Animals imported from abroad are a cause of rabies outbreaks in many countries. Therefore, rabies serology testing for dogs and cats traveling abroad is an important measure to reduce the incidence of rabies. Rabies virus antibodies were measured in sera collected from 2,367 dogs and 894 cats between 2017 and 2021. A serum sample with a value of 0.5 IU/mL or higher was considered a pass. The overall pass rates for rabies virus were 96.4% in dogs and 98.4% in cats. The mean rabies virus neutralization assay titers were higher in cats than in dogs and in female than in male animals. According to age, 6-year-old dogs and 9-year-old cats had the highest virus neutralization assay titers. Of the failure cases, 53.0% (53/100) were dogs or cats less than 1 year old. Although the average failure rates in dogs and cats were low at 3.5% and 1.6%, respectively, the factors influencing failure were age and vaccine manufacturer. Therefore, it is necessary to observe the vaccination interval and timing of blood collection after boosting.
Rapid immunochromatography test (RICT) kits are commonly used for the diagnosis of canine parvovirus (CPV) because of their rapid turnaround time, simplicity, and ease of use. However, the potential for cross-reactivity and low sensitivity can yield false-positive or false-negative results. There are 4 genotypes of CPV. Therefore, evaluating the performance and reliability of RICT kits for CPV detection is essential to ensure accurate diagnosis for appropriate treatment. In this study, we evaluated the performance of commercial RICT kits in the diagnosis of all CPV genotypes. The cross-reactivity of 6 commercial RICT kits was evaluated using 8 dog-related viruses and 4 bacterial strains. The limit of detection (LOD) was measured for the 4 genotypes of CPV and feline panleukopenia virus. The tested kits showed no cross-reactivity with the 8 dog-related viruses or 4 bacteria. Most RICT kits showed strong positive results for CPV-2 variants (CPV-2a, CPV-2b, and CPV-2c). However, the 2 kits produced negative results for CPV-2 or CPV-2b at a titer of 105 FAID50/mL, which may result in inaccurate diagnoses. Therefore, some kits need to improve their LOD by increasing their binding efficiency to detect all CPV genotypes.
Canine respiratory coronavirus (CRCoV) is a significant pathogen that causes respiratory diseases in dogs, collectively known as a canine infectious respiratory disease. The virus is highly contagious and exhibits high seroprevalence worldwide. Currently, bovine coronavirus (BCoV) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits are used to detect CRCoV antibodies. However, BCoV-ELISA kits cannot differentiate between infections caused by BCoV and those caused by CRCoV. In this study, we evaluated the hemagglutination inhibition (HI) test for CRCoV by comparing it with the virus neutralization (VN) test. Subsequently, we evaluated the seroprevalence of CRCoV in 383 dog serum samples collected from South Korea utilizing the HI test. The HI test for CRCoV showed a strong correlation with the VN test (R = 0.83, p < 0.001). The analysis of seroprevalence revealed that 52.2% (95% confidence interval [CI], 47.2%-57.1%) of the Korean dog serum samples were positive. The seroprevalence exhibited varied with age, with a positivity rate of 43.9% in dogs under 1 year of age and 66.7% in dogs aged 3 to 5 years (odds ratio, 2.54; 95% CI, 1.43-4.59). In conclusion, the HI test to monitor CRCoV antibody proved to be closely related to the VN test. Furthermore, over half of the dogs in Korea tested positive for CRCoV antibodies. These findings contribute to a better understanding of the sero-epidemiology of CRCoV.
Bovine viral diarrhea (BVD) is a single-stranded, positive-sense ribonucleic acid (RNA) virus belonging to the genus Pestivirus of the Flaviviridae family. BVD frequently causes economic losses to farmers. Among bovine viral diarrhea virus (BVDV) strains, BVDV-1b is predominant and widespread in Hanwoo calves. Reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) is an essential method for diagnosing BVDV-1b and has become the gold standard for diagnosis in the Republic of Korea. However, this diagnostic method is time-consuming and requires expensive equipment. Therefore, Clustered regularly interspaced short palindromic repeats-Cas (CRISPR-Cas) systems have been used for point-of-care (POC) testing of viruses. Developing a sensitive and specific method for POC testing of BVDV-1b would be advantageous for controlling the spread of infection. Thus, this study aimed to develop a novel nucleic acid detection method using the CRISPR-Cas13 system for POC testing of BVDV-1b. The sequence of the BVD virus was extracted from National Center for Biotechnology Information (NC_001461.1), and the 5' untranslated region, commonly used for detection, was selected. CRISPR RNA (crRNA) was designed using the Cas13 design program and optimized for the expression and purification of the LwCas13a protein. Madin Darby bovine kidney (MDBK) cells were infected with BVDV-1b, incubated, and the viral RNA was extracted. To enable POC viral detection, the compatibility of the CRISPR-Cas13 system was verified with a paper-based strip through collateral cleavage activity. Finally, a colorimetric assay was used to evaluate the detection of BVDV-1b by combining the previously obtained crRNA and Cas13a protein on a paper strip. In conclusion, the CRISPR-Cas13 system is highly sensitive, specific, and capable of nucleic acid detection, making it an optimal system for the early point-of-care testing of BVDV-1b.
