이번 연구는 토마토잎곰팡이병 및 점무늬병에 대한 방제력을 개발하고, 온도와 잎의 결로시간에 따른 발생정도를 평가하기 위해 수행되었습니다. 첫 번째 병발생 예측 실험에서는 토마토묘에 Fulvia fulva, Stemphylium lycopersici 분생포자를 각각 1 × 104 conidia·mL-1로 접종시키고 10-25℃(F. fulva) 및 10-30℃(S. lycopersici)에서 0-18시간 동안 이슬생육상에 두었다. 살균제를 이용한 방제 연구에서는 잎곰팡이병 방제를 위하여 트리미다졸, 폴리옥신 B, 이미녹타딘 트리스(Belkut)를 처리하였으며 점무늬병 방제를 위하여서는 에트리디아졸 + 티오파네이트(가지란)과 삼염기 황산구리(세빈나)를 처리하였다. 엽결로시간이 9시간 이상에서 잎곰팡이와 점무니병이 발생하였으며 결로시간이 길어질수록 병발생률이 높았다. 잎곰팡이병의 발생률은 20℃와 15℃에서 더 높았고, 점무늬병은 25℃와 20℃에서 발병률이 증가하였다. 포자 접종 14일 후에 잎곰팡이병 및 점무늬병이 발생하였으며 잠복기는 14-15일로 추정되었다. 잎곰팡이 및 점무늬병 포자가 처리된 식물체에 접종 후 0시간부터 240시까지 살균제 처리를 한 결과 살균제 종류와 상관없이 일찍 약제를 처리한 식물체에서 방제가가 높았으며 150시간이 지난 처리에서는 방제가가 급격히 떨어졌다. 이번연구에서 개발된 병예측모델과 방제력은 토마토의 잎곰팡이병과 점무늬병을 적기에 방제하고 효과적으로 관리하는 데 도움이 될 수 있을 것이다.
During 2002-2008 in Korea, 455 extracts from myxobacteria consisting of 318 cellulolytic and 137 bacteriolytic myxobacteria were isolated, which were then screened for antifungal activity against the phytopathogens Botrytis cinerea, Colletotrichum acutatum, Penicillium sp., Pyricularia grisea, and Phytophthora capsici. 204 isolates had antifungal activity, causing both a clear zone due to blocked spore germination and inhibition of mycelial growth; most (199) were from cellulolytic (Sorangium cellulosum) and only five were from bacteriolytic myxobacteria. B. cinerea, the best controlled among the five tested pathogens, had a unique group of antifungal isolates of myxobacterial extracts compared to the other pathogens' groups. Among seventy-nine bioactive myxobacteria, four isolates, KYC 3130, KYC 3247, KYC 3248 and KYC 3270, were selected and all were cellulolytic. Liquid culture filtrates of these four myxobacteria were applied to tomato, cherry tomato, strawberry, and kiwi fruits 5 h before inoculation with gray mold conidia; then the treated fruits were placed in an airtight container and the experiment was repeated six to eight times. Incidence (%) of gray mold on fruit of the infected control treatment was 84-98%, whereas it was only 5-21% after the KYC 3270 treatment. After KYC 3270 treatment of the four fruits, mold control was 79-95%, which was highest among the filtrates and statistically the same as treatment with fludioxonil, a registered chemical against gray mold of stored fruits.
국내에서 생산하는 과채류에서 발생되는 잿빛곰팡이병은 명확한 생물학적 방제 방법으로 제시된 바가 없는 실정이다. 국내에서 사용 및 개발되고 있는 화학적 방제 약제의 경우 약제저항성 병원균의 출현이 지속되고 있는 상황이다. 또한 임의 기생성으로 인해 기주의 여부에 상관 없이 생존이 가능하므로 경종적 방제 또한 어려운 실정이다. 이에 본 연구에서는 토마토 꽃에 정착력이 우수한 길항미생물을 선발하기 위해 시설재배지의 토마토 화기와 벌집 시료로 미생물을 분리하여 방제균을 선발하였다. 총 6개월의 토마토 재배기간 중 꽃에서 1,004개 균주, 벌집에서 925균주를 분리하여, 잿빛곰팡이 병원균을 억제력이 우수한 6균주를 선발하였다. 선발된 6균주는 잿빛곰팡이 병원균에 대한 항균활성이 우수할 뿐 아니라, cellulase와 protease의 활성 또한 우수한 것으로 검증되었다. 선발된 균주는 Paenibacillus polymyxa 로 동정 되었으며, 토마토의 잿빛곰팡이 발병률을 약 75% 감소시키는 효과를 나타내었다.
