• Journal of Plant Biology
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• 제33권3호
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• pp.183-188
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• 1990

Induction and culture of hairy roots by Agrobacterium rhizogenes A4 were carried out in Platycodon grandiflorum DC. After 2-4 weeks of inoculation with Agrobacterium rhizogenes hairy roots were formed at root segments in the balloon flower. Optimized growth of hairy roots was obtained in hormone-free MS medium, 6% sucrose and pH 5.8. The pattern of ginsenoside in the transformed roots was not different with that in the ordinary roots.

• Journal of Photoscience
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• 제8권1호
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• pp.19-22
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• 2001

It was reported that Red ginseng contains specific ginsenoside-Rg$_2$,-Rg$_3$,-Rh$_1$and -Rh$_2$, which show various pharmacological effects. However, production of these specific ginsenosides from Red ginseng is not commercially applicable because of high cost of the raw material, roots. This work was carried out to examine the production of Red ginseng specific ginsenosides from Agrobacterium-transformed hairy roots. Hairy roots were induced from 3 year-old root segment of Korean ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) after infection with Agrobacterium rhizogenes A4. Among many lines of hairybroots, KGHR-8A was selected. Steam heat treatment of hairy roots was resulted in the changes of ginsenoside composition. Eleven ginsenosides were detected in heat-treated hairy roots but eight in freeze dried hairy roots. In heat treated hairy root, content of ginsenoside-Rb$_1$,Rb$_2$,Rc, Rd, Re, Rf, and Rg$_1$were decreased compared to those of freeze dried hairy roots. However, heat treatment strongly enhanced the amount of Red ginseng specific ginsenogides (ginsenoside-Rg$_2$,-Rg$_3$,-Rh$_1$and -Rh$_2$). Amounts of ginsenoside-Rg$_3$,-Rh$_1$and -Rh$_2$ in heat-treated hairy roots were 2.58, 3.62 and 1.08 mg/g dry wt, respectively, but these were detected as trace amount in hairy roots without heat treatment. Optimum condition of heat treatment for the production of Red ginseng specific ginsenoside was 2 h at 105$^{\circ}C$. This result represents that Red ginseng specific ginsenoside can be producted from hairy roots by steam heat treatment.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제11권2호
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• pp.105-109
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• 2006

A transformed hairy root clone of Scutellaria baicalensis was established following infection with Agrobacterium rhizogenes ATCC15834. Three root clones of S baicalensis were selected by growth habit and baicalin content. The most active strain-the SR-03 clone-was examined for its growth and baicalin content under various culture conditions. The root growth and baicalin content were maximized in a Schenk and Hildebrandt medium supplemented with 4 and 6% sucrose, respectively. The accumulation of baicalin in transformed hairy roots was enhanced through exposure to various elicitors. Elicitation was attained by the addition of methyl jasmonate, salicylic acid, and various concentrations of fungal cell wall elicitors to the medium. The accumulation of baicalin in the elicited cultures ranged from 10.5 to 18.3 mg/g dry weight of the roots, which was 1.5- to 3-fold the amount attained in controls.

• KSBB Journal
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• 제4권3호
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• pp.246-253
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• 1989

Agorobacterium rhizogenes에 의하여 유도된 당근(Daucus carota L. )의 hairy root를 배양하였으며 opine 유무에 대한 형질전환 확인 및 배지조성을 달리하여 성장률에 따른 색소함량을 비교하였고, 재분화된 식물체의 형태적 차이를 관찰하여 몇가지 결론을 얻었다. Hairy root는 균 접종 2-4주 후에 형성층 부위를 중심으로 유도되었다. 유도된 hairy root의 초기 배양에는 R.C.M 배지가 적합하였으며 MSO(2, 4-D $10^{-4} ml/ l, pH6, sucrose 5%, 질소원 0.03M 등)에서 최대 성장을 보여주었고 성장의 증가에 따른 색소의 형성은 비교적 안정하였다. 재분화된 식물체는 정상 식물체에 비하여 형태적으로 차이를 나타내었으며 형질전환된 hairy root 및 재분화된 식물체에서 mannopine 분석으로 Ri-plasmid에 의한 형질전환이 이루어졌음을 확인하였다.

• 한국약용작물학회지
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• 제14권1호
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• pp.31-35
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• 2006

Agrobacterium rhizogenes ATCC15834에 의해 형질전환된 지황 (Rehmannia glutinosa)의 모상근으로부터 유식물체를 재분화 시키기 위한 최적 조건을 탐색하였다. 모상근 절편으로부터 유식물체의 재분화는 0.5 mg/l BA가 첨가된 SH배지 (3% sucrose, pH 5.8)에서 배양 5주 후 이루어졌다. 이와 같은 유식물체는 식물생장조절물질이 포함되지 않은 기본배지로 옮겼을 때 발근이 이루어졌다. 형질전환된 모상근 유래 식물체는 잎으로부터 직접 재분화된 식물체와 비교했을 때 잎이 오므라드는 경향을 보였고 줄기는 절간이 짧았으며, 뿌리는 가늘고 수량이 많은 특징을 보였다. 생체량 비교에서 형질전환식물체는 식물 하나의 무게가 1.28 g (생중량)으로 대조구인 잎 유래 재분화식물체 (0.53 g)에 비해 높았으며, 지표물질인 catalpol의 함량에 있어서도 차이를 보여주었다.

