Propolis extracts는 다양한 성분으로 구성되어 있는 수지상의 혼합물로서 여러 약리작용을 보여주기 때문에 민간요법으로 널리 이용되어왔다. 특히 propolis extracts는 독성이 거의 없다는 장점 때문에 면역증강제재로서 활용가능성이 높게 평가되고 있다. 이에 본 실험에서는 대상으로 in vitro 및 in vivo상에서 propolis extracts가 양식넙치 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. In vitro상에서 propolis extracts가 PBL의 탐식능 및 NBT assay활성능에 미치는 영향을 조사 한 바 유효농도는 $50{\sim}150{\mu}g/ml$ 이었으며, 가장 활성이 높은 농도는 $100{\mu}g/ml$ 이었다. In vivo상에서 양식넙치에 propolis extracts를 단독 또는 S. iniae 불활화 균액과 혼합하여 어체에 투여 후에 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. Haematocrit치는 propolis extracts단독 및 vaccine과 혼합 처리 할때 유의적 차이를 보이지 않았다. 그렇지만, 혈청 lysozyme과 신장대식세포의 탐식능, 활성산소 환원능 및 항체가는 propolis extracts+vaccine 투여구에서 유의적으로 증가하였다. 이러한 결과들에 의하여 propolis extracts는 양식넙치에서 특이적 및 비특이적 면역증강작용이 우수하므로 향후 양식어류에 있어서 비특이적 면역증강 물질 및 adjuvant로 활용가능성이 기대되어진다.
Despite progress in elucidating mechanisms associated with colorectal cancer and improvement of treatment methods, it remains a frequent cause of death worldwide. New and more effective therapies are therefore urgently needed. Recent studies have shown that immunogenicity of whole ovarian tumor cells and subsequent T cell response were potentiated by oxidation modification with hypochlorous acid (HOCl) in vitro and ex vivo. These results prompted us to investigate the protective antitumor response with an HOCl treated CT26 colorectal cancer cell vaccine in an in vivo mouse model. Administration of HOCl modified vaccine triggered robust antitumor immunity to autologous tumor cells in mice and prolonged survival period significantly. In addition, increased necrosis and apoptosis were found in tumor tissue from the oxidation group. Interestingly, ELISPOT assays showed that specific T cell responses were not elicited in response to the immunizing cellular antigen, in contrast to raising sera antibody titer and antibody binding activity shown by ELISA assay and flow cytometry. Further evaluation of the mechanisms underlying HOCl modified vaccine mediated humoral immunity highlighted the role of antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity. These results combined with previous studies suggest that HOCl oxidation modified whole cell vaccine has wide applicability as a cancer vaccine because it can target both T cell- and B cell-specific responses. It may thus represent a promising approach for the immunotherapy of colorectal cancer.
The objective of this collaborative study was to establish a Korean standard of Japanese encephalitis (JE) vaccine (mouse brain-derived, formalin-inactivated) for potency assay. A candidate preparation proposed as a Korean standard was provided by GreenCross Vaccine, and six laboratories, including one national control laboratory and five manufacturers of JE vaccine, participated in the study. The potency of the candidate preparation and a reference standard obtained from Japan was estimated by mouse immunogenicity assay using the in vitro plaque reduction neutralization test (PRNT). The results of 72 assays conducted by the 6 laboratories showed that the overall mean potency estimate of the candidate preparation was 2.455 log median plaque reduction neutralization antibody titer per 0.5-ml dosage administered twice in mice at 7-day intervals, and that the mean potency ratio of the candidate preparation relative to the reference standard was 1.074. The potency estimates were quite variable among laboratories irrespective of the preparation. The variability of assays assessed by Z scores and coefficient of variation (CV) were in general within the level of acceptance (Z scores within $\pm3$ and $CV\;\leq\;15%$). Therefore, we concluded that the candidate preparation would be suitable as a national standard for testing the potency of JE vaccine (inactivated).
