This study evaluated the effect of factors influencing the initial biofilm formation in drinking water distribution pipe by running experiments using a $2^{4-1}$ fractional factorial experimental design with a replicate. Important variables used for assessing biofilm formation included BDOC(biodegradable dissolved organic carbon), viable heterotrophic bacteria present in drinking water, water temperature, and shear stress at two levels each. Based on the statistical analysis of biofilm levels measured as attached HPC(heterotrophic plate count) and community-level assay, the main factors that have significant effects on biofilm formation were found to be viable heterotrophic bacteria and BDOC. Water temperature only exhibited significant effect on the levels of attached HPC, while shear stress was not a significant factor under given conditions. Moreover, the statistical analysis revealed that interactions between the important variables were not statistically significant at a 0.05 significance level.
Soybean curd residue (SCR) was fermented by lactic acid bacteria, Lactobacillus rhamnosus LS and Entercoccus faecium LL, isolated from SCR. The pH, titratable acidify and viable cell counts were determined from the fermented SCR to evaluate the lactic acid production and growth of lactic acid bacteria. Optimal amounts of pretense enzyme and glucose, and ideal fermentation time for SCR fermentation were estimated by response surface methodology (RSM). Raw SCR fermented by indigenous microorganisms had 0.78 % titratable acidity, The acid production in SCR fermented by L. rhamnosus LS was greatly enhanced by the addition of glucose and lactose. However only glucose increased acid production by Ent. faecium LL. The proof test of SCR fermentation demonstrated that similar results for titratable acidity, tyrosine content and viable cell counts to that predicted could be obtained by the at optimized fermentation conditions. In the presence of 0.029 % (w/w) pretense enzyme and 0.9% (w/w) glucose, the SCR fermented by Ent. faecium LL showed 1.07% (w/v) of titratable acidity, 1.02 mg% tyrosine content and 2$\times$10$^{9}$ (cfu/g) of viable cell counts. With the SCR fortified with 0.033% pretense enzyme and 1.7% glucose, L. rhamnosus LS showed 1.8% (w/v) of titratable acidity, 0.92 mg% of tyrosine content and 2$\times$10$^{9}$ (cfu/g) of viable cell counts.
A viable but non-culturable (VBNC) state is a survival strategy adopted by bacteria when faced with unfavorable environmental conditions, rendering them unable to grow on nutrient agar while maintaining low metabolic activity. This study explored the impact of temperature and nutrient availability on inducing VBNC state in Edwardsiella piscicida, the most important bacterial fish pathogen, and assessed its pathogenicity at VBNC state. E. piscicida was suspended in filtered sterile seawater and exposed to three different temperatures (4, 10, and 25℃) to induce the VBNC state. Subsequently, the induced VBNC cells were subjected to resuscitation by either raising the temperature to 28℃ or inoculating them in brain heart infusion broth supplemented with 1% NaCl. A propidium monoazide (PMA)-qPCR method was also developed to selectively quantify live (VBNC or culturable) E. piscicida cells. The results showed that the bacteria entered the VBNC state after approximately 1 month at 4℃ and 25℃, and 2 months at 10℃. The VBNC E. piscicida cells were successfully revived within 3 days in a nutrient-rich environment at 28℃, highlighting the significance of temperature and nutrition in inducing and resuscitating the VBNC state. In pathogenicity tests, resuscitated E. piscicida cells exhibited high pathogenicity in olive flounder comparable to cultured bacteria, while VBNC cells showed no signs of infection, suggesting they are unlikely to resuscitate in fish. In conclusion, this study contributes to our understanding of fish pathogen ecology by investigating the characteristics of the VBNC state under varying temperature and nutrition conditions.
