• 제목/요약/키워드: tumor cell line

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폐암세포주에서 Heme Oxygenase-1의 억제가 Cisplatin의 항암제 감수성에 미치는 영향 (The Effect of Inhibition of Heme Oxygenase-1 on Chemosensitivity of Cisplatin in Lung Cancer Cells)

  • 김소영;김은정;장혜연;황기은;박정현;김휘정;조향정;양세훈;정은택;김학렬
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제62권1호
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    • pp.33-42
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    • 2007
  • 연구배경: 다양한 고형암에서 HO-1의 높은 발현이 알려져 있고, 그것의 항산화와 항세포고사의 역할로 인해 빠른 암종의 성장에 중요한 역할이 있음이 보고되고 있다. 대표적인 활성산소종 생성 항암제인 Cisplatin은 현재까지 폐암치료에 가장 광범위하게 사용되고 있으나, 여러 내성발생이 임상치료의 주요문제로 대두되고 있다. 저자들은 A549 폐암세포주에서 HO-1의 발현이 증가되었고 HO-1 활성억제제나 siRNA 방법을 통해 생존율의 의미 있는 감소와 세포고사가 유도됨을 보고한 바 있다. 이 연구의 목적은 A549 폐암세포주에 cisplatin 처리시 HO-1의 발현의 증가유무와 기전을 규명하고 실제 HO-1의 억제가 cisplatin에 의한 항암제 감수성을 증가시키는지를 알아보는데 있다. 방 법: 비소세포폐암세포주인 A549, NCI-H23, NCIH157, NCI-H460을 이용하였다. 세포독성은 MTT 방법으로 구하였고, HO-1, Nrf2, MAPK의 발현은 Western blotting으로 확인하였다. 또한 MAPK억제제들을 전처치한 후 cisplatin에 의해 유도된 Nrf2와 HO-1의 발현에 미치는 영향을 역시 Western blotting으로 관찰하였다. A549세포에 활성억제제인 ZnPP나 HO-1 small interfering RNA (siRNA)을 주입하여 cisplatin과의 병합요법시 생존율의 배가효과 유무를 MTT 방법으로 확인하였고, 이러한 효과가 ROS 형성과 HO-1의 발현변화와 관련되는지를 알아보기 위해 $carboxy-H_2DCFDA$ 방법과 Western blotting을 통해 각각 확인하였다. 결 과: Cisplatin 처리시 다른 세포주에 비해 A549 세포가 의의 있게 내성을 보였다. $10{\mu}M$의 농도에서 시간 의존적으로 HO-1, Nrf2, MAPK의 발현이 증가하였고, MAPK 억제제들을 전 처치하였을 때 cisplatin에 의해 유도된 HO-1과 Nrf2의 발현이 억제됨을 확인하였다. HO-1의 활성억제제인 ZnPP와 HO-1 siRNA를 통해 HO-1 mRNA를 직접 억제하는 방법으로 cisplatin과 병합치료시 단독치료에 비해 의의 있는 생존율의 감소를 보였다. 이러한 효과는 활성산소종의 생성 증가와 HO-1의 발현억제에 의한 결과임을 확인하였다. 결 론: Cisplatin 처리시 HO-1의 발현은 MAPKNrf2-HO-1의 경로를 통해 증가하였고, 부분적으로 치료에 대한 내성과 관련이 있었으며, ZnPP 등의 활성억제제나 siRNA를 통한 knock-down 방법으로 HO-1 을 표적으로 억제하는 치료방법을 통해 cisplatin의 항암제 감수성을 증가시켰다.

비소세포 폐암의 제한된 각도를 이용한 세기변조와 용적변조회전 방사선치료계획의 폐 선량에 관한 연구 (A Study on lung dose of Intensity modulated and volumetric modulated arc therapy plans using restricted angle of Non-small cell lung cancer)

