This study was conducted to produce the egg yolk Imunoglobulin (IgY) on Vibrio parahaemolyticus from immunized hen with lipopolysaccharide (LPS). Vibrio parahaemolyticus is considered as a potentially pathogenic bacteria, the causative agents of the gastroenteritis. According as the LPS antigens were injected into laying hens in order to produce antibodies against Vibrio parahaemolyticus in egg yolk. After chickens were immunized four times in 2 weeks interval and three times booster in 2 weeks interval, the profile of antibody Production was examined by ELISA. The Production of antibody in egg yolk was started in 1 week after the first immunization, reached peak in 7 weeks and maintained until 13 weeks later. The antibody titre in serum showed similar tendency as IgY. No significant difference in antibody titre when the titre compared to water diluted IgY and commercial IgY kit. Purified IgY reacted with only Vibrio parahaemolyticus, but other Vibrio species and food-borne pathogenic bacteria. In conclusion, we showed that it is possible to obtain a high antibody titre in chicken with quite low amounts of LPS antigen. These results suggested that egg yolk antibodies could be a good source for production of specific antibodies to pathogenic bacteria inducing epidemic gastroenteritis.
The objective of this study was to investigate the plasmid profiling of multi-drug resistant (MDR) Vibrio in influent (inflow) and effluent (discharged) water samples of fish farms in Jeju, South Korea. MDR isolates identified through disc diffusion susceptibility tests, were subjected to plasmid profiling. One hundred fifty Vibrio isolates were obtained from each influent and effluent water sample. All MDR isolates were subjected to plasmid profiling. Greater number of bacteria were enumerated from effluents (61%) comparing to influents (39%). High incidence of neomycin, sulfamethoxazole, amoxicillin and oxytetracycline resistance was observed among the isolates, which was higher in effluent samples. In contrast, Vibrio isolates were more susceptible to florfenicol, chloramphenicol, ciprofloxacin, and nalidixic acid. Among 99 (influent 39 and effluent 60) MDR isolates, a total of 58 (influent 38 and effluent 20) were found to bear plasmids ranging from 1.7 kb to >10 kb and showed 19 different antibiograms according to the size of plasmids. MDR isolates showed six and four distinct plasmid profiles in influent and effluent, respectively. Effluent samples contained more plasmid-carrying MDR Vibrio isolates with more diverse plasmid profiles and antibiograms, suggesting that fish farm tanks may serve as a reservoir of antibiotic resistance genes. The presence of plasmid-carrying MDR Vibrio isolates in fish farm effluent water may contribute to the dissemination of antibiotic resistance genes to the environments, which ultimately poses threat to human health.
A novel marine microorganism, Vibrio sp. YE-101, was isolated from pufferfish and investigated for its ability to synthesize tetrodotoxin (TTX). Various strains isolated from the intestine of pufferfish were grown on TCBS agar plate, and then cultured on Ocean Research Institute (ORI) medium supplemented with 3% NaCl at 23$^{\circ}C$ for 3days. The cells were harvested, disrupted, fractionated by Bio-Gel P-2 column chromatography and then TTX-producing strain, Vibrio sp. YE-101, was identified using mouse bioassay. The isolated TTX from Vibrio sp. YE-101 was also analyzed and identified by HPLC and gas chromatography-mass spectrometer (GC-MS). The mass fragmentation of trimethylsilyl derivatives of C9-base of TTX from Vibrio sp. YE-101 was interpreted and the pattern of fragmentation was same with that of authentic standard. The purfied TTX was also positive to the mouse bioassay, which clearly represents that Vibrio sp. YE-101 can synthesize TTX.
