GDP-mannosyltransferase (GMT) is an enzyme responsible for the addition of a mannose to glucose ($\alpha$[1$\rightarrow$3]) during biosynthesis of the water-soluble branched polysaccharide acetan in Acefobacter species. In an effort to obtain a cellulose-overproducing bacterium, a mutant defective in GMT of Acetobacter xylinum KCCM 10100 was constructed by single crossover homologous recombination using part of the aceA gene encoding GMT amplified by polymerase chain reaction. The GMT-disrupted mutant produced 23% more cellulose, but 16% less water-soluble polysaccharide than those of the wild-type strain. Analysis of the sugar composition by gel permeation chromatography revealed that water-soluble polysaccharides produced by the GMT-defective mutant contained no mannose molecule.
Sulfated polysaccharides are known to be immune-stimulators in mammals and can be used as food additives to enhance immunity. In this study, the immune-stimulating activity of water-soluble anionic macromolecules F2 fractionation isolated from Codium fragile using ion-exchange chromatography was tested in olive flounder, Paralichythys olivaceus, in vitro and in vivo. The gene expression of interleukin (IL)-1β was adopted to check the immune-affection. As a result, in vitro study revealed that the expression of IL-1β was significantly upregulated in head kidney cells by 1 and 5 ㎍/ml of polysaccharides 4 h and by 5 ㎍/ml of polysaccharides at 24 h. In vivo, IL-1β gene expression in head kidney was significantly upregulated by 20 and 100 ㎍ of the polysaccharides at day 1 post-i.p. injection, while downregulated at day 3 but not significant. Meanwhile, in peritoneal cells, it was upregulated by 20 ㎍ of the polysaccharides at day 1 but the upregulation was sustained until day 3 though it was not significant. These results indicate that the sulfated polysaccharides from C. fragile are an immune-stimulator and might be potential feed additives for olive flounder.
The fermentation conditions for the maximal production of the useful polysaccharides(water soluble polysaccharide and cell bound polysaccharide) from marine bacterium Zoogloea sp.(KCCM 10036) were investigated with a 5 L jar fermentor. The maximal production of these polysaccharides was obtained under the conditions of initial pH 7.8, 30$^{\circ}C$, 400 rpm of agitation speed, 2 Wm of aeration rate, 10%(w/v) of inoculum size and 2.5%(w/v) of glucose substrate and 10.38 g/L of total polysaccharide was produced. Apparent viscosity of the culture broth was increased with the production of these polysaccharides and the maximum value was reached to 22,500 cp.
Autoclaving, microwaving, 압출성형 등의 열 및 기계적 에너지에 대한 밀기울 세포벽의 반응성을 구명하기 위하여 수용성 분획의 특정을 연구하였다. 수용성 분획의 화학적 분석과 겔여과 크로마토그래피 결과에 의하면 밀기울에 포함되어 있는 전분의 호화가 가장 중요한 수용화 기작으로 작용하며, 이 과정에서 비전분성 세포벽 구성물질의 수용화도 일어냐는 것으로 밝혀졌다. 수용성의 비전분 다당류의 GC 분석결과 적용된 열처리 과정에서 세포벽의 arabinoxylan 부위가 많이 수용화되는 현상을 보였다. 특히, 고온파 고전단력을 동시에 제공하는 압출성형은 밀기울의 수용화에 가장 효율적이었으며, 또한 상대적으로 고분자량의 비전분성 구성성분을 수용 화시켰다.
Physiochemical properties, such as yield and molecular weight distribution of polysaccharide fractions, of polysaccharides in the enzymatic hydrolysates of purslane were investigated and characterized. A higher amount of micro nutrients, such as potassium (9,413 mg/100 g), phosphorus acid (539 mg/100 g), leucine, alanine, lysine, valine, glycine, and isoleucine, was present in whole purslane. The yield of water soluble polysaccharides (WSP) was 0.29, 7.01, and 7.94% when extracted using room temperature water (RTW), hot-water (HW), and hot temperature/high pressure-water (HTPW), respectively, indicating that HW or HTPW extraction may be effective to obtain WSP from purslane. The average ratio of L-arabinose:D-galactose in the WSP was 37:49, 34:37, and 27:29, when extracted using RTW, HW, and HTPW, respectively. These results indicate that water was a suitable extraction solvent for preparation of the arabinogalactan component of whole purslane. A higher yield and total carbohydrate content was obtained by using Viscozyme L instead of Pectinex 5XL during extraction of the WSP, which indicates that enzymatic treatment of purslane may be an effective method to control the Mw of polysaccharides. Finally, it was confirmed that Viscozyme L is a suitable enzyme for the hydrolysis and separation of polysaccharides obtained from purslane.
