Kim, Min-Goo;Park, Chi-Hun;Lee, Sang-Goo;Seo, Hee-Won;Choi, Yo-Han;Lee, Chang-Kyu;Ka, Hak-Hyun
한국수정란이식학회지
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제23권2호
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pp.67-76
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2008
Since the birth of Dolly using fully differentiated somatic cells as a nuclear donor, viable clones were generated successfully in many mammalian species. These achievements in animal cloning demonstrate developmental potential of terminally differentiated somatic cells. At the same time, the somatic cell nuclear transfer (SCNT) technique provides the opportunities to study basic and applied biosciences. However, the efficiency generating viable offsprings by SCNT remains extremely low. There are several explanations why cloned embryos cannot fully develop into viable animals and what factors affect developmental potency of reconstructed embryos by the SCNT technique. The most critical and persuasive explanation for inefficiency in SCNT cloning is incomplete genomic reprogramming, such as DNA methylation and histone modification. Numerous studies on genomic reprogramming demonstrated that incorrect DNA methylation and aberrant epigenetic reprogramming are considerably correlated with abnormal development of SCNT cloned embryos even though its mechanism is not fully understood. The SCNT technique is useful in cloning farm animals because pluripotent stem cells are not established in farm animal species. Therapeutic cloning combined with genetic manipulation will help to control various human diseases. Also, the SCNT technique provides a chance to overcome excessive demand for the organs by production of transgenic animals as xenotransplantation resources. Here, we describe the factors affecting the efficiency of generating cloned farm animals by the SCNT technique and discuss future directions of animal cloning by SCNT to improve the cloning efficiency.
In order to establish the processing condition of salt-fermented liquefaction of sardine (Sardinops melanoslicta), effect of temperature, pH value, and concentration of salinity on crude enzyme activity of sardine viscera were investigated. The optimum temperature range of crude enzyme activity in sardine viscera was $45{\sim}50^{\circ}C$ and the optimum pH value of it was 9.8. According to the concentration of salinity increased the crude enzyme activity in sardine viscera decreased. The relationship between concentration of salinity (X) and the crude enzyme activity (Y) in sardine viscera is shown as follows; Y=-0.01363X+0.7676 (r=-0.88). For the purpose of processing conditions of rapid- and low salt-fermented liquefaction of sardine, changes of viable cell count, histamine content, and volatile basic nitrogen (VBN) in the chopped whole sardine with 8% NaCl during preheating process at $40^{\circ},\;45^{\circ}$ and $50^{\circ}C$ for 48 hrs were analyzed. During preheating, initial viable cell counts of chopped whole sardine were $10^{4-7}/g$, but they decreased $10^{1-5}/g$ after 48 hrs. Histamine contents during preheating process at $40^{\circ}\;and\;45^{\circ}C$ were gradually increased, whereas at $50^{\circ}C$ were almost the same level after 48 hrs. VBN contents were continuously increased during preheating, but preheating at $50^{\circ}C$ samples were lower level than that of $40^{\circ}\;and\;45^{\circ}C$ ones. For the purpose to accelerate the fermentation and liquefaction of chopped whole sardine, preheating at optimum temperature of crude enzyme activity for 48 hrs was useful processing method and the contents of viable cell count, histamine, and VBN were safety level for food sanitation.
This study was carried out to investigate the effects of Bifidobacteria growth promoter BE0623 and a dietary fiber supplement, which included Bifidobacterium lactis BB12, Lactobacillus acidophilus, Streptococcus thermophilus, and Bifidobacterium lactis. In fermented milk containing BE0623, the viable cell count of Bifidobacteria significantly increased by about 45 to 75 times compared to the control, and the titratable acidity increased, whereas the pH decreased. All fractions obtained by isolating BE0623 had Bifidobacteria growth effect. Acacia dietary fiber is a pale yellow powder. It has a viscosity of 60 to 100 cPs and a pH between 4.1 and 5.0. Its general components are less than 10% moisture, more than 90% dietary fiber, and less than 4% ash. The optimal addition ratio of Bifidobacteria growth promoting material was determined to be 0.05%. The general components of the manufactured fermented milk were carbohydrate 17.85%, protein 3.63%, fat 3.00%, and dietary fiber 2.95%. During storage of the fermented milk for 24 days, its titratable acidity, viscosity, and sugar content all met the criteria. In addition, the viable cell counts of Bifidobacteria and lactic acid bacteria in the fermented milk were 1.7 × 108 CFU·mL-1 and 1.5 × 107 CFU·mL-1, respectively, and Escherichia coli was negative. There was no significant difference between the control group and the treatment group in the sensory evaluation of sweet, sour, weight, and flavor, and the preference for the treatment group was excellent. The acceptability of the fermented milk of the treated group according to the storage period was excellent in terms of color, flavor, and appearance.
