• 제목/요약/키워드: u-HPLC

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인체혈청 중 펜톡시필린의 정량을 위한 HPLC 분석법의 점증 및 단일용량 투여에 의한 약물동태 (Validation of a HPLC Method for Determination of Pentoxifylline in Human Serum and Its Application to Single-dose Pharmacokinetics)

  • 성민경;박효민;김나형;정수연;고은정;이화정
    • 한국임상약학회지
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    • 제15권1호
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    • pp.46-49
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    • 2005
  • A simple HPLC method was employed for the determination of pentoxifylline in human serum. After addition of internal standard (IS, 50 uL of 3 ug/mL chloramphenicol methanol solution) into the serum sample, the drug and IS were extracted by dichloromethane. Following a 1-min vortex-mixing and a 15-min centrifugation at 3500 게m, the organic phase was transferred and evaporated to dryness under a vacuum. The residue was reconstituted with 120 ${\mu}L$ of mobile phase and 50 ${\mu}L$ was injected into C18 column with a mobile phase composed of 0.034 M phosphoric acid adjusted to pH 4 with 10 M NaOH and acetonitrile (75:25, v/v). The samples were detected using an ultraviolet detector at 273 nm. The method was simple, specific and validated with a limit of 10 ng/mL. Intra- and inter-day precision and accuracy were acceptable for all quality control samples including the lower limit of quantification. The applicability of this method was evaluated by analysis of human serum after oral administration of a single 400 mg dose to 8 healthy subjects. The pharmacokinetic parameters for pentoxifylline in human subjects were calculated using WinNonlin program. As a result, $AUC_{t},\;C_{max},\;T_{max}$ and $t_{1/2}$ were $962.28{\pm}645.69\;ng{\cdot}/mL$, $132.82{\pm}42.05$ ng/mL, $2.06{\pm}2.68$ hr and $8.74{\pm}4.38$ hr, respectively. Based on the results, this validated method appears to be useful fur the pharmnacokinetic study of pentoxifylline in humans.

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목단피 추출물의 항균 및 항산화 작용 (Antimicrobial and Antioxidative Activities from Moutan Cortex Extract)

  • 권오근;손진창;김상철;정신교;박승우
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제5권3호
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    • pp.281-285
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    • 1998
  • 목단피의 메탄을 추출물과 용매 분획물을 이용하여 항균작용, 프리라디칼 소거작용 및 항산화 작용을 검색하고, HPLC와 GC를 이용하여 페놀화합물을 분석하였다. 항균작용은 에칠아세테이트 분획에서 가장 높게 나타났으며, 그람 음성균보다는 그람 양성균에 대하여 더욱 효과적이었다. 에칠아세테이트 분획의 MIC를 측정한 결과, 그람 양성균에 대하여는 156-1250$\mu\textrm{g}$/ml, 그람 음성균에는 2500-5000$\mu\textrm{g}$/ml 이었다. DPPH 라디칼에 대한 프리라디칼 소거활성과 linoleic acid를 이용한 항산화 시험에서도 에칠아세테이트 분획이 가장 높은 활성을 나타내었다. 에칠아세테이트 분획의 항산화 활성은 $\alpha$-tocopherol과 비슷하였다. 에칠아세테이트 분획으로부터 U와 HPLC를 이용하여 3종의 페놀화합물을 확인하였으며, 그 함량은 p-hydroxybenzoic acid 1.35%, methyl gallate 14.61%, gallic acid 4.01% 이었다.

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수수 줄기에 함유(含有)된 타감물질(他感物質)의 분리(分離) 및 특성(特性) 구명(究明) (Isolation and Characterization of Allelopathic Substances from Sorghum Stem)

  • 김상열;에스 케이 디다타;알 피이 로블레스;김길웅;이상철;신동현
    • 한국잡초학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.156-162
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    • 1994
  • 수수 줄기에 함유된 타감물질(他感物質)중 가장 강한 활성을 나타내는 물질을 rapid chromatography, flash flow column chromatography로 분리하고 thin layer chromatography와 HPLC로 정제하여 GC-MS로 분석하였다. Butanol, acetic acid 및 water의 용매 조합을 달리하여 타감물질을 분리한 결과 butanol (8) : actic acid (1) : water (1) 분획에서 억제효과가 가장 크게 나타났으며, flash flow column chronatography와 TLC로 분리 한 결과 가장 활성을 나타내는 물질은 Rf 0.71에서 나타났으며 HPLC로 순수분리한 결과 Rt 20.40min에서 elution되었다. 이 물질은 주황색을 띄며 methanol에 용해성이 있었다. 정제된 물질을 GC-MS로 분석한 결과 예상되는 물질은 1-methyl-1-(2-propinonyl)-hydrazine, 1-aziridineethanol, 5-chloro-2-pentanone, 2-(methylseleno)-ethanamine 중한 물질일 것으로 추측되었다.

