In this paper, mechanisms of gene editing technologies including ZFN, TALENS and CRISPR were briefly discussed with mutual advantages and disadvantages. Classification criteria of gene edited, site-directed mutagenesis (SDN) crops for regulatory purpose were also discussed. The number of studies using CRISPR technology was high and studies conducted on Arabidopsis thaliana and rice were highest, followed by tobacco, tomato, wheat, and corn. It has been applied to a variety of plants such as other grain crops, flower crops, vegetable crops, and fruit trees. The number of studies focused on practical application or commercialization in the future were also increasing yearly, and the scope of studies also expanded to include research on metabolic engineering for mass production of useful proteins or substances, development of disease resistant crops against viruses, bacteria, and fungi, abiotic environmental stressresistant crops, and increased yields. In addition to this, it was revealed that application range is becoming more diversified, including the development of parthenocarpic tomatoes, hybrid rice lines using male sterility and increased shattering resistance Brassica napus. It was also revealed that the number of CRISPR gene edited crops permitted by the USDA(APHIS) increases yearly, to be released in the international seed market soon.
An isolate of Cucumber mosaic cucumovirus(CMV) was isolated from Hydrangea macrophylla for. otaksa(Sieb. et Zucc. ) Wils. showing mosaic symptoms, and designated as Hm-CMV. Hm-CMV was characterized by the tests of host range, physical properties, serological properties, RNA and coat protein compositions, and reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis. Twelve species in 4 families were used in the host range test of Hm-CMV and could be differentiated from Y-CMV used as a control CMV by the ringspot and line pattern on inoculated leaves of several tobacco plants. Thevirus produced local lesions on inoculated leaves of Chenopodium amarticolor, C. quinoa and Vigna unguiculata. The physical properties of the virus were as follows; thermal inactivation point(TIP) was 60$\^{C}$, dilution end point (DEP) was 10$\^$-3/, and longevity in vitro (LIP) was 3∼4 days. Hm-CMV was serologically identical to Y-CMV. SDS-polyaciylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE) showed one major protein band of about 28 kDa. In RNA or dsRNA analysis, Hm-CMV consisted of four RNA or dsRNA species, but satellite RNA was not detected. In RT-PCR using CMV-common primer and CMV subgroup I-specific primer, bothe amplified expected size of about 490 bp and 200 bp DNA fragments from Hm-CMV, respectively. Restriction enzyme analysis of the 490 bp RT-PCR products using EcoR I and Msp I showed that Hm-CMV belonged to CMV subgroup I. However, Hm-CMV could be differentiated from other CMV subgroup I isolates by RNA fingerprinting by arbitrarily primed polymerase chain reaction (RAP-PCR).
Kim, Jeong-Soo;Lee, Su-Heon;Choi, Hong-Soo;Kim, Mi-Kyeong;Kwak, Hae-Ryun;Cho, Jeom-Deog;Choi, Gug-Seoun;Kim, Jin-Young
Research in Plant Disease
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v.15
no.1
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pp.1-7
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2009
Viruses diagnosed on crops including rice plants from farmers or agricultural extension agencies cover the country were 11 species including Broad bean wilt virus 2 (BBWV2) in 2008. Tomato spotted wilt virus (TSWV) was the most important virus having the detection rate of 22.9%. Two viruses of Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) and Tobacco leaf curl virus (TLCV) inducing leaf yellow and curl diseases on tomatoes were occurred newly with the detection rate of 12.2% and 4.0%, respectively, in 2008. Rice stripe virus (RSV) was occurred on 869.5 ha mainly at Jindo and Haenam areas in Jeollanamdo province. At Jindo area, 12 plots were damaged severely with the infected hill rate of 83.8%. At the main production area of oriental melon at Seongju, almost all fruits from whole sale market at Seongju were infected with Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV) as the detection rate of 87%. The areas occurred TSWV in Korea were 25 totally from 2003 including 7 areas newly reported in 2008 including Naju in Jeoallanamdo. TSWV could be reduced as 0.1 % from 5.3% by covering insect proof net in vinyl house after chemical soil sterilization. Tomato yellow leaf curl disease was occurred on April in 2008 at Tongyoung area in Kyeongsangnamdo, and detected continuously at 13 areas, 7 in Kyeongsangnamdo, 4 in Jeollabukdo and 2 in Jejudo. Potato spindle tuber viroid (PSTVd) was occurred abruptly in a confined space of a civil breeding greenhouse and a cultivar evaluation field followed by disuse 17.4 M/T of potato tubers. No PSTVd was detected at 17 fields cultivated the related potatoes to the bred company by RT-PCR.
