• 생명과학회지
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• 제16권6호
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• pp.964-971
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• 2006

기질의 침윤과 전이를 특징으로 하는 악성종양 세포는 세포외 기질이나 기저막에 의존적으로 작용한다. 세포외 기질을 분해하는 효소인 matrix metalloproteinase (MMP) 계들의 발현 및 활성증가는 대부분의 악성종양세포에서 전이와 침윤을 촉진시킨다. MMP family 가운데 특히 type IV collagenase 활성을 지닌 MMP-2와 MMP-9은 세포외기질의 중요한 구성분인 collagen, fibronectin을 분해하는 특성을 가지며 암 전이를 용이하게 하는 주요한 효소로 잘 알려져 있다. 본 연구에서는 항암후보물질인 disulfiram이 골 육종 (U20S), 신장암 (Caki-1) 및 자궁암 (Caski) 세포에서 MMP-2와 MMP-9의 효소활성 및 발현억제에 대해 조사하였다. MTT assay를 이용하여 disulfiram에 대한 암세포 viability 실험에서는 disulfiram이 암세포의 viability를 저해하였다. 또한 zymography, western blot 및 RT-PCR 등을 이용한 type IV collagenase의 활성 및 발현 실험에서 disulfiram은 type IV collagenase의 활성을 비롯하여 단백질 및 mRNA 발현을 억제시키는 것을 확인하였다. 따라서 disulfiram이 MMP-2와 MMP-9의 활성 및 발현 억제 기전을 통하여 골 육종, 신장암 및 자궁경부암 세포의 작용을 억제한다는 연구 결과는 disulfiram이 각종 악성종양의 침윤과 전이를 억제 또는 방지하기 위한 치료물질로서 임상에서 활용할 수 있는 가능성을 보여준다.

• 대한핵의학회지
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• 제30권3호
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• pp.332-337
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• 1996

기저막 성분인 type IV collagen을 분해하는 type IV collagenase의 농도와 종양의 전이사이에 상관관계가 있다는 동물 실험보고가 있다. 저자들은 유방암환자의 종양조직내 type IV collagenase의 농도와 골스캔상 골전이 소견과 비교하여 그 의의를 알아보고자 하였다. 원발성 및 전이성 유방암 환자의 종양조직에서 92kDa 및 72kDa type IV collagenase에 대한 면역조직화학염색을 각각 57명, 56명 환자에서 시행하여 각 효소 농도를 평가하고 골스캔상 골전이 소견을 관찰하고 등급을 부여하였다. 면역조직화학적으로 평가한 각 효소의 농도는 원발성 유방암과 전이성 유방암 환자 사이에 큰 차이가 있었으며, 골스캔 소견과 효소농도를 상호 비교한 결과 각 효소의 농도가 170이하일 경우에는 골스캔상 활동적인 골전이 소견을 볼 수 없었으나 효소의 농도가 200이상일 경우 골스캔 소견은 정상에서 골전이 소견까지 매우 다양하게 분포하였다. 결론적으로, 면역 조직화학적으로 측정한 92kDa 및 72kDa collagenase의 농도가 170이하일 때는 골스캔상 대부분 정상소견을 보여 골전이의 확률이 낮았다. 반면에 각 효소치의 농도가 200이상일 경우에는 골전이의 확진과 병소의 위치를 확인하고 추적검사를 위해서는 골스캔이 필요하다고 사료된다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제20권6호
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• pp.539-544
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• 1997

Anti-metastatic activities of IH901, an intestinal bacterial metabolic derivative formed from Ginseng protopanaxadiol saponins, was determined in vitro and in vivo. Under in vitro conditions, IH901 inhibited the migration of bovine aortic endothelial cells 25 times stronger than suramin and suppressed the invasion of HT1080 human fibrosarcoma cells into reconstituted basement membrane components of Matrigel 1000 times stronger than RGDS peptide. IH901 also showed inhibitory effect on type-IV collagenase secretion from HT 1080 cells and platelet aggregation. When the anti-metastatic activity of IH901 was evaluated in comparison with that of 5-FU using a spontaneous lung metastatic model of Lewis lung carcinoma, the administration of IH901 (10 mg/kg p. o.) to tumor-bearing mice led to a significant decrease in lung metastasis (43% of untreated control), which was slightly more effective than that obtained with 5-FU (56% of control). Thus, IH901 seems to exhibit its anti-metastatic activity partly through the inhibition of tumor invasion which results from the blockade of type IV collagenase secretion and also through anti-platelet and anti-angiogenic activities.

• 대한치과의사협회지
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• 제37권2호통권357호
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• pp.131-136
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• 1999

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제21권3호
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• pp.353-357
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• 2008

A series of studies has been conducted to establish a base infrastructure for an ovarian follicle culture system in the porcine and this study was designed to develop an effective retrieval protocol of preantral follicles. Five different methods using collagenase type I (A) or IV (B, C1, C2 and C3), which employed different treatment durations and/or conditions, were employed and sliced ovarian tissue of prepubertal gilts was provided for the retrieval. A significant increase in total number of follicles retrieved was detected when collagenase IV (methods B or C) was used. In total, more ovarian follicles were retrieved by method B undertaking agitation and method C2 without the agitation than method C1 and C3, while the number of preantral follicles collected was the largest in method B. Neither incubation in 5% $CO_2$ in air atmosphere instead of the agitation nor increased duration of enzymatic treatment up to 120 minutes improved the efficiency of follicle retrieval. There were no differences in the number of follicles retrieved from intact ovaries and from used ovaries for oocyte collection. These results demonstrate the collagenase IV treatment with agitation is effective for retrieving porcine preantral follicles from the ovaries.

