목 적 : 이 연구의 목적은 항체 검사를 어느 시기에 검사해야 마이코플라스마 폐렴을 가장 적절하게 진단을 내릴 수 있는지를 파악하기 위함이다. 방 법 : 2011년 6월부터 2011년 10월까지의 한양대학교병원에서 진단받은 206 명의 폐렴 환아들을 대상으로 후향적으로 분석하였다. 결 과 : 마이코플라스마 폐렴으로 진단받은 160명의 평균 연령은 5.4세이었다. 마이코플라스마 간접입자 응집항체의 측정을 위한 혈청 획득 시간은 마이코플라스마 항체가가 1:640 이상인 혈청들과(8.58일) 1:640 미만인 혈청들(5.44일) 사이에서 통계학적으로 유의한 차이가 있었다(P<0.001). 결 론 : 본 연구의 결과는 폐렴 환아에서 증상 시작일로부터 8일 전에 획득한 마이코플라스마 항체가가 음성이면 확진을 위해 반복 검사가 필요한 것으로 보였다. 이 제안으로 마이코플라스마 폐렴에서 최적의 진단을 내릴 수 있게 도움을 줄 수 있을 것이다.
본 연구에서는 국내 산란계의 주요 질병에 대한 면역상태 및 역가수준을 파악하기 위해 2015년부터 2017년까지 3년간 충북대 수의과대학 조류질병학 실험실에 의뢰된 산란계의 혈청을 성장기와 산란기를 고려하여 주령별로 구분하여 분석하였고, 계절에 따른 검사결과를 분석하였다. 검사대상 질병은 검사 의뢰건 수가 많고, 혈청검사 결과가 유의미한 질병인 LPAI, ND, IB, aMPV, EDS'76, IBD, CIA, MS로 한정하였다. AI와 ND의 경우 전체적인 GMT, CV의 양상은 비슷하게 진행되었다. 반면 LPAI의 경우 주령별 계군양성율이 불균일하고 편차가 최대 약 50%의 큰 차이를 보였지만 ND의 경우 균일한 양성률을 보이며 편차는 2% 미만으로 낮게 확인되었다. 또한, 전체적인 GMT 역시 LPAI가 ND에 비하여 낮게 형성됨을 확인하였다. 이는 각 질병의 특성과 백신접종의 차이에 따른 결과로 판단된다. IB는 음성계군과 전체계군을 비교할 때 전체 계군의 역가수준이 전반적으로 높았고, CV값은 낮은 경향을 확인할 수 있었으며, 이를 통해 야외 IB virus의 노출을 추정할 수 있었다. aMPV는 2011년에 백신 출시 이후 과거에 비해 높은 항체양성률과 GMT역가 상승을 확인할 수 있었다. EDS'76은 전주령 구간 균일한 역가분포를 나타내었고, 백신에 의한 역가형성을 확인할 수 있었다. IBD는 0~1.5주령의 어린 일령에서 전반적인 IBD 모체이행항체가 높은 수준의 양성률을 보였고 3주령 이후 높게 형성되는 양성률이 모체이행항체수준을 높이는 것으로 추정되고, 향후 지속적인 혈청학적 모니터링이 진행되어야 하겠다. MS는 2017년 백신 출시 이후 양성률과 역가가 높게 나타나는 결과를 보였지만 의뢰건 수가 적고 백신 도입 초기이기 때문에 지속적인 모니터링이 필요하다.
본 연구는 뱀장어 양식에서 오랜 기간 문제시되고 있는 에드와드병(Edwardsiellosis)에 대한 효과적인 백신 투여 방법의 가능성을 알아보고자하였다. 뱀장어 유래의 Edwardsiella tarda로부터 포르말린 불활화백신(FKC)을 제작하여, 크기가 다른 3개 그룹의 뱀장어($26.8{\pm}1.2g$, $7.1{\pm}0.7g$, $2.2{\pm}0.4g$)에 침지 및 경구 투여를 실시하였다. 그리고 혈청 응집항체가의 활성과 E. tarda 공격접종에 대한 방어력(상대생존율, RSP)의 변화를 조사하였다. 모든 그룹에서 응집항체가와 공격접종에 의한 방어력은 상관성이 없었다. 그러나 $26.8g{\pm}1.2g$그룹의 경우, 침지(10 mg/mL)와 침지(10 mg/mL)+경구(10 mg/g) 실험구에서 RSP는 각각 62.6% 및 52.2%를 나타내었으며, $7.1{\pm}0.7g$ 그룹의 경우, 침지(10 mg/mL)+경구(10 mg/g) 실험구에서 RSP는 56.8%로 나타나서 방어력(RPS>50%)이 확인되었다.