Distribution of Vibrio parahaemolyticus in the Tegillaria granosa Linne in Costal area Inchun. The survey has been done chiefly from the Inchun Sea ports during 5 months from Oct. 1974 to May 1975. 1. The number of Vibrio parahaemolyticus isolated 17(13.8%) of 117 specimens from Anadara Subcrenata. 2. The number of Vibrio alginolyticus isolated 92 strains of 119 specimens from Tegillaria granosa Linne. 3. Bacteriological characterigation such as morphological, ecological, biochemical results of 17 isolated strain has been identified the category of typical Vibrio parahaemolyticus differentiation. 4. Most of Kanagawa positive strains was positive in Greig test, and considerable number of Kanagawa negative strains was also positive. The result of Greig test was almost the same between cultures in brain heart infusion broth and brain heart infusion agar. 5. Kanagawa positive strains showed same lethal activity in inoculated mice into peritoreal cavity as compared with Kanagawa negative strain.
In this study, the ${\beta}$-lactamase (VPA0477) gene was used as a new target for the PCR-based detection of Vibrio parahaemolyticus. Primers specific for the ${\beta}$-lactamase (VPA0477) gene of V. parahaemolyticus, were designed and incorporated into a PCR-based assay. The assay was able to specifically detect all of the 191 V. parahaemolyticus strains tested, but did not result in amplification of 39 other Vibrio spp. and non-Vibrio spp. strains tested. The detection limit of the assay was 10 CFU of V. parahaemolyticus RIMD2210633 from pure culture broth. The ${\beta}$-lactamase (VPA0477) gene-based assay developed in this study was sensitive and specific, and has great potential for the accurate detection and identification of V. parahaemolyticus in seawater or seafood samples.
Vibrio vulnificus cytolysin has been incriminated as one of the important virulence determinants in V. vulnificus infection. In the present study, the effects of Vibrio vulnificus cytolysin on platelets were examined. Vibrio vulnificus cytolysin induced platelet aggregation and increased intracellular calcium concentration ($[Ca^{2+}]_i$) of rat platelets. These effects were abolished in $Ca^{2+}-free$ buffer (2 mM EGTA). Cytolysin also potentiated ADP-and collagen-induced platelet aggregation. Lanthanum (2 mM) inhibited cytolysin-diduced platelet aggregation. However, another $Ca^{2+}$ channel blockers, verapamil ($20{\;}{\mu}M$) or mefenamic acid ($20{\;}{\mu}M$) did not block cytolysin-induced platelet aggregation. Osmotic protectants, sucrose (50 mM) and raffinose (50 nM) suppressed platelet aggregation by 35.9% and 63.4%, respectively. V. vulnificus cytolysin increased membrane conductances of platelet membranes. These results suggest that cytolysin-induced platelet aggregation is mediated via lanthanum sensitive-calcium influx which resulted from the pore formation by V. vulnificus cytolysin.
Bacteria of genus Vibrio are Gram-negative, curved, halophilic, nonspore-forming bacteria, autochthonous inhabitans of the marine and estuarine environments. Some of the Vibrio species such as V. parahaemolyticus, V. vulnificus, and V. cholerae are associated with human disease. Each year many people have been suffering from food-borne disease caused by the ingestion of seafood. In this study, we have monitored antibiotic resistance of this microorganism in 6 coastal areas of West Sea by sampling shellfish monthly. Vibrio spp. were detected from 23.3% of 120 samples analyzed using TCBS agar plates as well as API 20E kit. Among 16 antibiotics tested, resistance to vancomycin and ampicillin was observed in 82.1% of the isolates, and Vibrio spp. resistant to rifampin (71.4%) and cephalothin (53.6%) were also high. Most of the isolates were sensitive to chloramphenicol (92.9%), sulfamethoxazole/trimethoprim (92.9%), and tetracycline (96.4%). About 71.4% of the isolates showed multiple drug resistance toward 3 antibiotics including vancomycin and ampicillin.