  • 염미숙;이우석;김대섭;백금문
    • 대한방사선치료학회지
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    • 제26권1호
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    • pp.21-28
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    • 2014
  • 목 적 : 비소세포 폐암의 치료용적의 크기가 크거나 폐 용적이 작고, 몸의 정중선(Mid line)에 위치한 경우 척수의 허용선량을 고려한 방사선치료계획에서 폐 선량이 많아지게 되는데, 본 연구는 비소세포 폐암 환자의 3차원입체조형치료(Three dimensional conformal radiotherapy, 3D CRT), 제한된 각도를 이용한 세기변조방사선치료(Intensity modulated radiotherapy, IMRT)와 용적변조회전치료(Volumetric Modulated Arc therapy, VMAT) 치료계획을 각각 적용하여 전체 폐 선량을 비교 및 평가하고자 한다. 대상 및 방법 : TrueBeam STx($Varian^{TM}$, USA) 10 MV 에너지를 이용하여 4명의 환자에 대하여 3D CRT, 제한된 각도를 이용한 IMRT와 VMAT 치료계획을 세우고, 총 선량 66 Gy/30 Fx 처방하였을 때, 선량용적히스토그램(Dose Volume Histogram, DVH)을 이용하여 치료계획용적(Planning Target Volume, PTV), 전체 폐 그리고 척수에 들어가는 선량을 평가하였다. PTV에 대한 처방선량지수(Conformity Index, CI), 선량균질지수(Homogeneity index, HI), 처방선량포함지수(Paddick's Conformity Index, PCI)를 구하고, 폐의 30 Gy 용적($V_{30}$), $V_{20}$, $V_{10}$, $V_5$, 평균선량(Mean dose)을 평가하고, 척수의 최대선량 값을 평가하였다. 결 과 : PTV에 대한 CI, HI, PCI의 평균값은 각각 $0.944{\pm}0.009$, $1.106{\pm}0.027$, $1.084{\pm}0.016$으로 평가되었다. 전체 폐에 대한 첫 번째 환자의 $V_{20}$은 3D CRT, IMRT, VMAT 각각 30.7%, 20.2%. 21.2%, 두 번째 환자의 $V_{20}$은 33.0%, 29.2%. 31.5%, 세 번째 환자의 $V_{20}$은 51.3%, 34.3%. 36.9%, 네 번째 환자의 $V_{20}$은 56.9%, 33.7%. 40%로 제한된 각도를 이용한 IMRT 치료계획에서 가장 낮게 평가되었다. 척수에 대한 최대선량 값은 모두 허용선량 미만으로 평가되었다. 결 론 : 비소세포 폐암의 방사선치료계획에서 3D CRT와 비교했을 때, 제한된 각도를 이용한 IMRT나 VAMT을 이용하면 척수의 허용선량을 넘지 않으면서 폐 선량을 줄여줄 수 있는 치료계획을 세울 수 있었다. IMRT와 VAMT을 비교해보면 PTV의 선량포함과 척수선량을 고려했을 때 IMRT 치료계획에서 보다 좁은 각도를 이용한 치료계획이 가능하였고, 이는 폐 선량을 좀 더 줄여줄 수 있는 결과를 얻을 수 있었다.

파골세포 분화에 미치는 노회(蘆會) 추출물의 효과 (Effect of Water Extract of Aloe in RANKL-induced Osteoclast Differentiation)

  • 이정휴;이명수;채수욱;김하영;문서영;전병훈;조해중
    • 동의생리병리학회지
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    • 제25권6호
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    • pp.1008-1013
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    • 2011
  • Osteoporosis is the leading underlying cause of fractures, particularly in postmenopausal women, due to the loss of estrogen-mediated suppression of bone resorption. More than 50% of adults 50 years of age or older are estimated to have osteoporosis. Osteoclast which is main target for treatment of osteoporosis is originated from hematopoietic cell line. Aloe has been widely used in worldwide country as a coadjuvant medicine. Extracts of the leaves of Aloe have been used in condition to improve dermatologic problem such as seborrheic dermatitis, aphthous stomatitis, xerosis, lichen planus and has been known to exert anti-inflammatory, anti-oxidant and anti-tumor effects. However, despite the popularity of aloe as a plant food supplements, the evaluation of its efficacy as a possible therapeutic option for osteoporosis remains scarce. Thus, we evaluated the effect of Aloe on receptor activator of nuclear factor-${\kappa}B$ ligand (RANKL)-induced osteoclast differentiation. Here we found that Aloe significantly inhibited osteoclast differentiation induced by RANKL. Aloe suppressed the activation of p38 pathway and $NF{\kappa}B$ in bone marrow macrophages (BMMs) treated with RANKL. Also, Aloe significantly inhibited the mRNA expression of c-Fos, tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), osteoclast-associated receptor (OSCAR), nuclear factor of activated T cells (NFAT)c1 and cathepsin K in BMMs treated with RANKL. Particularly, Aloe greatly inhibited the protein expression of c-fos and NFATc1. Taken together, our results suggested that Aloe may be useful tool for treatment of osteoporosis by inhibition of osteoclast differentiation.