This study assessed microbial contamination in seven fried fish pastes sold in Southeast Asian traditional markets during summer. It measured viable cell count, coliforms, Escherichia coli, fungi, and Staphylococcus spp. It also qualitatively analyzed Vibrio parahaemolyticus, Salmonella spp., Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, and Clostridium perfringens. The average viable cell count, coliforms and fungi were detected as 6.34 (3.84-8.13), 2.16 (1.00-3.55), and 3.92 (1.85-7.74) log10 CFU/g, respectively. Staphylococcus spp. was detected at 4.59 (2.10-7.63) log10 CFU/g. Some samples had high contamination levels: viable cell count (8.13 log10 CFU/g), fungi (7.74 log10 CFU/g) and S. aureus (7.63 log10 CFU/g). However, E. coli was not detected in any samples (ND, <1 log10 CFU/g). V. parahaemolyticus, Salmonella spp., B. cereus, L. monocytogenes, and Cl. perfringens were also not detected in the samples. The microbial contamination data provide insight into managing microbial contamination and ensuring the safety of fried fish pastes in traditional summer markets.
Low Electromagnetic Field (EMF) intensity in the range of $1{\mu}T\;to\;10{\mu}T$(Tesla) was found to enhance the growth of CHO cells and the production of tPA in batch and perfusion cultivations. At $1{\mu}T\;intensity,\;1.3{\times}10^7$ viable cells/ml of maximum cell density and 80 mg/l of maximum tPA production were obtained in batch cultivation, compared to $2.8{\times}10^6$ viable cells/ml and 59 mg tPA/1 in unexposed case (control). A similar trend was observed in the perfusion process, where it was possible to obtain $1.2{\times}10^7$ viable cells/ml of maximum cell density and 81 mg tPA/l of maximum tPA production by more than 80 days of cultivation. However, there was not much difference between $1{\mu}T\;and\;10{\mu}T$ in perfusion cultivation, possibly due to better environmental growth conditions being maintained by continuous feeding of fresh medium into the reactor. On the contrary, both cell growth and tPA production were severely inhibited at higher than 1 mT intensity, showing no growth at 10 mT exposure. Specific growth rate was linearly correlated to specific tPA production rate at $1{\mu}T$EMF intensity, which represents a partially growth-related relationship. It was also found that a large amount of $Ca^2+$ was released at low EMF intensity, even though the cell growth was not much affected. Low EMF intensity significantly improved both cell growth and tPA production, and tPA production seemed to be more affected than the cell growth, possibly due to the changes of cell membrane characteristics. It can be concluded that the elaboration of EMF intensity less than $10{\mu}T$ could improve cell growth and tPA production, but mainly tPA secretion through batch or perfusion process in a bioreactor.
효모세포벽 용해효소의 일종인 Zymolyase$(endo-{\beta}-1\;,3-glucanase)$와 더불어 Arthrobacter luteus로 부터 생산되었고, 또한 Zymolyase의 조효소중에서 발견된 바 있는 염기성 AL-protease의 효모세포벽 용해작용을 S. sake의 생세포와 그 세포벽 표품(標品)을 사용하여 조사하였다. AL-protease의 효모 생세포에 대한 용해활성은 그 단독작용만으로는 지극히 미약하였으나, Zymolyase와의 복합작용에 의해서 용해활성은 고도로 상승하였다. 효모생세포를 AL-protease와 Zymolyase로써 단계적인 처리를 할 경우, 효모세포는 AL-protease로 전처리된 뒤에 Zymolyase로 처리되는 처리 순서에 한하여 효과적으로 용해되었다. 이러한 AL-protease의 촉진적 작용은 AL-protease처럼 염기성이고 serine protease로 알려진 몇가지 시판의 효소들 중에서는 발견되지 않았으며, 또한 AL-protease의 이러한 작용은 실험에 사용된 효모들의 배양조건 및 균종에 따라서 커다란 영향을 받는 것으로 밝혀졌다. AL-protease는 효모세포벽 표품(標品)으로부터 일정량의 peptide와 상당량의 당을 유리시키고 있으나, 그 세포벽을 66% 이상은 용해시키지 못하였다. 반면에, Zymolyase는 그 단독작용으로도 효모세포벽을 거의 완전히 용해시킬 수 있었다. 이상의 실험결과를 기초로 하여, S. sake 세포벽의 용해에 있어서 AL-protease의 효소적 작용은, 먼저 AL-protease가 mannan과 단백질로 구성되는 세포벽 표층부에 결합하고, 이어서 그들의 구조를 변화시킴으로써, Zymolyase를 세포벽의 외부로 부터 알카리 불용성 glucan으로 구축되고 있는 세포벽 내부의 골격구조로까지의 침투를 촉진시키는 것으로 추론되었다.