• KSBB Journal
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• 제9권2호
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• pp.157-164
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• 1994

인삼의 잎, 줄기, 뿌리 절편에 Agrobatriumrhizogenes(stain $A_4$를 접종하여 형질이 전환된 조직(모상근)을 유도, 배양한 후 saponin 고생산능 clones을 선발하였으며, 아울러 형질전환 여부를 dot blot hybridization 과 opine 분석으로 확인하였다. 여러 부위에서 유도된 모상근은 모두 암조건의 MS 배지에서 활발히 생장하였으며, 이들 중 HB3 clone을 이용하여 동질화딘 모상근 clon으로 배양한 후 saponin 고생산능 clon을 선발한 결과 HB2-10 clone이 최대의 생장을 보였으며 총 saponin함량은 0.55wt%로 나타났다. 그러나 총 saponin함량이 가장 높은 clone은 비교적 생장이 느린 HB3-2 clone이었으며 0.74wt%의 함량을 나타내었다. 아울러 dot blot hybridization 결과 Ri-T-DNA가 식물체의genome 내로 삽입되어 있었으며, opine확인결과 모든 모상근 clone으로부터 argropine과 mannopine이 검출되었다.

• Journal of Plant Biology
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• 제35권1호
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• pp.37-43
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• 1992

A. rhizogenes A4 균주를 접종하여 청피홍심무우(Raphanus sativus cv. Chungpihongsim)의 모상근 배양을 확립하였다. 형질전환된 뿌리는 MS 배지의 기본염을 1/2로 희석하고, pH는 5.2, sucrose는 3%로 조정한 배양조건에서 최적성장을 보였다. 형질전환된 조직에서 합성되는 물질인 opine, 즉 agropine과 mannopine이 모상근의 추출액에서 검출되었다. 배지에 2, 4-D와 Kinetin이 첨가될 경우 모상근의 탈분화와 더불어 세포내에 안토시아닌의 합성이 유도되었으며, 그 중 2, 4-D $0.45\;\mu\textrm{M}$과 kinetin $2.3\;\mu\textrm{M}$의 첨가에서 최대의 색소 축적능을 보였다. 모상근의 탈분화와 함께 유도되는 안토시아닌의 paper chromatography 전개양상은 경작뿌리에서 추출한 색소에 비하여 다소 차이를 보였지만 모든 안토시아닌의 aglycone은 pelargonidin으로 확인되었다. 이러한 시료의 총 안토시아닌 함량은 0.49 mg/g(f.w.)로 계산되었다.

• 한국약용작물학회지
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• 제15권1호
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• pp.46-50
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• 2007

하늘타리 (Trichosanthes kirilowii)로부터 조직배양 기법을 이용하여 약리작용을 나타내는 생리활성물질인 trichosantin을 생산하기 위한 연구로 Agrobacterium rhizogenes ATCC15834 의 감염을 통하여 기내 배양된 유묘의 잎절편으로부터 형질전환 모상근을 유도하였다. 유도된 모상근 clones으로부터 성장속도와 분지화 정도가 빠르며 단백질 합성능이 가장 우수한 TR-03 clones을 선발하였으며, 이를 사용하여 생체량과 배지내 가용성 단백질의 생산을 최대로 높일 수 있는 최적 배양조건을 조사하였다. TR-03 clone을 4% sucrose가 첨가된 MS 배지에 초기 접종농도 2 g (생중량)을 접종하여 100 rpm으로 배양시 생중량과 배지내 가용성 총단백질의 함량이 플라스크당 약 2.4 g (건중량)과 $28.3ug/\ell$으로 최대치를 나타내었다. 한편, 배지내 가용성 단백질에 대한 RIP활성 검정에서 배양 4주 후 21.3 unit로 최대치를 보였다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
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• pp.413-416
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• 2000

Panax ginseng hairy roots, transformed by Agrobacterium rhizogenes KTCT 2744, was incubated flask, and investigated its optimal growth conditions. Transformed P. ginseng hairy roots showed active branching pattern and fast growth at free-hormone medium. Optimal conditions of hairy roots showed maximum growth at $23^{\circ}C$, pH 5.8, 1/2 MS medium, 3% sucrose. Effects of combined sugar showed that it had a better growth at only sucrose without glucose or fructose than with glucose or fructose. Also the case of sucrose with glucose had a better growth than with fructose.

• KSBB Journal
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• 제5권3호
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• pp.207-214
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• 1990

Growth properties of carrot hairy roots transformed by Agrobacterium rhizogenes were compared in flask and bioreactor. Oxygen transfer coefficient KLa was measured during the cultivation in bioreactor. In flask cultures, initially sucrose 30g/l was nearly exhausted after 20days. pH was dropped from initially 5.8 to 4.79 after 4 days, but it is stable after that time. Finally, after 28 days, hairy roots were grown about twelve times. In view of the results studied optimum conditions, hairy roots were maintained high growth rates in sucrose 50g/l, pH 5.8, total nitrogen 60mM. Also in bioreactor cultures, fixed stainless sieve in bottom and aerated 0.31 vvm, the results of cultivation by the use of sucrose 50g/l had grown about twenty-eight times and pH variations were liked in flask. As a results, growth rate of 1.756g fresh weight/day/g inoculum in bioreactor were higher about three times than 0.57g fresh weight/day/g inoculum in flask culture. KLa values were showed a tendency to decrease from 0.209 min-1 to 0.068 min-1.