미립담체에 고정된 Vero 세포를 이용한 돼지유행성설사병 바이러스 백신의 생산성을 향상시키기 위하여 Phillipsite-Gismondine synthetic zeolite가 투석막에 충진된 Carberry type 생물반응기를 사용하여 암모늄 이온을 선택적으로 흡착하였다. Impeller shaft 및 흡착제 사이에 응집된 미립담체 때문에 세포 성장이 감소하는 것으로 보이나, 포도당 소모량과 젖산 생성량의 비교를 통해 판단 할 때 zeolite는 세포에 독성을 나타내지 않았다. 배양배지로부터 암모늄 이온을 제거함으로써 세포성장 및 바이러스 생산 두 단계 모두가 크게 개선되었다. 바이러스 생산에 있어서는 암모늄 이온 제거에 의해 대조군과 비교하여 바이러스 역가가 2배 이상 향상되었다. 연구결과 zeolite는 암모늄 이온을 효과적으로 흡착제거하여 바이러스 백신의 생산성을 높일 수 있는 이상적인 흡착제임을 확인하였다.
Since the reservoir of leptospires organism is consisted of a broad spectrum of animals, the best method of prevention is vaccination. The clinical trial of leptospires vaccine conducted on human volunteer for its immunogenicity and safety. Summarized results are as following : 1. The Oral temperature among vaccinated group ranged from $36.7{\pm}0.46^{\circ}C\;to\;37.0{\pm}0.34^{\circ}C$, while in placebo injected group it ranged from $36.4{\pm}0.46^{\circ}C\;to\;36.7{\pm}0.53^{\circ}C$. There was no association between vaccination and fever (p>0.05) 2. Mild local reactions revealed in vaccinees were swelling (50-75% ), Redness($75{\sim}90%$), and induration ($25{\sim}40%$). Placebo injected group revealed only redness in 12.5% in 1st injection and 37.5% in second injection. The duration local reactions on injection site for th vaccinees and place groups disappeared within 48 hours. 3. Generalized Symptoms complained by the vaccinees were myalgia (25%), back pain(15%), headache (15%), pruritus(15%), and abdominal pain(10%), whereas placebo group complained of headache (25%), myalgia(12.5%), back pain(12.5%), pain in eyes(12.5%), abdominal pain(12.5%) pruritus (12.5%) and nausea(12.5%). 4. The serological test(MAT) of vaccinees showed geometric mean antibody titer as follows : a. L. icterohemorrhagiae lai 1 week after 1st vaccination : 22.45 1 week after 2nd vaccination : 111.23 3 week after 2nd vaccination : 266.64 b. L. canicola canicola 1 week after 1st vaccination : 24.62 1 week after 2nd vaccination : 123.92 3 week after 2nd vaccination : 276.55 c. L. icterohemorrhagiae copenhageni 1 week after 1st vaccination : 28.28 1 week after 2nd vaccination : 128.55 3 week after 2nd vaccination : 247.88 Whereas all of the place injected group showed below 1:20 titers. The sero-conversion rate of vaccinees were 100 percent.
The present study was carried out to investigate the prevalence of brucellosis in Kyungbuk area for the 3 years from 1966 to 1998. Collective milk samples were routinely screened to detect positive farms by using the milk ring test(MRT), and serum agglutination test was performed to detect sero-positive individuals in the MRT positive farms. Attempt were made to isolate the causative organismas from slaughtered sero-positive reactors and some biochemical and polymerase chain reation characters of the isolates were also made to identify the organisms. Seroprevalence to brucellosis in peoples who are close contact with infected dairy herds was also investigated. Brucellosis of dairy cattle was rare before 1997, but has been broken more frequently since early 1998. By the MRT for dairy herds, positive rate was gradually increased every year : 0.6% in 1996, 1.5% in 1997, 3.9% in 1998. Among 262 MRT-positive herds, only 21 herds(8.0%) showed positive brucellosis in serological test. The isolation rates of Brucella sp from tested materials were 51.2% in supramammary glands, 39.5% in milks, and 50.0% in pulmonary Iymphnode, respectively. Isolated strain and biotype were Brucella(B) arbortus biotype 1 in 26 heads, and were B suis biotype 1 in 2 heads. Isolated strain and vaccine strain were very similar in their colony morphology and staining. In drug susceptibility, isolated stains(B abortus) and vaccine strain(B abortus RB-51) were sensitive to ampicillin, gentamycin, kanamycin, neomycin, penicillin, streptomycin, and to tetracycline, but resistant to erythromycin. In the PCR, field strains reacted to BA and IS711 primers, and vaccine strain reacted to BA, IS711, and RB5l primers. In the plate agglutination test of 96 sera of human contacted with animals, serum antibody titer detected 1 : 100 in one person, 1 : 200 in one, and below 1 : 25 in the others.