Colour and texture are the most difficult quality aspects of Kimchi to maintain during storage. Therefore, this study investigated how to maintain superior quality Kimchi during fermentation without changes in color and texture. By examining differences between samples covered with vinyl(A group) and not covered with vinyl(B group) and assessing pH, total acidity, total viable cell count, total lactic acid bacteria cell count and sensory characteristics. The results are indicated that pH, total acidity, total viable cell and total lactic acid bacteria were similar between group A and B. Group A showed higher sensory score for colour, taste, texture and acceptability than group B(p<0.001). Covering the Kimchi with vinyl appeared to have a similar effect as when Kimchi is kept in a Kimchi-pot under stones or the outer leaves of vegetables making it possible to maintain good color and texture during storage. In conclusion, even though, it is not practical to use Kimchi-pots within urban settings today, vinyl coverings may offer the same effects.
Enzymatic treatment conditions for red ginseng residue (RGR) were investigated to apply RGR as a microbial medium. Polysaccharide hydrolyase and protease were screened to obtain high solid and carbohydrate yields, and a good degree of carbohydrate hydrolysis. The optimal dosage and reaction time for Viscozyme, the chosen polysaccharide hydrolyase, were found to be 1.0% (w/w) and 3 h, respectively. Of the tested proteases, Flavourzyme, whose optimal dosage was 0.5% (w/w), was selected. Co-treatment with the optimal dosages of Flavourzyme and Viscozyme increased solid yield, carbohydrate yield, and degree of carbohydrate hydrolysis by 76%, 65%, and 1,865%, respectively, over levels in non-treated RGR. The culture characteristics of Leuconostoc mesenteroides strain KACC 91459P grown in enzymatically hydrolyzed red ginseng residue (ERGR) and RGR suspensions were compared. After cultivation for 6 h, the viable cell counts of both cell suspensions rapidly increased to $1.3{\times}10^9$ colony-forming units (CFU)/g. Moreover, while the viable cell population drastically decreased to $2.4{\times}10^6\;CFU/g$ for cells grown in RGR medium, it was maintained in cells fermented in ERGR medium for 24 h.
An ethanolic fermentation process was developed for preparing Doenjang with high ethanol. Higher and efficient viable cell production of salt-tolerant ethanolic yeast is a prerequisite for the successful commercial-scale process of ethanol production during Doenjang fermentation. Culture conditions of salt-tolerant yeast, S. cerevisiae KFCC 10823, was studied in terms of the effect of several environmental and nutritional factors. Viable cell numbers were the highest in a medium containing the following components per liter of water: soysauce, 300ml; dextrose, 50 g; beef extract, 5 g; yeast extract, 5 g; $KH_2PO_4$, 5 g; NaCl, 50 g. The optimal culture conditions of S. cerevisiae KFCC 10823 were pH 5.5, $25^{\circ}C$, 200 rpm and 0.5 vvm. Yeast viability during batch fermentation was gradually decreased to a level less than $90{\%}$ after 35 hours. The maximum cell number was $2.2{\times}10_7$ cells/ml at the optimal condition. Doenjang prepared with ethanolic yeast was ripened after 45 days at $30^{\circ}C$. This Doenjang contains 470 mg% of amino nitrogen and 2.5% ethanol. The shelf-life at $30^{\circ}C$ was theoretically estimated as 444 days.
This study investigated whether propofol, an intravenous, non-barbiturate anesthetic, could reduce brain damage following global forebrain ischemia. Transient global ischemia was induced in gerbils by occlusion of bilateral carotid arteries for 3 min. Propofol (50 mg/kg) was administered intraperitoneally 30 min before, immediately after, and at 1 h, 2 h, 6 h after occlusion. Thereafter, propofol was administered twice daily for three days. Treated animals were processed in parallel with ischemic animals receiving 10% intralipid as a vehicle or with sham-operated controls. In histologic findings, counts of viable neurons were made in the pyramidal cell layer of the hippocampal CA1 area 4 days after ischemia. The number of viable neurons in the pyramidal cell layer of CA1 area was similar in animals treated with a vehicle or a subanesthetic dose of propofol. In terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP nick end-labeling (TUNEL) assay, semiquantitative analysis of dark-brown neuronal cells was made in the hippocampal CA1 area. There was no significant difference in the degree of TUNEL staining in the hippocampal CA1 area between vehicle-treated and propofol-treated animals. These results show that subanesthetic dose of propofol does not reduce delayed neuronal cell death following transient global ischemia in Mongolian gerbils.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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