Water-soluble fraction (WSF) from edible mushroom hinmogi (Tremella fuciformis) were obtained by water extraction, and polysaccharides in the WSF were separated by ethanol precipitation. The inhibitory effects of the polysaccharides on 3T3-L1 adipocyte differentiation were evaluated by the reduction of peroxisome proliferators-activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) translation, triglyceride accumulation, Oil Red-O staining, and expression levels of $PPAR{\gamma}$, CCAAT/enhancer binding protein a (C/$EBP{\alpha}$), and leptin. The $PPAR{\gamma}$ translation in 3T3-L1 cells was inhibited by the treatment with polysaccharide precipitated by 80% ethanol (P80) which showed highest inhibitory activity among polysaccharides tested. In addition, treatment of P80 to 3T3-L1 cells significantly inhibited the triglyceride accumulation, Oil Red-O staining, and mRNA expression of $PPAR{\gamma}$, C/$EBP{\alpha}$, and leptin in a dose-dependent manner. Based upon these results, P80 from edible mushroom hinmogi shows the inhibitory activity on the differentiation of 3T3-L1 adipocytes. Therefore, it might be employed as a potential anti-obesity material.
Optimum conditions for hydrolysis were investigated to enhance water-solubilities of protein-bound polysaccharides in the basidiocarps of Ganoderma lucidum by treating chymotrypsin. We also attempted with Ganoderma lucidum residue remaining after extracting hot water-soluble compoents in Ganoderma lucidum. After hydrolyzing under optimum conditions (20 ppm chymotrypsin, 2% Gampderma lucidum or 6% Ganoderma lucidum residue, at pH 10 and at $ 40^{\circ}C$), the amounts of total protein and carbohydrate of hydrolysate were measured. Michaelis constant, $K_{m}$, and maximum rate, $V_{max}$, calculated by Lineweaver-Buck plot for the hydrolysis of Ganoderma lucidum were 1.73% and 0.073%/min respectively and those for hydrolysis of Ganoderma lucidum residue were 2.40% and 0.033%/min respectively. The amount of polysaccharide isolated from Ganoderma lucidum (100 g) treated with chymotrypsin was only 3.07 g, but significantly increased amount (14.34 g) of polysaccharides was isolated from Ganoderma lucidum residue (100 g) treated with chymotrypsin. The protein-bound polysaccharide was isolated from the non-hydrolyzed and hydrolyzed sample and molecular weights of the polysaccharide were measured by Sepharose CL-48 gel filtration.
Park, Soo-Wan;Chung, Yeoun-Bong;Kim, Hye-Kyung;Lee, Chung-Kyu
Biomolecules & Therapeutics
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제2권2호
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pp.126-130
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1994
Water-soluble pectins isolated from Trichosanthes Rhizoma and Taraxii Herba and their deproteinized polysaccharides were purified through DEAE cellulose column and were applied to immunopotentiating and antitumor studies to clarify the nature of their activities of our previous reports. As the results of works, the lectins and deproteinized polysaccharides increased the number of circulating leukocytes and total peritoneal cells. And they markedly elevated the lowered production of antibody and reactivity of T Iymphocyte in tumor-bearing mice, which were rapidly recovered by discontinuance of sample treatments. They also decreased the growth of Sarcoma 180 solid tumor in mice.
An efficient method to produce water-soluble polysaccharides from Lentinus lepideus is described. The productivity of both endopolysaccharides (PPS) and exopolysaccharides (EPS) was compared under various culture conditions. The effect of treating their own PPS and EPS on immune cytokine production was also studied in relation to culture factors. High yield production of EPS required a moderate culture temperature $(25^{\circ}C)$ as well as long culture period (16-20 days). In contrast, PPS production required a high culture temperature $(30^{\circ}C)$ and short culture period (8 days). Most of the carbon sources did not affect polysaccharides and mycelial production except for sucrose. Immune cytokine levels in the EPS treatment varied among carbon sources or culture periods. PPS did not appear to affect much on the production of cytokines, regardless of the culturing factors, except for the culture period. These results suggest that the optimal culture conditions for L. lepideus vary according to culture purposes, and different culture conditions should be used for different targets including mycelial biomass, EPS, and PPS. Whereas the immunomodulating activitiy of EPS appeared to be affected by culture conditions in L. lepideus, that of PPS did not.
구조와 용해도가 다른 4종류의 다당류(옥수수전분, 쌀전분, 고구마전분 및 셀룰로오스)내의 1차 alcohol group을 $25^{\circ}C$에서 2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidine oxoammunium (TEMPO)을 사용하여 carboxyl group으로 산화, 전환하였다. TEMPO/bromite 촉매를 이용한 산화반응계에서 최적 pH, TEMPO함량 및 NaBr 함량은 각각 $10.5{\sim}11.0$, 10 mmol/mol of primary alcohol, 0.49 mol/mol primary alcohol이였으며, 반응 최적조건하에서의 산화율은 4종류의 다당류 모두 90%이상이였다. 산화반응은 다당류의 물에 대한 용해도를 매우 증가시켰는 바, 물에 불용성인 셀룰로오스의 경우 산화에 의하여 8.42% (w/v)로 증가되었으며, 옥수수전분, 쌀전분 및 고구마전분과 같이 물에 거의 불용성인(0.10% (w/v) 이하) 다당류들도 약 45% (w/v) 수준으로 물에 대한 용해도가 증가하였다. 또한 본 실험에서의 산화공정에 의하여 제조된 산화물질은 $Ca^{2+}$이온과의 겔 형성능을 갖게됨을 확인하였는 바, 각종 gum, gel 및 film의 새로운 소재로 활용될 수 있을 것으로 기대되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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