축산환경개선용 미생물 제품 중 시장점유율을 기준으로 상위제품 A, B,하위 제품 E, F와 현재 개발완료 되어진 C, D를 선정하여 생균수 측정과, 사료첨가용으로 사용이 금지된 항생제에 대한 내성 테스트를 실시하였다. 생균수 측정 결과 상위 점유율의 A, B사 제품은 표기상의 생균수와 일치하였으나, 하위 점유율을 차지하고 있는 E제품의 경우 함유균주나 효능에 대한 정보를 제공하고 않고 있을뿐더러 F사의 제품은 균수가 적게 측정되어 실제 표기사항과 일치하지 않았다. 항생제 내성실험결과 점유율에 따른 상관관계는 없었으나, B사를 제외한 제품의 대부분에서 내성균이 존재함을 확인하였다. Lincosimides 계열의 Lincomycicne과 Clindamycin의 경우 B사를 제외한 제품에서 내성균이 존재하였다. Penicillins 계열의 Amoxicillin, Ampicillin, Penicillin 및 Macrolide 계열의 Erythromycin 항생제는 B사와 E를 제외한 제품에서 내성균이 존재함을 확인하였다. Quinoline계열 Norploxacin 또한 B사와 E사를 제외한 제품에서 내성균을 보였으며 Neomycin의 항생제 또한 유사한 내성분포 결과를 나타내었다. Neomycin과 같은 Aminiglycosides계열의 Gentamycin, Streptomycin은 B사제품을 제외한 제품에서 내성을 나타내었다. 마지막으로 내성-균으로 사용 금지된 Tetracycline계열의 Oxytetracyclin은 12가지 항생제중 가장 높은 비율의 감수성을 나타내었으나 B, E사를 제외한 제품에서 내성균의 존재를 확인하였다. 실험결과 사용 금지된 항생제 품목임에도 불구하고 많은 제품에서 때 성균이 존재하였으며, 이에 따라 환경개선제 특성의 정확한 표기와 체계적인 유통 체계와 검증 과정이 필요하다고 사료된다.
호소수내의 '살아있는 세균'을 측정하기 위하여 quantitative direct viable count (qDVC) 방법을 적용하였다. qDVC방법에 적용되는 최적 glycine 농도는 2%였으며, '살아있는 세균'을 계수하는데 있어서 평판계수법, CTC법 보다는 qDVC 방법이 보다 효과적이라는 것을 확인하였다. qDVC방법으로 '살아있는 세균'을 측정한 결과 다른 두 방법보다 $2.4{\sim}6.0$배 높은 값이었다. 또한 qDVC방법은 '살아있는 세균'을 죽은 세포 또는 휴면세포와 쉽게 구별할 수 있었다.
This study aimed to identify lactic acid bacteria isolated from eight fermented milk products in Iran. We enumerated Lactobacillus species using De Man-Rogosa-Sharpe (MRS)-maltose and MRS agar with pH adjusted to 5.2, as well as assessment at 37℃ for 48 hr, studied Streptococcus spp. using M17 agar at 43℃ for 24 hr, and assessed Bifidobacterium species using nalidixic acid, paromomycin sulfate, neomycin sulfate, and lithium chloride (BL-NPNL) agar at 37℃ for 48 hr. The total viable Streptococcus spp. cell in fermented milk varied at 4.73-8.83 log CFU/mL. However, Bifidobacterium spp. were not detected in any of the tested samples. Lactobacilli were not detected in four of the eight samples, and viable Lactobacilli cells in the remaining four samples ranged 2.48-3.85 log CFU/mL. The pH of the tested samples ranged 3.53-4.19, and soluble solids (Brix measurement) ranged 7.5%-17.9%. A total of 130 isolates of gram-positive catalase-positive bacteria were characterized at the species level using 16S rRNA sequencing. Sequence analysis identified six species: Streptococcus thermophilus, Lactobacillus delbrueckii subsp. sunkii, Lactobacillus delbrueckii subsp. indicus, Lactiplantibacillus plantarum, Lacticaseibacillus rhamnosus, and Levilactobacillus brevis.
This experiment was carried out to investigate the effects of spirulina powder on the growth properties of lactic acid bacteria in reconstituted skim milk. The spirulina powder supplemented to S. thermophilus and L acidophilus slightly stimulated lactic acid production. In addition, the growth and acid production of L. bulgaricus were enhanced by the addition of spirulina powder. When the spirulina powder was added to reconstituted skim milk at the level of 1%, the mixed cultures of S. thermophilus and L. bulgaricus showed higher numbers of viable cells and higher acid production than the other cultures. The effects of the addition amounts of spirulina powder (1%, 2% and 3%) to the reconstituted skim milk on the growth properties of the mixed cultures of S. thermophilus and L. bulgaricus were evaluated. The pH of the skim milk with added spirulina powder was lower than that of the control, but the amount of spirulina did not have a significant affect. The titratable acidity increased with the incubation time until 12 hr. The number of viable cells in the skim milk with added spirulina increased according to the amount of spirulina. Thus, the spirulina was effective for the increasing lactic acid bacteria in yoghurt.