백하수오(白何首烏) 물 추출물의 파골세포 분화에 미치는 영향 (Effect of Water Extract of Cynanchi Wilfordii Radix in RANKL-induced Osteoclast Differentiation)

  • 안용환;오재민;이명수;정종혁;채수욱;문서영;전병훈;최민규
    • 동의생리병리학회지
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    • 제26권2호
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    • pp.160-165
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    • 2012
  • Osteoporotic fracture became a serious social problem, which related with mortality and morbidity in old age population. Osteoclast which is responsible for bone resorption is originated from hematopoietic cell line and plays a key role osteoporotic bone loss. Cynanchum wilfordii (Asclepiadaceae) roots have been used in Korean folk medicine for the treatment of diabetes mellitus and aging progression. Also, recent studies have shown that the extract and fractions of Cynanchi Wilfordii Radix have various pharmacological actions including scavenging free radicals, enhancing immunity, reducing high serum cholesterol, and anti-tumor activity. However, the effect of extract of Cynanchi Wilfordii Radix in osteoclast differentiation had not been reported. Thus, we evaluated the effect of Cynanchi Wilfordii Radix on receptor activator of nuclear factor-${\kappa}B$ ligand (RANKL)-induced osteoclast differentiation. Through our study, we found that Cynanchi Wilfordii Radix significantly inhibited osteoclast differentiation induced by RANKL. Cynanchi Wilfordii Radix suppressed the activation of p38 pathway and $NF{\kappa}B$ in bone marrow macrophages (BMMs) treated with RANKL. Also, Cynanchi Wilfordii Radix significantly inhibited the mRNA expression of c-Fos, tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), osteoclast-associated receptor (OSCAR), nuclear factor of activated T cells (NFAT)c1 and cathepsin K in BMMs treated with RANKL. Particularly, Cynanchi Wilfordii Radix inhibited the protein expression of c-fos and NFATc1. Taken together, our results demonstrated that Cynanchi Wilfordii Radix may be useful treatment option of bone-related disease such as osteoporosis leads to fracture of bone and rheumatoid arthritis.

복분자 자죽염의 마우스 대식세포주 및 복강 대식세포에 대한 면역증진 효과 (Immunostimulatory Effects of Purple Bamboo Salts Composed with Rubus coreanus in Raw264.7 Cells and Mouse Peritoneal Macrophages)

  • 박희전;김석호;정소희;박희란;김진형;송지영
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제46권3호
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    • pp.306-313
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    • 2017
  • 본 연구에서는 전통적인 기능성 식품이자 의약품으로 사용되었던 자죽염(PubS)과 복분자를 조합한 복분자 자죽염(PuBS-R)을 사용해 비특이적, 선천성 면역에 중요한 역할을 하는 대식세포에서의 영향을 확인하였다. PuBS-R은 마우스 대식세포인 Raw264.7 세포에서 $1,000{\mu}g/mL$ 농도처리 시 세포의 증식을 유발하였으며, 그에 반해 PuBS를 $1,000{\mu}g/mL$ 처리 시 유의하게 세포 증식률이 억제되었다. 이어서 면역 관련 사이토카인 $TNF-{\alpha}$, $IFN-{\gamma}$, IL-12, IL-10 등을 유전자 단계와 단백질 단계에서 평가하였다. 그 결과 PuBS-R은 50, 100, $500{\mu}g/mL$에서 유의한 증가율을 보였고, 무엇보다 이것은 PuBS 군에 비해서도 월등한 증가율을 확인할 수 있었다. 마지막으로 마우스의 복강에서 분리한 peritoneal macrophage에 PuBS-R을 처리 후 $TNF-{\alpha}$, $IFN-{\gamma}$, IL-12, IL-10, iNOs를 단백질 단계에서 평가한 결과, Raw264.7 세포에서 얻은 결과와 동일한 결과를 확인할 수 있었다. 이러한 결과로 미루어 보아 PuBS-R은 인체의 대식세포 활성의 증가를 통해 비특이적, 선천성 면역력을 증가시킬 것으로 판단되며, 이러한 결과를 바탕으로 추후 실험동물을 이용한 in vivo 후속 연구를 통해 PuBS-R의 면역증강 기능성 식품 개발이 가능할 것으로 생각된다.

