한국식물학회 1987년도 식물생명공학 심포지움 논문집 Proceedings of Symposia on Plant Biotechnology
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pp.283-307
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1987
Glycinin and $\beta$-conglycinin are the most abundant storage protein in soybean. These proteins are known to be synthesized predominantly during germination and cell expansion phase of seed development for short period, and synthesized not in other tissues. Genes encoding these storage proteins are useful system to study the mechanism of development stage and tissue specific gene expression in eukaryotes, especially plants, at the molecular level. The cDNA and genomic clones coding for glycinin have been isolated and regulation mechanism of the gene expression has been studied. Initially, development and tissue-specific expression of the glycinin gene is regulated at the level of transcription. Post-transcriptional processing is also responsible for delayed accumulation of the mRNA. Translational control of the storage protein gene has not been reported. Post-translational modification is another strategic point to regulate the expression of the gene. It is possible to identify positive and/or negative reguratory clements in vivo by producing transgenic plants agter gene manipulation. Elucidation of activation and repression mechanism of soybean storage protein genes will contribute to the understanding of the other plant and eukaryotic genes at molecular level.
대부분 척추동물에서 골격근 내 filament들의 길이 조절은 근 수축 기작의 구조를 이해하는데 중요한 단서가 된다. Nebulin은 thin filament의 전체에 걸쳐있는 거대한 단백질로 골격근에만 특이적으로 존재하는 것으로 알려져 왔다. 본 연구에서는 닭의 근육과 비근육 조직에서 nebulin isoform단백질들을 확인하기 위하여 전기영동과 immunoblot의 방법을 이용하였다. 각 조직의 단백질들은 soluble과 insoluble fraction으로 분리 준비하였다. 실험결과, 닭의 근육과 비근육 조직들에서 조직 특이성을 나타내는 다양한 nebulin isoform 단백질들이 확인되었다. Nebulin은 성계의 골격근에서 500 kDa 정도의 크기로 나타났고, nebulett은 계배와 성계의 심장근에서 107 kDa 정도로 발현되었다. 그리고 계배의 비근육 조직인 뇌에서 380 kDa 정도의 거대 단백질이 확인되었다. 이 단백질은 뇌 조직의 soluble fraction에서 인지되었다. Nebulin isoform 단백질들이 서로 다른 조직에서 발현되는 양상을 보아 서로 다른 독자적인 기능을 가질 것으로 추정된다.
G protein-coupled receptors (GPCR) constitute the largest superfamily of cell membrane receptors, mediating diverse signal-transduction pathways. The melanocortin 4 receptor (MC4R) has been of interest for its physiological role and size, one of the smallest among the GPCRs, which makes it a good model system for the structural study of GPCRs. To study the molecular structure and tissue-specific expression of MC4R in olive flounder (Paralichthys olivaceus), the full-length MC4R gene was obtained using PCR amplification of genomic DNA as well as cDNA synthesis. Sequence analysis of the gene indicates that 978 bp of the MC4R gene encodes 325 amino acids without introns. Sequence alignment with the MC4Rs from other fish shows the highest degree of identity (96%) between Paralichthys olivaceous and Verasper moseri, followed by Takifugu rubripes and Tetraodon nigroviridis (89%). RNA was isolated from various tissues to examine the tissue distribution of MC4R by using RT-PCR. The results showed major expression of MC4R in the liver, brain, and eye, which is consistent with the expression pattern in other fish belonging to the order Pleuronectiformes.
Androgen plays an important role in the regulation of gonadotropin production in vertebrates . We have investigated the transcriptional pattern of androgen receptor (AR) in a variety of tissues in maturing male and female goldfish by RT-PCR. Specific primer for AR was designed based on goldfish AR gene from the GenBank (accession number AY090897). AR was shown 10 be maturity- and tissue-dependent gene expression pattern in goldfish. In immature male goldfish, significantly higher transcript level of AR was observed in the pituitary und testis , compared [0 brain and liver. Mature male goldfish showed a similar expression pattern to immature male goldfish. Interestingly. when compare to male goldfish, female goldfish showed AR mRNA expression that was found 10 be weak in pituitary, and very low expression in brain. They could not be found 10 have expression in any other tissues. Taken together. the- transcriptional analysis of AR depending on the tissue, sex. and maturity of a goldfish provides the opportunity for the study of goldfish reproductive physiology ,The results provided for the first time a comparison of the tissue distribution of AR mRNA in sexually maturating male and female goldfish.
Obesity, one of the most common metabolic diseases in industrial countries is characterized by an increase in the number or size of adipocytes. In an effort to create transgenic mouse models for the study of obesity we developed a novel technique in which adipose tissue can be ablated genetically at will, at any specific developmental stage and/or physiological condition, by the treatment of ganciclovir. We made a series of adipocytespecific expression vectors using minimal regulatory regions of brown adipocyte-specific uncoupling protein (UCP-1) gene and adipocyte-specific aP2 gene, and then analyzed their expression characteristics in cultured cell lines. When both constructs pUCP-LacZ and paP2-LacZ were transfected transiently into differentiating 3T3-L1 (pre-while adipocytes) and HIB-1B (pre-brown adipocytes) cell lines in vitro and then monitored by X-gal staining of cells, these regulatory regions were sufficient to show proper differentiation stage-specific expression in adipocvtes. To confirm that adipocytes expressing HSV-TK controlled by these minimal requlatory elements are sufficient to kill themselves with ganciclovir treatment pUCP-TK and paP2-TK expression constructs were transfected stably into HIB-1B and 3T3-L1 cells, respectively, and their ganciclovir sensitivities were tested during in vitro differentiation of cells. As expected more than 80% of cells were dead by the 7th day of treatment with ganciclovir while negative control cells were not affected at all. The data suqqest that the constructed vectors are suitable for obtaining novel obese transqenic models based on a conditional genetic tissue ablation method.