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Lactobacillus acidophilus GP4A 박테리오신의 정제, Bacteriolytic 작용 및 생산 관련 Plasmid의 선별 (Purification, Bacteriolytic Action and Plasmid Isolation of Acidocin 4A Produced by Lactobacillus acidophilus GP4A)

  • 한경식;전우민;김영훈;김세헌
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
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    • 제21권2호
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    • pp.114-119
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    • 2003
  • Lactobacillus acidophilus CP4A 균주가 생산하는 acidocin 4A를 정제하고자 ammonium sulphate 침전법 , Octyl-sepharose CL-4B column chromatography, $C_{18}$ Sep-Pak cartridge, $C_{18}$ RP HPLC, HPLC gel filtration을 실시하였고 tricine SDS-PAGE를 통해 약 4.1 kDa의 박테리오신임을 확인하였다. Acidocin 4A의 항균작용 기작을 L. delbrueckii subsp. lactis ATCC 4797을 대상으로 TEM을 이용해 관찰한 결과 세포벽이 해리되고 세포벽사이로 세포내용물이 용출되어 궁극적으로 cell lysis가 일어나는 bacteriolytic 현상을 확인하였다. 또한, acidocin 4A의 생산에 관련된 유전자의 존재 위치를 파악하고자 EtBr을 이용한 curing방법을 실시하였으며 그 결과 약 20 kb 크기의 plasmid에 acidocin 4A 생산과 자체 면역에 관련된 유전자가 존재함을 알 수 있었다.

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Simple Purification of Escherichia coli-Derived Recombinant Human Interleukin-2 Expressed with N-terminus Fusion of Glucagon

  • Won Hye-Soon;Lee Jeewon;Kim In-Ho;Park Young-Hoon
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제5권1호
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    • pp.13-16
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    • 2000
  • Simple procedures have been devised for purifying recombinant human interleukin-2 (hIL-2), which was expressed in Escberichia coli using sequences of glucagon molecules and enterokinase cleavage site as an N-terminus fusion partner. The insoluble aggregates of recombinant fusion protein produced in E. coli cytoplasm were easily dissolved by simple alkaline pH shift $(8\rightarrow12\rightarrow8)$. Following enterokinase cleavage, the recombinant hIL-2 was finally purified by one-step reversed-phase HPLC with high purity. The ease and high efficiency of this simple purification process seem to mainly result from the role of used glucagon fusion partner, which could be applied to the production of other therapeutically important proteins.

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초고속 액체크로마토그래피를 이용한 고춧가루의 capsaicinoids 분석 (Determination of capsaicinoids in red pepper powder using ultra high performance liquid chromatography)

  • 남궁배;이윤열;하재호
    • 분석과학
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    • 제26권4호
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    • pp.256-261
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    • 2013
  • 고춧가루의 매운맛을 나타내는 capsaicinoids인 capsaicin과 dihydrocapsaicin을 초고속액체 크로마토그래피로 간편하게 측정하기 위하여 고춧가루의 입도, 추출시간에 따른 추출율 비교하고 환류추출법과 가열블록법을 비교하였다. 환류추출법의 경우 3 시간 추출하는 것이 효율적이었으며 capsaicinoids 추출율은 덜 매운 고춧가루의 경우 입도가 고울수록 높았으나 매운 청량고추의 경우는 추출율이 입도에 영향을 덜 받았다. 시료량을 달리한 경우 용매의 사용을 동일하게하면 시료를 적게 사용하는 것이 추출율이 높았다. 환류추출법으로 3시간 추출한 것은 가열블록법으로 1 시간 추출한 것에 비하여 추출효율이 3-9% 높았으나 품질관리의 목적인 경우 신속간편 방법인 가열블록법으로 고춧가루의 capsaicinoids를 측정하는 것이 가능하였다.