가지에서 분리한 F. equiseti FO-68균주와 벗풀에서 분리한 Fusarium sp. FO-510균주로부터 항균물질을 분리한 후 이들의 식물병원곰팡이에 대한 항균활성을 in vitro및 in vivo에서 조사하였다. FO-68균주의 쌀배양체로부터 하나의 항생물질을 순화하였는데 , 이 물질은 equisetin이라는 물질로 동정되었다. 그리고 FO-510균주의 쌀배양체로부터는 두 개의 항균활성 물질을 분리하였는데, 이들은 zearalenone과 8'-hydroxyzearalenone으로 동정되었다. Equisetin과 zearalenone은 in vitro에서 실험한 식물병원곰팡이 대부분에 대해서 높은 항균활성을 보였지만, 8'-hydroxyzearalenone은 거의 항균활성이 없었다. In vivo assay에서 equisetin은 토마토ㆍ잿빛곰팡이병과 토마토ㆍ역병에 방제효과가 컸으며, zearalenone은 벼ㆍ도열병, 벼ㆍ잎집무의마름병, 토마토ㆍ잿빛곰팡이병 및 토마토ㆍ역병에 대하여 효과를 나타내었다. 하지만 8'-hydroxyzearalenone는 토마토ㆍ잿빛곰팡이병을 제외한 나머지 식물병의 발생은 억제하지 못했다. Equisetin, zearalenone 및 8'-hydroxyzearalenone의 항진균활성은 본 논문에서 처음으로 보고하는 바이다.
Botrytis cinerea, a major phytopathogenic fungus, has been reported to infect more than 200 crop species worldwide, and it causes massive losses in yield. The aim of this study was to evaluate the inhibitory abilities and effects of Bacillus amyloliquefaciens RS-25, Bacillus licheniformis MG-4, Bacillus subtilis Z-14, and Bacillus subtilis Pnf-4 and their culture filtrates and extracts against the gray mold caused by B. cinerea on postharvest tomato, strawberry, and grapefruit. The results revealed that the cells of Z-14, culture filtrate of RS-25, and cells of Z-14 showed the strongest biocontrol activity against the gray mold on the strawberry, grape, and tomato fruit, respectively. All the strains produced volatile organic compounds (VOCs), and the VOCs of Pnf-4 displayed the highest inhibition values. Based on headspace solid-phase microextraction in combination with gas chromatography-mass spectrometry, esters accounted for the largest percentage of the VOCs produced by RS-25, MG-4, Z-14, and Pnf-4 (36.80%, 29.58%, 30.78%, and 36.26%, respectively). All the strains showed potent cellulase and protease activities, but no chitinase activity. RS-25, Z-14, and MG-4, but not Pnf-4, grew on chrome azurol S agar, and an orange halo was formed around the colonies. All the strains showed biofilm formation, fruit colonization, and lipopeptide production, which may be the main modes of action of the antagonists against B. cinerea on the fruit. This study provides the basis for developing natural biocontrol agents against the gray mold caused by B. cinerea on postharvest fruit.
Methanol extracts of fresh materials of 57 plants were screened for in vivo antifungal activity against Magna-porthe grisea, Corticium sasaki, Botrytis cinerea, Phyto-phthora infestans, Puccinia recondita, and Blumeria graminis f. sp. hordei. Among them, seven plant extracts showed disease-control efficacy of more than 90% against at least one of six plant diseases. None of the plant extracts was highly active against tomato gray mold. The methanol extracts of Chloranthus japonicus (roots) (CjR) and Paulownia coreana (stems) (PcS) displayed the highest antifungal activity; the CjR extract controlled the development of rice blast, rice sheath blight, and wheat leaf rust more than 90%, and tomato gray mold and tomato late blight more than 80%. The PcS extract displayed control values of more than 90 % against rice blast, wheat leaf rust, and barley powdery mildew and more than 80% against tomato gray mold. The extract of PcS also had a curative activity against rice sheath blight and that of CjR had a little curative activity against rice blast. On the other hand, the extract of Rumex acetocella roots reduced specifically the development of barley powdery mildew. Further studies on the characterization of antifungal substances in antifungal plant extracts are underway and their disease-control efficacy should be examined under greenhouse and field conditions.