Phytolalexins are produced in plants affected by various environmental factors such as fungal infection treatment with many chemicals and irradiation by ultraviolet light. When pepper and tobacco bel suspension cultures were grown on a basal MS medium supplemented with 2,4-D(1mg/$\ell$, benzyl adenine(0.001 mg/$\ell$) and 100$\mu$ M jasmonic acid, the production of capsidiol was observed. The total of compound found in pepper plant were around seventy and thirty of them were located intissue-specific manner. 1-propanethiol, $\alpha$-D-xylofuranoside, phenol, hexadecanonic acid ethyl tridecanoate, phytol, linoleic acid and capsidiol are those which have change the production level by treatments, such as the inoculation of Phytophthora capsici Leonian, the metalaxyl treatment and the UV-B irradiation, respectively. The content of capsidiol on inoculation of P. capsici with metalxyl suspension in soil were higher than those of P.capsici without metalaxyl. When the soil dernch of metalaxyl treatment (1$\mu\textrm{g}$/${mu}ell$)was delayed after inoculation, the content of capsidiol were higher than that of before. Irrradiated UB-B the production on capsidiol was identified only at leaf, and contents were the highest for 24 hrs incubation after 20 minutes irradiation.
Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV), a newly reported Geminivirus from tomato, generated recently large economic losses in Korea. Development of a fast and precise genetic diagnosis technique for detecting TYLCV which Agricultural research and extension services can utilize easy and handy is very important to prevent yield losses. Virion Capture (VC)/PCR is a simple, accurate and economical genetic detection method without any works or commercial kits for the extraction of the nucleic acid from the infected plants. Primers of twenty two for detection of TYLCV were designed and tested with extracted total DNA or crude sap from tomato leaf infected with TYLCV and healthy plant. Nine primers for total DNA using conventional PCR and another 9 primers for VC/PCR were selected eventually. Primers of six having same specificity were selected from the two methods and tested with other Geminivirus, Tobacco leaf curl virus (TLCV) by VC/PCR. Finally specific primers of four were selected for detection of TYLCV using VC/PCR, and Deng (540, 541), a degenerate primer for Geminivirus reported in 1996, was also developed for VC/PCR.
Lee, Jung Ro;Jung, Ji Hyun;Kang, Jae Sook;Kim, Jong Cheol;Jung, In Jung;Seok, Min Sook;Kim, Ji Hye;Kim, Woe Yeon;Kim, Min Gab;Kim, Jae-Yean;Lim, Chae Oh;Lee, Kyun Oh;Lee, Sang Yeol
Molecules and Cells
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v.23
no.2
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pp.161-169
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2007
We identified two alternatively spliced variants of the peroxisomal targeting signal 1 (PTS1) receptor protein Pex5ps in monocot (rice, wheat, and barley) but not in dicot (Arabidopsis and tobacco) plants. We characterized the molecular and functional differences between the rice (Oryza sativa) Pex5 splicing variants OsPex5pL and OsPex5pS. There is only a single-copy of OsPEX5 in the rice genome and RT-PCR analysis points to alternative splicing of the transcripts. Putative light-responsive cis-elements were identified in the 5' region flanking OsPEX5L and Northern blot analysis demonstrated that this region affected light-dependent expression of OsPEX5 transcription. Using the pex5-deficient yeast mutant Scpex5, we showed that OsPex5pL and OsPex5pS are able to restore translocation of a model PTS1 protein (GFP-SKL) into peroxisomes. OsPex5pL and OsPex5pS formed homo-complexes via specific interaction domains, and interacted with each other and OsPex14p to form hetero-complexes. Although overexpression of OsPex5pL in the Arabidopsis pex5 mutant (Atpex5) rescued the mutant phenotype, overexpression of OsPex5pS only resulted in partial recovery.
Choi, Yeon Hee;Lee, Jun Seung;Yun, Sora;Baik, Hyung Suk
Journal of Life Science
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v.25
no.2
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pp.136-150
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2015
Pseudomonas syringae pathovar tabaci is a plant pathogenic bacterium that causes wildfire disease in tobacco plants. In P. syringae pv. tabaci, PsyI, a LuxI-type protein, acts as an AHL synthase, while primary and secondary sequence analysis of PsyR has revealed that it is a homolog of the LuxR-type transcriptional regulator that responds to AHL molecules. In this study, using phenotypic and genetic analyses in P. syringae pv. tabaci, we show the effect of PsyR protein as a quorum-sensing (QS) transcriptional regulator. Regulatory effects of PsyR on swarming motility and production of siderophores, tabtoxin, and N-acyl homoserine lactones were examined via phenotypic assays, and confirmed by quantitative real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (qRT-PCR). Further qRT-PCR showed that PsyR regulates expression of these virulence genes in response to environmental signals. However, an upstream region of the gene was not bound with purified MBP-PsyR protein; rather, PsyR was only able to shift the upstream region of psyI. These results suggested that PsyR may be indirectly controlled via intermediate-regulatory systems and that auto-regulation by PsyR does not occur.