The intake of probiotic lactic acid bacteria not only promotes digestion through the microbiome regulated host intestinal metabolism but also improves diseases such as irritable bowel syndrome and inflammatory bowel disease, and suppresses pathogenic harmful bacteria. This investigation aimed to evaluate the immunomodulatory effects in intestinal epithelial cells and to study the clinical efficacy of the selected the Bifidobacterium breve and Bifidobacterium longum groups. The physiological and biochemical properties were characterized, and immunomodulatory activity was measured against pathogenic bacteria. In order to find out the mechanism of inflammatory action of the eight viable and sonicated Bifidobacterium spp., we tried to confirm the changes in the pro-inflammatory cytokines (TNF-α, interleukin (IL)-6, IL-12) and anti-inflammatory cytokine (IL-10), and chemokines, (monocyte chemoattractant protein-1, IL-8) and inflammatory enzymatic mediator (nitric oxide) against Enterococcus faecalis ATCC 29212 infection in Caco-2 cells and RAW 264.7 cells. The clinical efficacy of the selected B. breve and B. longum group was studied as a probiotic adjuvant for acute diarrhea in children by oral administration. The results showed significant immunomodulatory effects on the expression levels of TNF-α, IL-6, IL-12, MCP-1, IL-8 and NO, in sonicated Bifidobacterium extracts and viable bifidobacteria. Moreover, each of the Bifidobacterium strains was found to react more specifically to different cytokines. However, treatment with sonicated Bifidobacterium extracts showed a more significant effect compared to treatment with the viable bacteria. We suggest that probiotics functions should be subdivided according to individual characteristics, and that personalized probiotics should be designed to address individual applications.
The aim of this research was to develop predictive models for the growth of spoilage bacteria (total viable cells, Pseudomonas spp., and lactic acid bacteria) on frankfurters and to estimate the shelf-life of frankfurters under aerobic conditions at various storage temperatures (5, 15, and $25^{\circ}C$). The primary models were determined using the Baranyi model equation. The secondary models for maximum specific growth rate and lag time as functions of temperature were developed by the polynomial model equation. During 21 d of storage under various temperature conditions, lactic acid bacteria showed the longest lag time and the slowest growth rate among spoilage bacteria. The growth patterns of total viable cells and Pseudomonas spp. were similar each other. These data suggest that Pseudomonas spp. might be the dominant spoilage bacteria on frankfurters. As storage temperature increased, the growth rate of spoilage bacteria also increased and the lag time decreased. Furthermore, the shelf-life of frankfurters decreased from 7.0 to 4.3 and 1.9 (d) under increased temperature conditions. These results indicate that the most significant factor for spoilage bacteria growth is storage temperature. The values of $B_f$, $A_f$, RMSE, and $R^2$ indicate that these models were reliable for identifying the point of microbiological hazard for spoilage bacteria in frankfurters.
송이 자생군락 토양 내 세균군집의 정량적 평가를 수행한 결과 CFDA 형광염색법을 이용해 직접 계수된 생균수는 $7.4{\pm}1.19{\times}10^8{\sim}1.07{\pm}0.17{\times}10^9cells/g$ soil로 육즙영양배지(nutrient broth, NB)에서 배양된 생균수는 CFDA 계수치의 $5{\sim}8%$로 계수되었으며, $10^{-2}$으로 희석한 NB(DNB)배지에서는 $40{\sim}47%$의 계수치를 나타내었다. 이상의 결과로부터 송이 자생군락 토양내에는 배양이 곤란한 난배양성(viable but non-culturable; VBNC)세균이 다수 존재해 있는 것으로 추정되었다. 송이 자생군락 토양내 세균군집의 계통학적 특성을 검토하기 위해 토양으로부터 직접 DNA를 추출하고 16S rDNA-ARDRA cluster 분석을 통하여 대표 clone의 16S rDNA 염기서열 분석을 수행하였다. 송이 자생군락 토양으로부터 구축된 총 115 clone은 31 ARDRA cluster로 분류되었으며, ${\alpha}-,\;{\beta}-,\;{\gamma}-$ Proteobacteria, Acidobacteria, Actinobacteria 그리고 Firmicutes의 6개 계통군이 확인되었다. 이들 계통군 중 약 85%가 Acidobacteria 계통군에 속하여 압도적인 우점군임이 확인되어 매우 독특한 계통학적 특성을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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