본 실험은 감태와 crude lectin의 사료내 첨가가육계의 생산성 및 면역반응에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였다. 1일령 Ross 수평아리 총234수를 공시하여 대조구(-), 대조구(+), 감태 1.0%, crude lectin 0.05 %, 0.1 %, 및 0.3 %로 6처리 3반복, 반복당 13수씩을 총 38일간 실험사료를 급여하였고, ND-IB 혼합 사독백신은 4일령에 피하접종하였다. 사료요구율에 있어서는 crude lectin 0.3 % 첨가구가 대조구(-)에 비해 유의하게 낮게 나타났다(P<0.05). ND-IB 사독 혼합백신 접종 3주 후에는 감태와 crude lectin의 첨가구의 ND와 IB 백신 역가가 대조구(+)와 비교하여 상승하는 경향이나 상승효과가 있었다(P<0.05). 폐사율에 있어서 crude lectin 첨가구들은 살모넬라를 감염시킨 대조구(+)에 비해 유의하게 감소하였다(P<0.05). 닭에서 IFN-v, IL-2, 및 IL-6의 mRNA는 살모넬라 감염에 의해 높게 발현되었고, 감태와 crude lectin은 IFN-v의 발현에 영향을 미치지 않았으나, 감태 1.0 %와 crude lectin 0.05 % 첨가구는 IL-2와 IL-6의 mRNA 농도가 대조구(+)에 비해 높은 경향이나 유의하게 높았다(p<0.05).
T. sergenti merozoite 수용성 항원을 T. sergenti 감염적혈구로부터 분리하고자 저삼투압액으로 용혈, 조직 분쇄기로 분쇄한 후에 고속 원심분리하여 수용성 항원을 얻었으며, SDS-PAGE와 Western blot의 방법으로 29, 34, 35 그리고 105 kD가 함유된 항원을 본 예방접종실험의 항원성 polypeptide로 정하였다. 본 수용성 항원(0.5 mg/ml)을 준비, Freund's adjunant를 이용하여 한우(5개월령)에 경피 접종하였으며, 다시 4주 후에 추가접종하였다. 추가접종 9주 후에 예방 접종군과 대조군에 동종의 냉동충주(5.6$\times$106RBC/dose, 40% 기생률)을 접종시킨 후에 적혈구용적비, 총적혈구수, 기생률, western biot에 의한 특이항체 그리고 간접형광항체(IFA) 등을 관찰하였던 바, 예방접종 후 18주(충 접종 6주 후)에 있어서 예방접종군의 IFA는 10,240이었으나, 대조군은 1,280이었다. 예방접종군에 있어서의 충접종 전후에 있어서의 총적혈구소와 적혈구웅적비는 유의적 차이 (p<0.05)를 나타내지 않았지만, 대조군에 있어서는 적혈구용적비와 총적혈구수에서 있어서 빈혈 소견을 관찰하였다 (p<0.05). 예방접종군의 충전종 후에 있어서의 western blot 반응에서는 29, 34, 35 그리고 105 kD polypeptide의 물질이 면역반응을 잘 나타내고 있어, 이들 polypeptide는 앞으로 vaccine 제조에 활용 가능성이 충분함을 예견할 수 있었다.
