Interleukin-18 (IL-18), otherwise known as interferon-gamma-inducing factor (IGIF), is one of several well characterized and important cytokines that contribute to host defenses. The complementary DNA (cDNA) of mature human interleukin-18 gene (hIL-18) was fused with the signal peptide of the rice amylase 1A gene (Ramy1A) and introduced into the plant expression vector under the control of a duplicated CaMV 35S promoter. The recombinant plasmid was transformed into tobacco (Nicotiana tabacum L. cv Havana) using the Agrobacterium-mediated transformation method. The integration of the hlL-18 gene into the genome of transgenic tobacco plants was confirmed by polymerase chain reaction (PCR) amplification and its expression was observed in the suspension cells that were derived from the transgenic plant callus by using Northern blot analysis. The hlL-18 protein was detected in the extracts of the transgenic callus and in the medium of the transgenic tobacco suspension culture by using immunoblot analysis. Based upon enzyme-linked immunosorbant assay (ELISA) results, the expression level of the hlL-18 protein approximated $166{\mu}g/L$ in the suspension culture medium. Bioassay results from the induction of $interferon-{\gamma}$ from a KG-1 cell line indicated that the hlL-18 secreted into the suspension culture medium was bioactive.
This study was conducted to obtain the breeding information for the leaf breakdown, and correlation coefficients between leaf breakdown and some agronomic characters in flue-cured tobacco at Taegu Experiment Station, Korea Ginseng & Tobacco Research Institute. NC 95 and NC 2326 were used as parents. The bulk method procedure was used from the F2 to the F4 generations, 54 plants were selected among F4, and 11 lines were selected among 54 F5 which based on high resistance to bacterial wilt compared with NC2326. The entries were composed of parents and 11 F6 advanced lines, and designed in randomized block with 3 replications. Plant seedlings were transplanted in 16 April. The number of breakdown leaf were investigated at flowering stage, 18 June. There were significant difference between NC 95 and NC 2326 for the number of breakdown leaf, number and weight of ground suckers, days to flower, yield and resistance to bacterial wilt, and similar results were appeared among lines. Estimated heritability in the broad-sense ranged from 59.3% to 87.4% for all characters. Most of genetic correlations were higher than phenotypic coefficients between characters. Number of breakdown leaf was positively correlated with days to flower, the number and weight of ground suckers, while it was negative to yield. One line among 11 had few breakdown leaf, low producted ground suckers and high resistance to bacterial wilt. Above results suggest that the number and weight of ground suckers can be use as a selection criterion for leaf breakdown even under the condition without leaf breakdown.
Tobacco, which has nicotine for its main component, has been in medical use for a long time and in great demand for smoking throughout the world. The purpose of this study is to control nicotine amount and to increase yield more efficiently by the method of systematic variations. Nutrient solutions for tobacco culture were designed and prepared in 10 kinds with mineral ions: $NO_{3^-},\;SO_{4^{--},\;PO_4{^{-3},\;K,{^+}\;Ca,{^{++}\;Mg,{^{++}$, Mn, B, Cu, Zn, Mo, and Fe. Nicotiana tabacum L. Yellow Special A, grown for 50days from sowing, was replanted in plastic pot and cultured for 65 days supplying with prepared nutrient solutions. After harvest, their nicotine amount was determined by means of acid-base titrimetry and gas chromatography. The tobacco plants in KCa 4 and KMg 9 groups demonstrated the highest yield in total leaves weight and KMg 7 group in average nicotine amount. They have shown the increase of nicotine amount from lower leaf to 16th leaf, and thereafter decreased gradually. The author also pursued the optimum ionic proportions for the absolute nicotine amount in tobacco by means of systematic variations method.
Major diseases of tobacco and farmer's control practices were surveyed in the Kyeongbuk province area from 2005 to 2006. Mosaic caused by potato virus Y and bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum were most severe during the harvest season. Compared with the disease occurrence of ten years ago, the damage by tobacco mosaic virus reduced but bacterial wilt increased. These changes in the disease occurrences may probably be due to releasing the resistant tobacco cultivar to the mosaic virus but susceptible to the bacterial wilt pathogen. More than thirty percentage of the farmers have misused fungicides and also have applied the continuous mono-cropping system for more than ten years, and have chosen the incorrect crops for the rotation.
This study was conducted to obtain the breeding Information for varietal difference of leaf breakdown of flue-cured tobacco at Taegu Experiment Station, Korea Ginseng & Tobacco Research Institute In 1988. The experiment was designed in randomized block with 3 replications. And data were analyzed as spilt plot design composed with varieties for main and growth stages for sub-plots. Among the 8 varieties (NC 95, SL 72, Sleight G-28, TC 518, NC82, NC 2326, NC 567 and TC 499), first half derived from NC 95, and 4 latter varieties were used for check Plants and not derived from NC 95. Plant seedlings were transplanted in 15 April. The number of breakdown leaf were investigated twice at peak growth stage, 5 June and at early harvest stage, 30 June. NC 95 and varieties derived from NC 95 had showed significantly different on the number of breakdown leaf compared to the latter 4 ones after heavy rainfall, but there were not significantly different at the two growth stages. It was suggested that NC95 and varieties derived from NC 95 had substance to induce leaf breakdown by conditional genes after water absorption to plant tissue. Among the varieties derived from NC 95 cultivar SC 72, Speight G-28 and TC 518 had appeared significantly different on the number of breakdown leaf, respectively. These results could appreciated analogically that character of leaf breakdown were governed by heteromeric genes In NC 95.