Dong-Kun Yang;Eun-Ju Kim;Sang Ho Jang;Hye Jung Lee;Bitna Kim;Jin A Lee;Ju-Yeon Lee;Yun Sang Cho
Korean Journal of Veterinary Research
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v.64
no.3
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pp.26.1-26.9
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2024
Japanese encephalitis virus (JEV) is a mosquito-borne virus that can infect pigs, horses, and other mammals, including humans. Sero-epidemiological investigations of JEV have been performed using hemagglutination inhibition (HI), virus neutralization (VN) tests and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). A need exists for a new ELISA that can detect JEV antibodies in the sera of several animal species. We aimed to develop a blocking ELISA (B-ELISA) for detecting JEV antibodies in pig and horse serum samples. JEV antibodies in 218 pig and 315 horse serum samples were measured using HI and VN tests. The purified KV1899-306 strain was used as an antigen for B-ELISA. The purified antibody (7A13) was conjugated with horseradish peroxidase and used as a detector antibody. The sera of pigs and horses to measure antibody against JEV were subjected to B-ELISA and analyzed. The B-ELISA had a diagnostic sensitivity of 94.6% to 100%, a specificity of 91.2 to 100%, and an accuracy of 94.9 to 98.6% compared with those of the HI and VN tests in pig and horse sera. The B-ELISA had a higher correlation with pig sera (r = 0.89 and 0.90 for VN and HI) than with horse sera (r = 0.75 and to 0.79). The new B-ELISA could be useful in the sero-surveillance of JEV in pig and horse sera and replace indirect ELISA.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.13
no.11
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pp.5615-5622
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2012
Seasonal distributions of the viral abundance and physicochemical parameters were analyzed at three different regions in Gwangyang Bay. Morphological structure of marine virus was observed using transmission electron microscopy. Most of marine virus had bacteriophage-like structure, but some were similar with eukaryotic microalgal virus, Ectocarpus siliculosus virus (EsV). Viral abundance at Group 1 (closed eutrophic region) was higher than viral abundances at Group 2 (closed oligotrophic region) and Group 3 (open oligotrophic region). Seasonal abundances of marine virus at Group 1 were dynamically changed. The viral density was variably changed from maximum $7.33{\times}10^8ml^{-1}$ in August to minimum $0.3{\times}10^8ml^{-1}$ in December and maintained middle value in spring and autumn. The concentration of nitrogen and phosphate sources was correlated with viral abundance. Particularly, seasonal change of dissolved oxygen concentration was opposite to the variation of viral abundance. These results showed that viral abundances were closely related with fluctuation of marine physicochemical environment in Gwangyang bay.
Seo, Ji Hyun;Park, Dong Jun;Lee, So Young;Cho, Ho Song;Jin, Mu Hyun
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.48
no.3
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pp.303-309
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2020
The purpose of this study was to identify the changes in the components of unfermented Gongjin-dan (GD) and fermented Gongjin-dan (FGD) and to confirm whether GD or FGD has an inhibitory effect on viral neuraminidase (NA) activity. A major component of FGD was isolated and identified as nodakenetin, which is the aglycone of nodakenin. After fermentation, the nodakenetin content in FGD was approximately 10-fold higher than that in GD. Then, we examined the viral NA-inhibitory activity of GD, FGD, nodakenin, and nodakenetin. At a concentration of 500 ㎍/ml, FGD inhibited viral NA activity by 92% compared to the DMSO-treated control, while GD barely inhibited viral NA activity. In addition, 250 ㎍/ml of nodakenetin inhibited viral NA activity by 68% compared to the control, while nodakenin inhibited viral NA activity by only 4% at the same concentration as nodakenetin. Collectively, these results suggest that FGD has a more remarkable viral NA-inhibitory activity than GD because the content of the anti-viral component nodakenetin was higher in FGD due to the hydrolysis of nodakenin by Lactobacillus plantarum KCTC 3104.