폐암의 유전자 치료법을 위한 암특이적인 PRC1 프로모터 (A Cancer-specific Promoter for Gene Therapy of Lung Cancer, Protein Regulator of Cytokinesis 1 (PRC1))

  • 조영화;윤혜진;권희충;김희종;조성하;강봉수;김연주;설원기;박기랑
    • 생명과학회지
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    • 제18권10호
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    • pp.1395-1399
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    • 2008
  • 우리는 최근에 PRC1 프로모터가 유방암 유전자치료를 위하여 전사 표적이 된 유전자의 발현을 조절할 수 있는 후보 프로모터임을 보고하였다. 우리는 본 실험에서 PRC1이 폐암유전자 치료에서도 적용이 가능한지 조사하였다. 특정 프로모터가 루시퍼라제 유전자와 연결된 플라스미드를 이용한 형질전환 assay에서 PRC1 프로모터는 정상폐세포주에서는 활성을 보이지 않으나 폐암세포주에선 약 30 배의 활성을 보였다. 이는 이미 암특이적인 발현으로 알려진 BIRC5 (survivin) 프로모터와 유사한 결과였다. 또한, 바이러스 벡터를 이용한 실험에서 PRC1은 CMV 프로모터에 비해 아데노부속바이러스에서 약 75%, 아데노바이러스에서 약 66%의활성을 보였다. 이와 대조적으로, PRC1 프로모터를 함유한 이 들 두 종류의 바이러스는 정상 폐세포에서는 20%정도의 낮은 활성을 보였다. 흥미롭게도, 인간 폐종양세포를 이식한 생쥐모델을 사용한 결과에서는 PRC1 프로모터가 CMV 프로모터와 비슷한 생체 활성을 보였다. 종합하면, 이상의 결과는 PRC1이 폐암 유전자치료를 위한 전사표적 유전자의 발현을 위한 프로모터로 사용 가능함을 암시한다.

$Genistein-4'-O-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl-(1-2)-{\beta}-D-glucopyranoside$의 RAW 264.7 세포에서 $NF-{\kappa}B$ 불활성화를 통한 LPS에 의해 유도되는 iNOS, COX-2 그리고 cytokine들의 발현 저해효과 (Inhibition of LPS Induced iNOS, COX-2 and Cytokines Expression by $Genistein-4'-O-{\alpha}-L-Rhamnopyranosyl-(1-2)-{\beta}-D-Glucopyranoside$ through the $NF-{\kappa}B$ Inactivation in RAW 264.7 Cells)

  • 박승재;김지연;장영표;조영욱;안은미;백남인;이경태
    • 생약학회지
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    • 제38권4호
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    • pp.339-348
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    • 2007
  • This study were designed to evaluate the anti-inflammatory effects of $genistein-4'-O-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl-(1-2)-{\beta}-D-glucopyranoside$ (GRG) isolated from Sophora japonica (Leguminosae) on the lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) and prostaglandin ($PGE_2$) production by RAW 264.7 cell line. GRG significantly inhibited the LPS-induced NO and $PGE_2$ production. Consistent with these observations, GRG reduced the LPS-induced expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) at the protein and mRNA levels in a concentration-dependent manner. In addition, the release and the mRNA expression levels of tumor necrosis $factor-{\alpha}\;(TNF-{\alpha})$ and interleukin-6 (IL-6) were also reduced by GRG. Moreover, GRG attenuated the LPS-induced activation of nuclear factor-kappa B ($NF-{\kappa}B$), a transcription factor necessary for pro-inflammatory mediators, iNOS, COX-2, $TNF-{\alpha}$ and IL-6 expression. These results suggest that the down regulation of iNOS, COX-2, $TNF-{\alpha}$, and IL-6 expression by GRG are achieved by the downregulation of $NF-{\kappa}B$ activity, and that is also responsible for its anti-inflammatory effects.

Effects of 7-MEGATM 500 on Oxidative Stress, Inflammation, and Skin Regeneration in H2O2-Treated Skin Cells

  • Song, In-Bong;Gu, Hyejung;Han, Hye-Ju;Lee, Na-Young;Cha, Ji-Yun;Son, Yeon-Kyong;Kwon, Jungkee
    • Toxicological Research
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    • 제34권2호
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    • pp.103-110
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    • 2018
  • Environmental stimuli can lead to the excessive accumulation of reactive oxygen species (ROS), which is one of the risk factors for premature skin aging. Here, we investigated the protective effects of $7-MEGA^{TM}$ 500 (50% palmitoleic acid, 7-MEGA) against oxidative stress-induced cellular damage and its underlying therapeutic mechanisms in the HaCaT human skin keratinocyte cell line (HaCaT cells). Our results showed that treatment with 7-MEGA prior to hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced damage significantly increased the viability of HaCaT cells. 7-MEGA effectively attenuated generation of $H_2O_2$-induced reactive oxygen species (ROS), and inhibited $H_2O_2$-induced inflammatory factors, such as prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$), tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$), and $interleukin-1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$). In addition, cells treated with 7-MEGA exhibited significantly decreased expression of matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) and increased expression of procollagen type 1 (PCOL1) and Elastin against oxidative stress by $H_2O_2$. Interestingly, these protective activities of 7-MEGA were similar in scope and of a higher magnitude than those seen with 98.5% palmitoleic acid (PA) obtained from Sigma when given at the same concentration (100 nL/mL). According to our data, 7-MEGA is able to protect HaCaT cells from $H_2O_2$-induced damage through inhibiting cellular oxidative stress and inflammation. Moreover, 7-MEGA may affect skin elasticity maintenance and improve skin wrinkles. These findings indicate that 7-MEGA may be useful as a food supplement for skin health.

