temperature, and reaction time were examined. The optimized conditions for the hydrolysis of xylan were as follows: amount of endoxylanase, 10 units; amount of $\beta$-xylosidase, 10 units; temperature, $50^\circ{C}$; substrate type, oat spelts xylan; substrate concentration, 6%; reaction time, 1 h. Under the optimal condition, xylose was mainly produced from oat spelts xylan by cooperative action of endoxylanase and $\beta$-xylosidase.
The electron beam irradiation was applied as a pretreatment of the enzymatic hydrolysis of yellow poplar with doses of 0$\sim$450 kGy. The higher irradiation dose resulted in the more degradation of hardwood biomass not only from carbohydrates but also from lignin. This changes originated from the irradiation resulted in the better response to enzymatic hydrolysis with commercial cellulases (Celluclast 1.5L and Novozym 342). The more improvement on enzymatic hydrolysis by the irradiation was found in the xylan than in the cellulose of yellow poplar.
Journal of Korea Technical Association of The Pulp and Paper Industry
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v.41
no.1
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pp.61-66
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2009
Effects of aqueous ammonia soaking treatments to yellow poplar (Liriodendron tulipifera L.) were investigated to focus on chemical compositional changes and enzymatic hydrolysis characteristics changes by this treatment. Treatment temperature and time were main variables. At 3 different levels of aqueous ammonia soaking temperature and time ($145^{\circ}C$ -1 h, $90^{\circ}C$ -16 h and $45^{\circ}C$ - 6 days), lower temperature and longer soaking time led to more xylan removal based on carbohydrate compositional analysis. However, at higher temperature treatment led to more enzymatic saccharification of cellulose to glucose by commercial cellulose mixtures (Celluclast 1.5L and Novozym 342 from Novozyme, Denmark). Cellulose hydrolysis was gradually increased with increasing enzymatic hydrolysis time but xylan hydrolysis was leveled out at early stage (less than 10 h) of enzymatic hydrolysis.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.21
no.4
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pp.423-427
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1992
During the cultivation of Penicillium verruculosum in the medium containing xylan as a sole carbon source for 26 days, xylanolytic activity and some changes were investigated. Protein content and xylanolytic activity, p-Nitrophenyl-$\beta$-D-xylopyranoside (PNPX), p-Nitrophenyl-$\beta$ -D-glucopyranoside (PNPG) hydrolytic activities were increased until 8 days but reducing sugar content was not correlated to protein content. When crude proteins from the culture broth were separated on SDS-PAGE, distribution of proteins was different from the culture broth of cellobiose octaacetate (COA) medium. The culture broth of xylan medium had high hydrolytic activity on xylan but not on cellulose. Furthermore, xylanolytic products were showed xylose, xylobiose and oligosaccharides on thin layer chromatography, and xylobiose was major product. Those result suggested that xylanolytic activity of culture broth was endo-type hydrolysis. Optimum temperatures of xylanolytic activity and PNPX hydrolytic activity of culture broth were 50~6$0^{\circ}C$ and 60~7$0^{\circ}C$, respectively and optimum pHs were 3.0~4.0 and 4.0~5.0, respectively.
For the purpose of utilizing agricultural waste products for animal feeds, chemical analysis of some important agricultural wastes in Korea and enzymatic hydrolysis of rice hull were undertaken and summarized as follows: 1) Rice hull and straws of rice, barley and wheat were analyzed for their proximate principles and carbohydrate composition. 2) A strain of Aspergillus niger was selected as having the highest productivity of rice hull decomposing activity among many species of molds. The optimum conditions for the culture on washed wheat bran were. 3 days of culture period, 55% moisture content and neutral pH and one hour was proper for the extraction of enzymes. 3) The extent of hydrolysis of xylan and rice hull by a crude enzyme preparation from this strain was 63% and 7%, respectively, and the optimum pH for its activity was 4.0 and 4.5, respectively. 4) Enzymatic hydrolysis of rice hull was generally suppressed by gamma-ray irradiation ($0.5{\sim}5\;Mrad$, in dry state), but the effect was less by irradiation in wet state.
The endo-1,4-${\beta}$-xylanase was extracted and purified from the extracellular xylanolytic systems of Trichoderma viride. The crude enzyme was chromatographed with ion-exchange reins of DEAE Sepharose CL-6B, Sepharose, S-Sepharose CL-6B and the resulting xylanase was turned out to be a single protein as 20KD hy SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The xylooligomers were obtained from xylan by incubation with the purified xylanase up to 50%. The ${\beta}$-xylosidase lost its activity completely by incubation of crude enzyme for 24hr with buffer solution of pH 2.8 at $27^{\circ}C$. And also, the xylooligomers were obtained from xylan as a main product by incubation with the crude enzyme treated with acidic buffer.
Chemical composition and enzymatic saccharification characteristics of hemp woody core were investigated by their chemical composition analysis and enzymatic saccharification with commercially available cellulases (Celluclast 1.5L and Novozym 342). Hemp woody core have higher xylan and lower lignin contents than its bast fiber. Based on hemicelluloses and lignin composition, hemp woody core is similar with hardwood biomass. However, cellulose was more easily converted to glucose than xylan to xylose and this trend was confirmed both hemp woody core and yellow poplar. Hemp woody core biomass shows higher saccharification than yellow poplar (hardwood biomass) based on cellulose and xylan hydrolysis. With easier enzymatic saccharification in cellulose and xylan, and similar chemical composition, hemp woody core have better biorefinery feedstock characteristics than hardwood biomass.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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