Because bacterial isolates from only a few genera have been developed commercially as biopesticides, discovery and characterization of novel bacterial strains will be a key to market expansion. Our previous screen using plant bioassays identified 24 novel biocontrol isolates representing 12 different genera. In this study, we characterized the 3 isolates showing the best biocontrol activities. The isolates were Pantoea dispersa WCU35, Proteus myxofaciens WCU244, and Exiguobacterium acetylicum WCU292 based on 16S rRNA sequence analysis. The isolates showed differential production of extracellular enzymes, antimicrobial activity against various fungal or bacterial plant pathogens, and induced systemic resistance activity against tomato gray mold disease caused by Botrytis cinerea. E. acetylicum WCU292 lacked strong in vitro antimicrobial activity against plant pathogens, but induced systemic resistance against tomato gray mold disease. These results confirm that the trait of biological control is found in a wide variety of bacterial genera.
Botrytis cinerea infects stems and leaves of greenhouse tomatoes and can cause serious economic losses. This study was conducted to develop environment-friendly control method against tomato gray mold. Antagonistic microorganisms (bacteria) were screened for control activity against Botrytis cinerea, both in vitro and in vivo, using stem sections. One hundred bacterial strains were isolated from the rhizospheric soil of various plants including tomato. These strains were screened for growth inhibition of Botrytis cinerea on agar plate by the dual culture and thirty strains showing strongly inhibitory effect against the pathogen were selected first. Among thirty strains, JB 5-12, JB 22-2, JB 22-3, U 4-8 and U46-6 reduced significantly disease incidence, when applied simultaneously with the pathogen. These results suggested that five antagonistic bacteria strains selected have the potential to control tomato gray mold in organic farming.
Yellow spot or blotch symptoms on the upper surface of leaf, without the production of velvet-like fungi on the lower surface of leaf as in the gray mold of tomato caused by Cladosporium fulvum, were observed in tomato (cv. Seokwang) plants in May, 1995, in a vinyl-house of the experimental plot of Gyeongnam Provincial Rural Development Administration, Chinju, Gyeongnam, Korea. We identified this disease as powdery mildew of tomato caused by Oidiopsis taurica (L v.) Arnaud (=Leveillula taurica), which was new to Korea. Conidia of the fungus were borne on uni- or bi-septated conidiophores which were developed through the stomata of the tomato leaf. The conidia were slender, clavate and variable in size (31~111.6$\times$13.1 ${\mu}{\textrm}{m}$). The fungal conidia isolated from tomato leaves were inoculated to tomato plants, and the occurrence of the same disease was confirmed based on the symptomatology and the morphology of the pathogen reisolated.
미생물제제의 토마토의 병 발생에 미치는 영향을 조사하고자 2010~2011년에 걸쳐 공주의 친환경 토마토 재배농가에서 현장실증시험을 수행하였다. 친환경 미생물제제로 시판되는 EXTN-1 액상수화제 등 2종의 미생물제제와 농과원에서 개발 중인 2종의 미생물을 토마토 정식시 점적관수 및 뿌리 관주처리와 착화 초기 4회 경엽처리한 후 생육과 병 발생 정도를 조사하였다. 2010년에는 잿빛곰팡이병에 대해 정식 3주 후 1주일 간격으로 EXTN-1 액상 수화제와 씰러스 액상수화제를 4회 처리한 경우 방제가가 59.6%, 50.5%로 가장 높았으며, 정식 4주 후 1주일 간격으로 EXTN-1 액상수화제를 3회 처리한 경우의 방제가는 55.4%였지만 모든 처리구에서 흰가루병에 대한 효과는 저조하였다. 2011년에는 잿빛곰팡이병에 대해 EXTN-1과 Bacillus subtilis strain B17을 정식시 점적관수와 2주 간격 관주처리 2회 및 착화 초부터 경엽처리 4회를 한 결과 방제가가 57.0%와 55.1%로 가장 높았으며, 흰가루병에 대해서는 EXTN-1과 Bacillus subtilis strain B4 및 B17을 잿빛곰팡이병의 경우와 동일하게 처리한 경우 방제가가 50.5, 51.3, 52.5%로 가장 높았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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