Based on the geographic range and distribution of its rodent reservoir host, the European common vole (Microtus arvalis), Tula virus is likely to be widespread throughout Eurasia. Tula virus-infected voles have been captured in Central Russia, Austria, Czech and Slovak Republics, and the former Yugoslavia. Although serologic evidence for Hantaan (HTN) or Seoul (SEO) virus infection can be found in the vast majority of the more than 300 cases of hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) occurring annually in Korea, approximately 4% of Korean patients with HFRS show a more than 4-fold higher antibody titer to Puumala (PUU) virus than to HTN or SEO virus by double-sandwich IgM ELISA, suggesting the existence of pathogenic Puumala-related hantaviruses in Korea. To further define the geographic distribution and genetic diversity of Tula virus in Eurasia and to investigate the existence of previously unrecognized Microtus-borne hantavirus in Korea, arvicolid rodents were captured in Lodz, Poland in 1995 and in Yunchon-kun, Kyungki-do during April to May, 1998. In addition, sera from 18 Korean HFRS patients who showed higher (or the same) antibody titer to Tula virus than HTN and SEO viruses were examined for hantavirus RNA by RT-PCR. Hantaviral sequences were not detected in any of the 18 patients or in 35 reed voles (Microtus fortis) in Korea. Alignment and comparison of a 208-nucleotide region of the S segment, amplified from lung tissues of two hantavirus-seropositive Marvalis captured in Poland, revealed $80.8{\sim}83.2%$ sequence similarity, respectively, with Tula virus strains from Central Russia and the Czech and Slovak Republics. Phylogenetic analysis indicated that the newfound Tula virus strains from Poland were closely related to other Tula hantaviruses from Eurasia.
Hepatitis B viral infection which affect about 10% of Korean population manifests asymptomatic carrier, chronic hepatitis and liver cirrhosis and even associates with hepatocellular carcinoma. Clinical manifestations induced by hepatitis B virus vary depending on the degree of immune response by cytotoxic T cells against viral epitope-presenting liver cells. Since hepatitis B virus presents high rate of mutaton that might change the presented epitope and eventually alter immune response, viral mutations, especially in promoters and enhancers, have an important implication in hepatic inflammation and viral replication. To identify mutations related to the hepatic inflammation, we investigated sequence variations of hepatitis B viral promotor regions in the presence or absence of symptoms in hepatitis B carriers. For this, sera from persistently hepatitis B virus-infected mother-child pairs were collected. After PCR amplifiation of all hepatitis B viral promoters (C promoter, S1 promoter, S2/S promoter, X promoter) using serum DNA from each pair, viral promotors were sequenced by automatic sequencer and then sequence data were analyzed by ClustalW. In most cases, the dominant type of maternal virus was transmitted to the child. However, in some children, some new host specific viral variants could be observed in Cp, S1p and S2/Sp. The mutations in C promoter did not seem to be vertically transmitted but arose in new host independently after the wild type had been transmitted. Enhancer I containing X promoter revealed high host specific variations as has been reported before. Two S promoters, S1p and S2/Sp, have shown some point mutations in children, but no deletion mutations were detected as in chronic hepatitis patients in whom deletion mutations are frequently found. In conclusion, the children with the vertically transmitted hepatitis B virus mostly retain the dominant type virus that had been transmitted. However, host specific variants tended to accumulate over time, possibly as clinical symptoms develop.
Avian influenza viruses (AIVs) must utilize host cellular factors to complete their life cycle, and fragile X mental retardation protein (FMRP) has been reported to be a host factor promoting AIV ribonucleoprotein (vRNP) assembly and exports vRNP from the nucleus to the cytoplasm. The functional role of chicken FMRP translational regulator 1 (cFMR1) as a host factor of AIV is, however, poorly understood. In this study, we targeted the cFMR1 gene in DF1 cells using clustered regularly interspaced short palindromic repeats/Cas9-mediated genome editing to examine the functional role of cFMR1 as a host factor of AIV. We found that cFMR1 stimulated viral gene transcription during early stages of the viruses' life cycle and did not affect viral progeny production and viral polymerase activity in DF1 cells 24 hours post infection. cFMR1 overexpression did not exert significant effects on virus production, compared to the control. Therefore, unlike in mammalian systems (e.g., humans or mice), cFMR1 did not play a pivotal role in AIV but only seemed to stimulate viral proliferation during early stages of the viral life cycle. These results imply that the interplay between host factors and AIV differs between mammals and avian species, and such differences should be considered when developing anti-viral drugs for birds or establishing AIV-resistant bird models.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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