Protein phosphorylation is one of the major mechanisms by which eukaryotic cells transduce extracellular signals into intracellular responses. Calcium/calmodulin ($Ca^{2+}/CaM$)-dependent protein phosphorylation has been implicated in various cellular processes, yet little is known about $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinases (CaMKs) in plants. From an Arabidopsis expression library screen using a horseradish peroxidase-conjugated soybean calmodulin isoform (SCaM-1) as a probe, we isolated a full-length cDNA clone that encodes AtCK (Arabidopsis thaliana calcium/calmodulin-dependent protein kinase). The predicted structure of AtCK contains a serine/threonine protein kinase catalytic domain followed by a putative calmodulin-binding domain and a putative $Ca^{2+}$-binding domain. Recombinant AtCK was expressed in E. coli and bound to calmodulin in a $Ca^{2+}$-dependent manner. The ability of CaM to bind to AtCK was confirmed by gel mobility shift and competition assays. AtCK exhibited its highest levels of autophosphorylation in the presence of 3 mM $Mn^{2+}$. The phosphorylation of myelin basic protein (MBP) by AtCK was enhanced when AtCK was under the control of calcium-bound CaM, as previously observed for other $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinases. In contrast to maize and tobacco CCaMKs (calcium and $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinase), increasing the concentration of calmodulin to more than $3{\mu}M$ suppressed the phosphorylation activity of AtCK. Taken together our results indicate that AtCK is a novel Arabidopsis $Ca^{2+}/CaM$-dependent protein kinase which is presumably involved in CaM-mediated signaling.
Kim, Jeong-Hwan;Byeon, Young-Woong;Kim, Hwang-Yong;Park, Chang-Gyu;Choi, Man-Young;Han, Man-Jong
Korean journal of applied entomology
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v.49
no.4
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pp.385-391
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2010
This study reports the results of natural enemy application against four insect pests on greenhouse sweet pepper in winter cropping system. Orius laevigatus ($3.3/m^2$) was released at two different times (Nov. 2005 & Feb. 2006) to control Frankliniella occidentalis, western flower thrips (WFT). Throughout the cropping season, the lowest level recorded of WFT was less than 2.0 individuals per yellow sticky trap. Amblyseius swirskii ($232.3/m^2$) was released four times (Nov. 2007 ~ Aug. 2008) to control Bemisia tabaci, tobacco whitefly (TWF). Until July 2008, TWF population had been suppressed lower than 6.6/trap. Phytoseiulus persimilis ($44.5/m^2$) was released seven times (Apr. 2008 ~ Aug. 2008) to control Tetranychus kanzawai, tea red spider mite (TRSM). As a result, TRSM population was suppressed lower than 1.7/1eaf. To control aphids, Aphidius colemani ($9.5/m^2$) was released seven times (Oct. 2004 ~ Jan. 2005), with the transplantation of banker plants ($5.5pot/660m^2$). As a whole, aphid's population has been successfully reduced to less than 2.0/leaf.
Allelopathic effects on some crops(rice, barley, wheat, Chinese cabbage, leaf mustard, onion, welsh onion, tobacco, red pepper) for extracts of Phytolacca americana and Armoracia rusticana were investigated in MS solid medium. Germination percentage, radicle length, hypocotyl length, plant height, fresh weight, dry weight, and seedling vigor were rapidly inhibited by methanol extract from Phytolacca americana according to increase of the concentration in test plants. Autotoxicity of Phytolacca americana began to appear at concentrations greater than 50$\mu$l methanol extracts per 20ml medium. The fresh weight and dry weight of Phytolacca americana were also decreased by its own methanol extract according to increase of the concentration. Initial amounts of growth of all crops were also inhibited by methanol extracts from Armoracia rusticana, but the inhibitory effects were lowered than those of methanol extracts of Phytolacca americana. Of four fractions, ethyl acetate, petroleum ether, $1^{st}H_2O, 2^{nd}H_2O$, reextracted from methanol extracts of Phytolacca americana, the ethyl acetate fraction showed the highest allelopathic effects on germination percentage and initial amounts of growth. Chlorophyll contents of rice, barley and Chinese cabbage were more inhibited in the ethyl acetate fraction than in the other fractions. Free proline content of Chinese cabbage was increased 31.2 times in the 100$\mu l$ ethyl acetate fraction, and the contents of rice and barley were also increased according to concentration levels in the ethyl acetate fraction.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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