To confirm the effect of food and water deprivation prior to Newcastle disease(ND) virus vaccination, three hundred chicks were divided into five groups with three replications. ND vaccine were sprayed to at 1 -day old chicks at commercial hatchery. Secondary and third vaccination was conducted at 2-week old and 24-day old chicks by LaSota strain. Control was conventionally vaccinated without withdrawing the food and water before or after vaccination. In group 2(G2) and 3(G3), LaSota strain was vaccinated to chicks before and after fasting the food and water for 3 and 2 hours, respectively. Group 4(G4) has the same fasting time of group 2, but supplemented the skim milk in vaccin dilution water. In group 5(G5), skim milk was added into group 3. Weight gain, feed intake and feed conversion were weekly measured for 5 weeks. Blood was collected from wing vein at 24 and 35 days of age. Each serum antibody level were measured by hemagglutination inhibition(HI) test. The average weight gain, feed intake, feed conversion of all group were not significantly different. Weight gain of each groups was 1910.30(control), 1875.28(G2), 1952.12(G4) and 1896.05(G5), respectively. Feed intake of all group was recorded at 3160.67(control), 3167.07(G2), 3189.48(G3), 3157.85(G4) and 3178.16(G5), respectively. The feed conversion of each groups was 1.655(control), 1.688(G2), 1.633(G3), 1.699(G4) and 1.676(G5), respectively. The HI titer of G4 was $ 5.50{\Pm}$1.40 and significantly higher than the other groups (p<0.05)(control : $4.36{\Pm}$1.87 , G2 : $5.18{\Pm}$2.14, G3 : $4.51{\Pm}$2.19, G : $5.28{\Pm}$1.58 at 35 days old. The results of this experiment indicated that two or three hours of fasting time before or after vaccination would be able to show the higher antibody level against ND virus.
Kim, Seung Youn;Kim, Yun Kyung;Eun, Byung Wook;Kim, Nam Hee;Kang, Eun Kyeong;Lee, Byong Sop;Lim, Jung Sub;Lee, Jun Ah;Kim, Dong Ho
Clinical and Experimental Pediatrics
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제55권12호
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pp.474-480
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2012
Purpose: For evaluating the immunogenicity of an influenza vaccine, the microneutralization (MN) test has a higher sensitivity and specificity as compared to the hemagglutination inhibition (HI) test. However, the MN test is more time consuming and is difficult to standardize. We performed the MN test to determine its usefulness as an alternative or complementary test to the HI test for evaluating the immunogenicity of influenza vaccines. Methods: We compared the MN test with the HI test using 50 paired samples taken from a previous clinical study (2008-2009) in Korean children under 18 years of age. Results: The linear correlation coefficients of the 2 tests for H3N2, H1N1, and influenza B were 0.69, 0.70, and 0.66, respectively. We identified a high index of coincidence between the 2 tests. For an influenza vaccine, the postvaccination seroprotection rates and seroconversion rates determined by the MN test were 78.0% and 96.0%, 90% and 42.0%, and 42.0% and 48.0% for H3N2, H1N1, and influenza B, respectively. Geometric mean titer fold increases of H3N2, H1N1, and influenza B were 2.89, 5.04, and 4.29, respectively, and were 2.5-fold higher. We obtained good results in the evaluation of the immunogenicity of the 2008-2009 seasonal influenza vaccines. Conclusion: We found that the MN test was as effective as the HI test. Therefore, we suggest that the MN test can be used as an alternative or complementary test to the HI test for evaluating the immunogenicity of influenza vaccines.