Bacterial wilt(Ralstonia solanacearum) is one of the major diseases of flue-cured tobacco (Nicotiana tabacum L.) in the world. This study was conducted to investigate degree of dominance, selection, and correlation between leaf shape and degree of bacterial wilt resistance in flue-cured tobacco. The degree of disease caused by bacterial wilt was evaluated in parents, F$_1$, F$_2$ and F$_3$ populations of two crosses, BY 4 x NC 95 and BY 4 x Coker 86, in the infected field. The leaf shape index was also measured in parents and F$_2$ population of BY 4 x NC 95. The incidence of bacterial wilt was observed in the middle of June and peaked in late July, when the highest value of pathogen density reached 1.0 x 10$^{6}$ colony forming unit per gram. It was concluded that the inheritance mode of risestance to bacterial wilt in the above two crosses of susceptible and resistant varieties was recessive and polygenic. The resistance to bacterial wilt was significantly correlated with leaf shape in F2 generation of BY 4 x NC 95. But certain plants having narrower leaves were also resistant to bacterial wilt. It is considered that the bacterial wilt resistant lines having narrower leaves could be selected. The selection for bacterial wilt resistance in the F$_2$ population might be effective.
Damage and control of cutworms in the tobacco fields were studied during 1998~2000. It was estimated by surveys on cutworm damage that control measures should be taken for 9.0~10.2% of the surveyed fields. However, most of the interviewed growers broadcasted granule insecticides before or during tobacco plant transplantation. The damaging period and cutworm behavior suggested that the most effective control method would be the application of emulsifiable concentrate or wettable powder around the base of tobacco plants in the fields showing more than ca. 2% of damage ratio.
Intra- and inter-specific protoplast fusion of tobacco (Nicotiana tabacum cv. Virginia 115) and pea (Pisum sativum cv. Sparkle) were carried out in highly inhomogeneous alternating electric fields. Under the electric field of alternating current (AC, sine wave), 600 V/cm and 800 kHz for tobacco protoplast, and 600 V/cm and 700 kHz for pea protoplasts, the protoplasts were aggregated in pearl chains. Intra-specific protoplast fusions were most effectively induced within the aggregates of tobacco and pea, respectively, by the additional application of a single high field pulse of direct current (DC, square wave) at 1 kV/cm for 50 $mutextrm{s}$. Inter-specific fusions between protoplasts of the two plants were most effectively induced in the electric field of 600 V/cm and 700 kHz, and square wave pulse at 1 kV/cm for 50 $mutextrm{s}$. The duration of the pulse over the electrical breakdown voltages was simulated from 1 to 100 $mutextrm{s}$ in both tobacco and pea protoplast. The yield of the electrofusion products was significantly high (above 60%), compared with that (20%) of the standard fusion method by polyethylene glycol (PEG) 4,000, and the viability of electrofused protoplasts was above 70%, but that of PEG-fused protoplasts 8~16%, when determined by Evan's blue staining method.
Antisense construct of cDNA for senescencerelated ACC oxidase (CAO) cDNA isolated from carnation flowers were introduced into tobacco by Agrobacteriummediated transformation. The decreasing expression of NtACO and the reduction of ethylene production were observed in these transgenic lines. In contrast, the SAMDC transcripts and spermidine content were increased. The findings that higher content of spermidine in the ethylene suppressed transgenic plants compared with wild-type should be directly resulted in the enhancement of SAMDC activity followed by the increased accumulation of SAMDC transcript. To investigate the pathogenic response in these transgenic plants, wild-type and transgenic plants were inoculated with Phytophthora parasitica pv. nicotianae. Transgenic plants suppressing ethylene production showed the increased resistance against fungal pathogen, comparing with wild-type plant. PR-protein genes expression in CAO-AS-2 and CAOAS-4 were also higher at the normal growth condition and pathogenic response than in wild-type plants. The results of higher spermidine content and SAMDC activity in transgenic plants, CAO-AS-2 and CAO-AS-4, support the possibility that an increase in spermidine content might induce the higher transcripts of PR-protein genes. This results agreed with the phenomena that spermidine promoted the expression of PR1a and a SAMDC inhibitor, MGBG, decreased the expression of PR1a in leaf discs. These results suggest that the resistance against fungal pathogen in transgenic tobacco impaired in ethylene production might be caused by increasing in polyamine, especially spermidine, biosynthesis.
A CAB cDNA vector(pKGCAB), encoding the light harvesting chlorophyll a/b binding protein in Korean ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer), was constructed with the CaMV35S promoter of plant expression vector. The chimeric vector was transformed into tobacco(Nicotiana tabacum cv. NC 82) using Agrobacterium tumefaciens LBA 4404 strain, and the transgenic tobacco plant CAB-TP2 was selected. Photosynthetic rates of the CAB-TP2 plant at before-flowering stage were increased about 20% under low irradiance conditions of quantum 100 and 500 $\mu$mol.m$^{-2}$ s$^{-1}$ , however, the rates were similar to those of NC 82 under quantum 1000 and 2000 $\mu$mol.m$^{-2}$ s$^{-1}$ conditions. The plants were germinating under low- or normal irradiance condition and the quantum yield of photosystem III were measured. The differences of the Fv/Em values between conditions were 0.07 and 0.01 in NC 82 and CAB-TP2, respectively. The mature leaves in the position 8-10 of the CAB-TP2 at before-flowering stage revealed l0% higher Fv/Fm values in range of 0.759 to 0.781 and 40% more chlorophyll contents of 70-93mg/$m\ell$ than those of normal NC 82. These data suggest the possibility that the increase in photosynthetic activity of leaves under low light intensity in the canopy of CAB-TP2 transgenic tobacco might lead to increase the quality of lower tobacco leaves.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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