• BMB Reports
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• 제29권5호
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• pp.484-487
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• 1996

The matrix metalloproteinases (MMPs) are members of a unique family of proteolytic enzymes that degrade components of the extracellular matrix. Significant evidence has accumulated to directly implicate members of the MMPs in tumor invasion and metastasis formation. To investigate the correlation between ras oncogene and MMP gene expression in various tumor cells, we detected mRNAs for the ras, MMP-2 and MMP-9 (72 kD and 92 kD type IV collagenases, respectively) genes in nine human tumor cell lines. The ras gene was expressed in seven cell lines; MMP-2 in three; MMP-9 in two cell lines tested. There was no direct correlation between the ras oncogene and MMP expression. A clear difference in the mRNA expression between MMP-2 and MMP-9 was observed among the cell lines. As an approach to study the effect of the ras oncogene on metastasis, we examined the expressions of MMP-2 and MMP-9 in HT1080 cells transfected with the v-H-ras gene. MMP-9 expression was Significantly enhanced in the ras-transfected HT1080 cells compared with the nontransfectants while ras transfection did not affect the expression of MMP-2. These results suggest the possible inducing effect of the ras oncogene on the metastasis by activation of the MMP-9 gene in HT1080.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2001년도 Proceedings of the Pharmaceutical Society of Korea
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• pp.192.1-192.1
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• 2001

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2001년도 Proceedings of the Pharmaceutical Society of Korea
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• pp.192.2-192.2
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• 2001

• 대한본초학회지
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• 제27권3호
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• pp.89-94
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• 2012

Objects : The purpose of this study was to observe the effect of Salviae Miltriorrhiza Radix(SMR) water-extract on intracerebral hemorrhage(ICH) and neuronal apoptosis in the injured areas. Method : ICH was induced by the stereotaxic intrastriatal injection of bacterial collagenase type IV in Sprague-Dawley rats. The rats were givened oral SMR treatment once a day for three days after the ICH treatment. TUNEL positive cells in the affected regions were performed by TUNEL assay, Bax and Bcl-2 positive cells by immunohistochemistry and the Bax expression by western blotting method. Results : The results are as follow; 1. SMR significantly reduced the number of TUNEL positive cells in the peri-hematoma reigions of ICH-induced rats. 2. SMR significantly reduced the number of Bax positive cells in the peri-hematoma regions of ICH-induced rats. 3. SMR did not affect the number of Bcl-2 positive cells in the peri-hematoma regions of ICH-induced rats. 4. SMR significantly reduced the Bax expressions compared with ICH group in hemorrhagic hemisphere of ICH-induced rats. Conclusion : These results suggest that SMR is effective in reducing neuronal apoptosis.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제28권4호
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• pp.703-721
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• 1998

본 실험에서는 치주질환 발병에 위험인자이고 창상치유에 위해한 영향을 미치는 흡연이 치주조직에 미치는 반응을 규명하기 위해 치은 섬유아세포의 중요한 기능인 교원질 합성과 분비된 단백질 분해에 영향을 주는 효소활성도를 중심으로 Nicotine과 NNK가 이 세포에 미치는 영향을 관찰하고 또한Nicotine이 NNK로 대사되어 작용을 나타내는 것인지, Nicotine과 NNK가 서로 다른 경로를 통하여 치은 섬유아 세포에 영향을 주는지를 규명하고자 이들 화합물의 돌연변이성 실험, 세포 증식을 보기위한 MTT test와 교원질과 collagenase의 mRNA 수준 및 교원질 분해 효소의 효소활성들을 실험하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Nicotine은 대사 활성계의 존재 여부와 상관없이 돌연변이성을 나타내지 않았고 NNK 의 경우에는 그 자체로는 돌연변이성이 없었으나, 대사활성계가 존재하는 경우에 농도의존적으로 돌연변이성을 나타내었다. 2. 증식능 실험에서 흡연자의 세포증식능은 비흡연자에 비해 감소되었다. 3. 비흡연자의 치은 섬유아세포에 Nicotine 과 NNK를 처리한 경우에 대조군에 비해농도 의존적으로 세포 증식능이 감소되었으며, 고농도에서 Nicotine의 경우 세포 독성을 나타내었으나, NNK는 세포독성을 나타내지 않았다. 4. 교원질 분자의 mRNA 수준에 대한 Nicotine의 효과는 proa1과 pro ${\alpha}2$ 모두에 영향을 주지 않았고, NNK는 pro ${\alpha}1$의 경우에는 감소하였으나, proa2에는 영향을 주지 않았다. 5. Collagenase의 mRNA 수준에 대한 효과에서 Nicotine은 없었으나 NNK는 감소하였다. 6. 교원질 분해 효소에 대한 Nicotine과 NNK의 효과는 I형 교원질의 분해 효소를 알기 위한 collagenase 효소 활성의 경우에는 효과가 모두 증가되었으나, IV형 교원질의 분해 효소인 gelatinase 효소 활성에는 영향을 주지 않았다. 또한 흡연자의 collagenase 효소활성은 비흡연자의 치은 섬유아세포에 Nicotine이나 NNK를 처리한 경우와 비슷한 수준으로 증가되었다. 이상의 결과로 보아 Nicotine과 NNK는 모두 치은 섬유아세포에 영향을 주어 교원질의 양을 감소시키며, 그 기전은 서로 다른 경로를 통하여 일어나는 것으로 사료된다.