Kim, Young-Hwan;Cheong, Ki-Young;Shin, Woo-Seok;Hong, Sung-Youl;Woo, Hee-Jong;Kwon, Moo-Sik
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권10호
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pp.1529-1536
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2006
We cloned a gene of ompH(D:4) from pigs infected with P. multocida D:4 in Korea [16]. The gene is composed of 1,026 nucleotides coding 342 amino acids (aa) with a signal peptide of 20 aa (GenBank accession number AY603962). In this study, we analyzed the ability of the ompH(D:4) to induce protective immunity against a wild-type challenge in mice. To determine appropriate epitope(s) of the gene, one full and three different types of truncated genes of the ompH(D:4) were constructed by PCR using pET32a or pRSET B as vectors. They were named ompH(D:4)-F (1,026 bp [1-1026] encoding 342 aa), ompH(D:4)-t1 (693 bp [55-747] encoding 231 aa), ompH(D:4)-t2 (561 bp [187-747] encoding 187 aa), and ompH(D:4)-t3 (540 bp [487-1026] encoding 180 aa), respectively. The genes were successfully expressed in Escherichia coli BL21(DE3). Their gene products, polypeptides, OmpH(D:4)-F, -t1, -t2, and -t3, were purified individually using nickel-nitrilotriacetic acid (Ni-NTA) affinity column chromatography. Their $M_rs$ were determined to be 54.6, 29, 24, and 23.2 kDa, respectively, using SDS-PAGE. Antisera against the four kinds of polypeptides were generated in mice for protective immunity analyses. Some $50{\mu}g$ of the four kinds of polypeptides were individually provided intraperitoneally with mice (n=20) as immunogens. The titer of post-immunized antiserum revealed that it grew remarkably compared with pre-antiserum. The lethal dose of the wild-type pathogen was determined at $10{\mu}l$ of live P. multocida D:4 through direct intraperitoneal (IP) injection, into post-immune mice (n=5, three times). Some thirty days later, the lethal dose ($10{\mu}l$) of live pathogen was challenged into the immunized mouse groups [OmpH(D:4)-F, -t1, -t2, and -t3; n=20 each, two times] as well as positive and negative control groups. As compared within samples, the OmpH(D:4)-F-immunized groups showed lower immune ability than the OmpH(D:4)-t1, -t2, and -t3. The results show that the truncated-OmpH(D:4)-t1, -t2, and -t3 can be used for an effective vaccine candidate against swine atrophic rhinitis caused by pathogenic P. multocida (D:4) isolated in Korea.
In our previous studies, we have identified several in vivo-induced antigens and evaluated their potential as subunit vaccine candidates in a murine model, in which the recombinant protein GalT showed the most potent immunogenicity and immunoprotective efficacy against Actinobacillus pleuropneumoniae. To exploit a more efficient way of delivering GalT proteins, in this study, we employed the widely studied E. coli outer membrane vesicles (OMVs) as a platform to deliver GalT protein and performed the vaccine trial using the recombinant GalT-OMVs in the murine model. Results revealed that GalT-OMVs could elicit a highly-specific, IgG antibody titer that was comparable with the adjuvant GalT group. Significantly higher lymphocyte proliferation and cytokines secretion levels were observed in the GalT-OMVs group. 87.5% and 50% of mice were protected from a lethal dose challenge using A. pleuropneumoniae in active or passive immunization, respectively. Histopathologic and immunohistochemical analyses showed remarkably reduced pathological changes and infiltration of neutrophils in the lungs of mice immunized with GalT-OMVs after the challenge. Taken together, these findings confirm that OMVs can be used as a platform to deliver GalT protein and enhance its immunogenicity to induce both humoral and cellular immune responses in mice.
Vibrio harveyi is a pathogenic marine bacterium causing systemic symptoms resulting in mass mortalities in fishes and shrimps in aquaculture. Outer membrane proteins(OMPs) are related to the pathogenicity and thus good targets for diagnosis and vaccination for Gram negative bacteria. Recently vaccination strategies using the OMPs have been suggested to control vibriosis in several fish species. In this study, we have isolated V. harveyi from diseased marine fishes from different regions of Korea and investigated genetic variations of four OMP genes including OmpK, OmpU, OmpV and OmpW. Consequently, OmpK and U genes could be divided into 3 subgroups of type I, II, III and type A, B, C, respectively, without any correlation with geographical regions and species while OmpV and W were highly homologous. OmpW gene of V. harveyi FP4138 was fully sequenced and predicted the deduced amino acid sequence to form ${\beta}-barrel$ with hydrophobic channel. Indeed, the immunogenicity of recombinant OmpW produced in Escherichia coli was assessed by vaccinating flounder. As a result, the high antibody response with antibody titer of $4.2{\pm}0.7$ and protection with relative percent survival of 60% against artificial infection of V. harveyi were demonstrated. This result indicates that OmpW is a virulence related factor and it can be a vaccine candidate to prevent a high mortality caused by V. harveyi infection in olive flounder, Paralichthys olivaceus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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