Ran is a small GTP-binding protein that binds and subsequently hydrolyzes GTP. The functions of Ran in nuclear transport and mitotic progression are well conserved in plants and animals. In animal cells, stress treatments cause Ran relocalization and slowing of nuclear transport, but the role of Ran proteins in plant cells exposed to stress is still unclear. We have therefore compared Ran genes from three EST libraries construed from different cell types of sweetpotato and the distribution pattern of Ran ESTs differed according to cell type. We further characterized two IbRan genes. IbRan1 is a specific EST to the suspension cells and leaf libraries, and IbRan2 is specific EST to the root library. IbRan1 showed 94.6 % identity with IbRan2 at the amino acid level, but the C-terminal region of IbRan1 differed from that of IbRan2. These two genes showed tissue-specific differential regulation in wounded tissues. Chilling stress induced a similar expression pattern in both IbRan genes in the leaves and petioles, but they were differently regulated in the roots. Hydrogen peroxide treatment highly stimulated IbRan2 mRNA expression in the leaves and petioles, but had no significant effect on IbRan1 gene expression. These results showed that the transcription of these two IbRan genes responds differentially to abiotic stresses and that they are subjected to tissue-specific regulation. Plant Ran-type small G-proteins are a multigenic family, and the characterization of each Ran genes under various environmental stresses will contribute toward our understanding of the distinctive function of each plant Ran isoform.
Phospholipase C is a key enzyme of signaling pathways hydrolyzed phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate to generate 2 second messengers. Among the PLC, $PLC-{\beta}$ subfamily consisted of 4 isoforms, $PLC-{\beta}$ 1~4. Here, we studied the tissue specific expression of $PLC-{\beta}3$ in olive flounder (Paralichthys olivaceus) following external stimulation like lipopolysaccharide (LPS), concanavalin A (ConA) and environmental stress compared with the inflammatory cytokines IL-1b. $PoPLC-{\beta}3$ gene transcripts has the effect in stimulated tissue compared to control. These results provide what we sure to be a important role for $PLC-{\beta}3$ activity in tissue and verify $PLC-{\beta}3$ as potential immune enzyme for signal transduction.
Journal of the Korean Data and Information Science Society
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제27권1호
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pp.225-243
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2016
Thanks to recent advance of next generation sequencing techniques, RNA-seq enabled to have an unprecedented opportunity to identify transcript variants with isoform diversity and allelic imbalance (Anders et al., 2012) by different transcriptional rates. To date, it is well known that those features might be associated with the aberrant patterns of disease complexity such as tissue (Anders and Huber, 2010; Anders et al., 2012; Nariai et al., 2014) specific differential expression at isoform levels or tissue specific allelic imbalance in mal-functionality of disease processes, etc. Nevertheless, the knowledge of post-transcriptional modification and AI in transcriptomic and genomic areas has been little known in the traditional platforms due to the limitation of technology and insufficient resolution. We here stress the potential of isoform variability and allelic specific expression that are relevant to the abnormality of disease mechanisms in transcriptional genetic regulatory networks. In addition, we systematically review how robust Bayesian approaches in RNA-seq have been developed and utilized in this regard in the field.
Adipose tissue has now been recognized as a rich source of metabolically active molecules that include leptin and angiotensinogen (AGT), the precursor of angiotensin II (Ang II). Both of which have been implicated in the pathogenesis of metabolic alteration and hypertension associated with obesity. In this study, we examined the relationship between body mass index (BMI), adipocyte size, leptin, Ang II secretion and mRNA expression in human adipose tissue obtained from female subjects. Leptin and Ang II were analyzed using specific radioimmunoassay kits following a 48hour tissue culture. Leptin and Ang II secretion varied from 1.4 - 72.1ng/g and 0.8 - 57.3pg/g of tissue respectively. These large individual variations limit significant correlation between BMI, leptin and Ang II secretion. Ang II secretion was significantly higher in the obese than the non-obese (p < 0.05) and positively correlated with BMI. However, no difference in leptin secretion between the obese and the non-obese was observed and leptin secretion showed negative correlation with BMI. No difference in leptin and AGT mRNA expression in adipose tissue between the obese and the non-obese was observed. Although several limitations of this study, we found increased Ang II secretion in obese patients compared with non-obese patients, and positive correlation between AGT and BMI. Observed difference in AGT expression between the obese and the non-obese in this study might be of importance in relation with obesity related hypertension. (J Community Nutrition 8(2): 69-75, 2006)
Kim, Nam-Keun;Lee, Sook-Hwan;Ko, Jung-Jae;Roy, Rabindra;Lee, Hey-Kyung;Kwak, In-Pyung;Cha, Kwang-Yul
Journal of Genetic Medicine
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제2권1호
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pp.31-34
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1998
The N-methylpurine-DNA glycosylase (MPG), a ubiquitous DNA repair enzyme, removes N-methylpurine and other damaged purines induced in DNA. Tissue-specific mRNA levels of the N-methylpurine-DNA glycosylase (MPG) were investigated in Balb/c mice of four different growing stages; newborn, 1, 4 and 8-weeks postpartum. MPG expressions in the newborn and the 8-week-old mice were the highest in thymus and testis, respectively. The tested tissues of the newborn mice had consistently higher MPG mRNA level than 8-week-old adults except in testis and thymus. The MPG mRNA level in testis was the lowest in the newborn mice, but it attained the highest in the 8-week-old mice. The levels of MPG mRNA among the different tissues in the newborn and the 8-week-old mice were more than 9.0 and 19.0-fold respectively. These results suggest that the of MPG expression was dependent on the growing stage and had tissue-specificity.
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