사군자탕(四君子湯)의 항염증 효능 연구 (Anti-inflammatory activities of Sagunja-tang(Sijunzi-tang))

  • 이진아;하혜경;정다영;이호영;이남헌;이준경;서창섭;김정훈;이미영;신현규
    • 대한한의학방제학회지
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    • 제18권1호
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    • pp.87-94
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    • 2010
  • Objectives : To provide the information of efficacy for Sagunja-tang (Sijunzi-tang; SG), it was evaluated the anti-inflammatory effect. SG, a widely used herbal formula in tranditional Korean medicine, has been used to treat for the Boki-invigorating. In many studies, plant-derived anti-inflammatory efficacies have been investigated for their potential inhibitory effects on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophages. This study was performed to examine the anti-inflammatory effects of SG extract on LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Methods : The productions of nitric oxide (NO), prostaglandin (PG)$E_2$, interleukin (IL)-6 and tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ were examined in a macrophage cell line, RAW 264.7 cells, in the presence of the SG extract. RAW 264.7 cells were incubated with LPS $1\;{\mu}g/mL$ and SG extract for 18 hours. The anti-inflammatory activity of SG was investigated by carrageenin-induced paw edema in rats. The paw volume was measured at 0, 2 and 4 hours following carrageenin-induced paw edema in rats. Results : SG extract showed inhibitory effect on $PGE_2$, IL-6 and TNF-$\alpha$ by LPS-stimulated RAW 264.7 cells. But SG extract was not inhibitory effect on NO by LPS-stimulated RAW 264.7 cells. And administration of SG extract (1 g/kg) showed a reduction in carrageenin-induced paw edema on rats. Conclusions : These results suggest that SG extract has anti-inflammatory activities in vitro and in vivo models.

Elevated Prx1 Provides Resistance to Docetaxel, But Is Not Associated with Predictive Significance in Lung Cancer

  • Hwang, Ki Eun;Park, Chul;Seol, Chang Hwan;Hwang, Yu Ri;Hwang, June Seong;Jung, Jae Wan;Choi, Keum Ha;Jeong, Eun Taik;Kim, Hak Ryul
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제75권2호
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    • pp.59-66
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    • 2013
  • Background: This study was conducted in order to elucidate the effects of docetaxel on the growth of peroxiredoxin 1 (Prx1) knockdown A549 xenograft tumors and further tested the role of Prx1 as a predictor for how a patient would respond to docetaxel treatment. Methods: Effects of docetaxel on the growth of scrambled- and shPrx1-infected A549 xenograft tumors in nude mice were measured. Moreover, immunohistochemical expression of Prx1 was evaluated in paraffin-embedded tissues from 24 non-small cell lung cancer patients who had received docetaxel-cisplatin regimens as a first-line treatment. Results: Docetaxel treatment in Prx1 knockdown xenograft tumor resulted in reduced tumors growth compared with other groups. Prx1 knockdown increased the production of cleaved caspases-8 and -9 in the control itself compared to scramble tumors. Moreover, docetaxel treatment in Prx1 knockdown tissue led to an increased protein band. Phosphorylated Akt was found in Prx1 scramble tissues. Phosphorylated FOXO1 was detected in the docetaxel treatment group. On the other hand, Prx1 knockdown completely suppressed the Akt-FOXO1 axis. The median progression-free survival (PFS) of patients with low Prx1 expression was 7 months (95% confidence interval [CI], 6.0-7.7), whereas the median progression-free survival of patients with high Prx1 expression was 4 months (95% CI, 4.0-5.0). However, high Prx1 expression was not associated with decreased PFS (p=0.114). Conclusion: Our findings suggest that elevated Prx1 provides resistance to docetaxel treatment through suppression of FOXO1-induced apoptosis in A549 xenograft tumors, but may not be related with the predictive significance for response to docetaxel treatment.