Quantitative Determination of Five Phenolic Peroxynitrite-scavengers in Nine Korean Native Compositae herbs

  • Nugroho, Agung;Lim, Sang-Cheol;Karki, Subash;Choi, Jae Sue;Park, Hee-Juhn
    • Natural Product Sciences
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    • 제21권3호
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    • pp.155-161
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    • 2015
  • Peroxynitrite (ONOO)-scavenging activities of nine Compositae herbs consisting of three Ixeris, two Youngia, two Cirsium and one of each Lactuca and Taraxacum species were evaluated. The contents of their ONOO scavengers in the extracts were also determined on a HPLC using seven standard compounds, chlorogenic acid (CGA), chicoric acid (CA), luteolin 7-glucoside (luteolin-7-glc), luteolin 7-glucuronide (luteolin-7-glcU), luteolin, linarin and pectolinarin. Five of those compounds exhibited potent ONOO-scavenging activities: IC50, CA (0.76 μM), CGA (1.34 μM), luteolin (0.81 μM), luteolin-7-glc (0.86 μM) and luteolin-7-glcU (3.13 μM). Both CA and luteolin-7-glc were highly contained in I. dentata (19.71 mg/g and 13.58 mg/g, respectively), I. dentata var. albiflora (17.58 mg/g and 23.83 mg/g, respectively) and I. sonchifolia (65.71 mg/g and 6.99 mg/g, respectively). Among the nine herbs, those three Ixeris species had very low IC50 values over the range of 0.48 - 1.74 μg/mL, suggesting that they could be potential therapeutic vegetables, particularly for preventing diabetic complications or obesity, which can be caused by an excess production of ONOO.

Induction of Sexual Stage and Colony Morphology of Some Isolates of Sclerotium rolfsii Causing Spotted Leaf Rot in Plants

  • Pandey, M.K.;Sarma, B.K.;Singh, U.P.
    • Mycobiology
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    • 제33권1호
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    • pp.7-11
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    • 2005
  • Twenty-two isolates of Sclerotium rolfsii causing spotted leaf rot from Varanasi, India were grown on 6% Cyperus rotundus rhizome meal agar (CRMA) medium for the induction of athelial stage (Athelia rolfsii). Only one isolate obtained from Sphaeranthus indicus formed basidial stage on CRMA medium while the other 21 isolates did not. Basidial stage was also produced in S. indicus isolate at different concentrations (5.5, 6.0 and 6.5% w/v) of CRMA medium. Size of basidia, sterigmata and basidiospores of this isolate was measured. Basidia clavate, hyaline and measured $10{\sim}12{\times}4{\sim}5\;{\mu}m$ in size, basidiospores hyaline, unicellular, subglobose to ellipsoid produced on sterigmata and measured $3{\sim}5{\times}2{\sim}4\;{\mu}m$ in size, sterigmata hyaline and measured $4{\sim}5{\times}1.5{\sim}2\;{\mu}m$ in size. The results of the present study revealed wide variation in spotted leaf rot isolates of S. rolfsii. A reddish zone around the colony of S. rolfsii isolate from Vernonia sp. was observed on CRMA medium. HPLC analysis of the zone revealed the presence of gallic and ferulic acid which were also thought to be responsible for reduced mycelial growth of the isolate on CRMA medium.

Aspergillus ficuum 조효소액으로부터 Exoinulinase의 정제 및 특성 (Purification and Properties of Aspergillus 3cuum exoinulinase)

  • 한상배;송근섭;유향숙;노민환;이태규;손희숙;우순자;엄태봉
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.253-258
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    • 1991
  • Aspergillus ficuum이 생산하는 exoniulinase가 CM-Sephadex, DEAE-Sepharose 6B, 및 HPLC gel filtration을 통해 단백질 mg당 약 2,800U의 specific activity로 정제되었다. 이 효소는 native 상태에서 약 83,000+1,000의 분자량을 나타냈으며 당을 함유하고 있었다. 이 효소는 최적 pH가 4.4-4.7이었고, 55'C에서 8시간 노출 후에도 그 활성을 95 유지하였다. 이 효소의 I/S ratio는 약 0.35이고 전형적인 non-speific Beta-fructofuranosidase의 특성을 나타내었으며 raffinose와 stachyose를 분해할 수 있었다.

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