The purpose of this study was to investigate the protective effects of the modified live vaccines against canine Bordetella bronchiseptica (Bb) and canine parainfluenza virus (CPIV) in puppies by nasal administration. A total of 24 puppies were classified as 3 groups consisting of 8, and each one was divided into two subgroups; vaccinated (n=4) and unvaccinated (n=4). Group I, group II and group III were challenged with Bb, CPIV, and Bb+CPIV, respectively. In group I vaccinated puppies (n=4) were experimentally challenged with Bb 2 weeks after vaccination and unvaccinated puppies (n=4) were experimentally challenged with Bb alone. The same methods of the above were applied for group II and group III. We carried out several studies including serum tests, isolation, and histopathological examination. The vaccinated puppies showed higher antibody titers than unvaccinated puppies and the titer sustained during the experimental period. In the isolation test, recovery period was shorter in the vaccinated subgroup than in the other. In clinical signs, the unvaccinated puppies showed the typical signs of tracheobronchitis (coughing, nasal and occular discharge), but another subgroup showed delayed incidence and mild clinical signs. The typical gross lesions and histopathological findings were observed in the unvaccinated puppies. In immunohistochemical findings, the vaccinated puppies showed little intensive in reaction for CPIV antigen than the other. It could be concluded that intranasal vaccination of modified live Bb and CPIV vaccine to puppies is effective to prevent canine infectious tracheobronchitis.
In the present study toxicity and immunostimulating activity of the lectin(KML-C), which was extracted from Korean mistletoe(Viscum album coloratum) were investigated in swine. To determine the toxicity, lectin was injected into thigh or cervical muscles of 4-week-old piglets(Landrace) and observed clinically and pathologically. For determination of the immnunostimulating activity, lectin($0.7{\mu}g/kg$ of body weight)-adjuvanted vaccine of Aujeszky's disease virus(ADV)(NYJ1-87) which was inactivated by 0.2% formalin was injected into the cervical muscle of antibody-negative piglets in the same age group. Subpopulation of the immune cells and serum neutralizing(SN) antibodies in the piglets were examined after vaccination, and resistance of the piglets against challenge by virulent NYJ1-87 was further examined. The results were also compared with those from piglets injected with aluminum hydroxide [$Al(OH)_3$]-adjuvanted vaccine of inactivated NYJ1-87 and NYJ1-87 vaccine without adjuvant, and the results are as follows. By injection of lectin with $30{\mu}g/kg$ of body weight to the thigh muscle, all of 12 piglets died after signs such as dyspnea, fever, systemic erythema and subcutaneous hemorrhages, and lesions pertaining to poisonous hepatitis and dysfunction of kidney were observed. By injection of lectin with $7{\mu}g/kg$ of body weight to the thigh muscle, all of 12 piglets showed signs such as edema and cutaneous hemorrhage in the injected area, lameness and depression, and lesions pertaining to poisonous hepatitis and dysfunction of kidney were observed. By injection of lectin with 1, 3 and $5{\mu}g/kg$ of body weight to the thigh muscle of each one piglet, signs such as congestion, induration and grayish coloration in the injected area, depression and inappetence were observed in all piglets. Toxic changes were also observed in the liver and kidney of piglets by lectin of 3 and $5{\mu}g$. By injection of lectin with 0.5 and $0.7{\mu}g/kg$ of body weight to the cervical muscle of each 9 piglets, all piglets were clinically normal and there were no significant changes in blood counts and chemistry values. Whereas, epithelial swelling and vacuolation of convoluted tubules were observed from one piglet injected with lectin of $0.7{\mu}g$, and necrosis and fibrosis of muscular fiber were observed in the muscle of one piglet injected with lectin of $0.5{\mu}g$. Only population of sIgM+ B lymphocytes increased among immune cells in all of 15 piglets immunized with lectin($0.7{\mu}g/kg$ of body weight)-adjuvanted vaccine, while compared to those in $Al(OH)_3$-adjuvanted vaccine and vaccine without adjuvant. No additional stimulation to the immune cells was recognized when lectin was added to $Al(OH)_3$-adjuvanted vaccine. In piglets immunized with lectin-adjuvanted vaccine, SN titers in reciprocal values for loge were 1.3-4.0 at 1-4 weeks after vaccination, which was similar to those with 1.0-3.3 by vaccine without adjuvant but lower than those with 2.0-5.7 by $Al(OH)_3$-adjuvanted vaccine. Also, no additional increase in the SN titers was recognized when lectin was added to $Al(OH)_3$-adjuvanted vaccine. Piglets immunized with lectin-adjuvanted vaccine were resistant to challenge by the virulent NYJ1-87 at 4 weeks after vaccination, and the SN titers reached to 5.0 one week after challenge, which was higher than those with 4.0 by vaccine without adjuvant but somewhat lower than those with 7.7 by $Al(OH)_3$-adjuvanted vaccine.