Ha, Tai-You;Im, Suhn-Young;Chun, Sang-Nam;Kim, Chul-Kee
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.3
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pp.355-361
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1986
Vibrio vulnificus, a halophilic Vibrio has gained worldwide attention as a cause of severe and frequently fatal wound infections and life-threatening septicemia. For this reason V. vulnificus is thought to produce extreme hemoconcentration and rapid death after infection, and because V. vulnificus is thought to be less susceptible to bactericidal activity of normal human serum, the present study was undertaken to assess the susceptibility of V. vulnificus to human serum bactericidal activity with that of V. parahemolyticus and V. cholerae and to assess the effect of Vibrio species, Salmonella typhimurium and E. coli on hematocrit values in experimentally infected mice. Serum bactericidal activity against both V. vulnificus and V. cholerae was higher than against V. parahemoltyicus. Survival of the test strains in heat-inactivated human serum was greater than that in heat-uninactiveted serum. Both V. parahemolyticus and V. cholerae produced slight hemoconcentration within 2 to 6 hr after intraperitoneal injection of $10^7$ viable bacteria into mice. In contrast, V. vulnificus, S. typhimurium and E. coli produced hemodilution rather than hemoconcentration after 4 or 6 hr after infection. With these results the author can conclude that V. vulnificus is more susceptible to serum bactericidal activity than other Vibrio species, and V. vulnificus did not produce hemoconcentration.
SON Kwang-Tae;OH Eun-Gyoung;LEE Tae-Seek;LEE Hee-Jung;Kim Poong-Ho;KIM Ji-Hoe
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.38
no.6
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pp.365-371
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2005
The antimicrobial resistance patterns to the 10 antimicrobial agents of potential pathogenic vibrios isolated from seawater and a variety of farmed fishes, including oliver flounder (Payalichthys olivaceus), black rock fish (Sebastes schlegeli), red sea bream (Pagyus major) and sea bass (Lateolabyax japonicus), were investigated from May to October, 2004. A total of 314 strains of the genus vibrios were isolated from 126 collected samples, and the number of isolated strains of Vibrio payahaemolyticus and Vibrio alginolyticus were 194 and 120, respectively. Apparently $98.5\%$ of V. parahaemolyticus and $100\%$ of V. alginolyticus isolates demonstrated antimicrobial resistance against at least one antimicrobial agent. The resistance of V. parahaernolyticus isolates to ampicillin ($97.9\%$) was highest, followed by oxolinic acid ($26.8\%$), amikacin ($19.1\%$) and tetracycline and amoxicillin/clavulanic acid ($6.7\%$). V. alginolyticus isolates were resistant to ampicillin ($100\%$), solfamethoxazoleit,imethopenem ($25\%$), amikacln ($21.7\%$), amoxicillin/clavulanic acid ($15.8\%$), ciprofloxacin ($13.3\%$), and tetracycline and doxycycline ($11.7\%$). The rate of multiple antimicrobial resistance to at least four antimicrobials was higher in the V. alginolyticus isolates ($20.8\%$) than in the V. parahaemolyticus ($6.7\%$).
Vibrio become prevailing if superficial temperature of ocean is raised and their activities of area are expanded and most of ocean creatures(fishes, oysters etc) are polluted with vibrio. The one who has taken these polluted fishes and oysters uncooked caused foodpoisoning and diarrhea from Vibrio. Frequently these diseases breakout is disposed in westsea shore of Korea. According to ancient and traditional Korean medical book - Kumkue Yorak - and their single, we carried out experiment check the activities of natural medicinal effects on Vibrio parahemolyticus. The prescriptions of trial materials are processed from extraction boiling water and 80% methanol and followed by freeze dried and adsorbed to every discs in dosage of 10mg. Gentamycin of 10mg were used for control. The result of compound prescription displayed special diseases in antimicrobial activities of boiling water and MeOH extraction compared with control. In single prescription, extraction of boiling water and MeOH of Schisandra sphenanthera(clear zone : 15mm) presented extraordinal antimicrobial activity. The MBC of Schisandra sphenanthera extracts was expressed 2.56mg/ml in boiling water and MeOH.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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