우리나라 뉴캣슬병 (ND) 면역상의 문제점을 파악하고 명확한 예방접종지침을 제시하는 목적의 일환으로 우선 ND 유행이 극심하였던 지역의 일반양계농장에서 사육되는 건강면역군의 예방접종경력과 혈구응집억제항체가(HI 가)를 조사하여 야외에서 실시된 ND예방접종결과에 따르는 면역효과를 간접적으로 파악하는 한편 동일지역 내에서 ND발생계군과 비발생계군에 대한 예방접종경력과 발생계군의 피해상황을 조사함으로서 야외에서 실시한 ND예방약의 응용방법과 본병발생과의 관계를 조사한 추구 결과는 다음과 같다. 1. ND 유행지역에서 조사한 26건강면역계군의 예방접종경력은 각양계농장 임의대로의 예방접종 프로그램에 따라서 22계군은 LV와 LV병용. 잔여 4계군은 KV단용에 의해서 각각 면역되었다. 이들의 HI가는 일반적으로 전자가 높았고 후자는 낮은 경향을 보였으며, 그 평균치는 각각 146. 50이었다. 그리고 전자의 22계군 중 특히 낮은 역치(10, 23)를 보였던 그계군은 추후 ND발생을 보았으나 잔여 20계군 및 KV 단용 4계군은 모두 무사히 경과하였다. 2. ND유행지역에서 조사한 ND발생14계군의 예방접종경영은 무접종이 1계군이고 잔여 13계군은 각양계농장 임의대로의 접종프로그램에 따라서 LV단용이 8계군, LV와 KV병용이 5계군이었다. 폐사율에 있어서 후자는 5.1%인데 반하여 전자는 32.5%의 피해 즉 후자에 비하여 6.28배의 월등히 높은 폐사율을 보였다. 한편 ND비발생 4계군은 LV와 KV병용 혹은 KV단용 예방접종프로그램에 의해서 면역되었으며 LV단용계군은 1예도 없었다. 3. 야외에서 조사한 면역계군들의 LV응용은 거의가 ND면역상 불리하다고 보여지는 음수 투여에 의해서 면역되었으며 극히 소수예가 비질내적하 혹은 일정 희척 LV병독액 속에 파면역추의 입, 코, 눈까지 침지하는 특이한 방법으로 면역되었다.
In 2015, a candidate for the second national reference standard (NRS) of Gloydius snake venom was produced to replace the first NRS of Gloydius snake venom. In the present study, the potencies of the candidate were determined by a collaborative study, and the qualification of the candidate was estimated. The potencies of the candidate were determined by measuring the murine lethal titers and lapine hemorrhagic titers of venom against the regional working reference standard (RWRS) for antivenom using the methods described in the previous report for the first NRS of Gloydius snake venom. Three Korean facilities contributed data from a total of 30 independent assays. Subsequently, two foreign national control research laboratories contributed to this collaborative study. The results were calculated using the Reed-Muench method for lethality and determined using a mixed-effects model for hemorrhage. The general common potencies of the lethal and hemorrhagic titers were obtained from the results of the 30 tests performed at three Korean facilities. The results are expressed in micrograms for 1 test dose (TD) with a 95% confidence interval as follows: a lethal titer of $90.13{\mu}g/TD$ (95% confidence interval = $87.39{\sim}92.86{\mu}g$) and a hemorrhagic titer of $10.80{\mu}g/TD$ (95% confidence interval = $10.46{\sim}11.14{\mu}g$). In addition, the candidate preparation showed good quality evaluation according to the results of the quality estimation of the candidate and is judged to be suitable to serve as the Korean NRS for snake venom. In conclusion, the second NRS of Gloydius snake venom was established in this study and will be used for national quality control, including a national lot release test of Korean antivenom products.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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