The effects of intraperitoneal injection of cephradine in a dose of 75 mg/kg and netilmicin in dose of 50 mg/kg and their combination on creatinine and urea serum levels of rabbits were studied as well as the antipseudomonal activity against three multiresistant clinicial isolates. The antibacterial activity was investigated by two methods: Checkerboard titration method and time-kill studies. Finally, the antibacterial activity of the sera obtained from the rabbits receiving the used drugs in the previous regimen was studied using time-kill study method against Pseudomonas aeruginosa isolates. Results obtained from this study indicated that both creatinine and urea serum levels of the rabbits receiving both drugs were not significantly different from those of the rabbits receiving either cephradine or netilmicin alone. At the same time the in vitro antibactrial activity (either of the prepared solutions of the used drugs and their combination or of the sera obtained from the rabbits receiving these drugs as mentioned before) showed a synergistic effect against the tested strains of Pseudomonas aeruginosa
Erwinia carotovora subsp. Carotovora (Ecc), a pathogen of tobacco hollow stalk disease, was isolated for testing susceptibility to streptomycin from diseased plants in burley tobacco growing area. Of 157 isolates tested, 17 isolates (108%) were resistant to the antibiotic at the antibiotic from field soils, which streptomycin had been used continuously for three years for control of the disease was three times higher than those of non-used. There was no difference in virulence and generation time between streptomycin-sensitive and resistant strains.
Enterovirulent Escherichia coli are among the most important causes of diarrhea in cattles. Between January and December, 2017, a total of 150 stool specimens from cattles were investigated for enterohaemorrhagic E. coli (EHEC), enteropathogenic E. coli (EPEC), enteroaggregative E. coli (EAEC), enterotoxigenic E. coli (ETEC) and enteroinvasive E. coli (EIEC) using real-time PCR. 131 E. coli were isolated from feces. The most frequently isolated pathotype in feces was EHEC (37 isolates). EPEC, ETEC and EAEC were detected in feces with 14, 7 and 3 respectively. EIEC was not detected. Antimicrobial resistance test was performed by agar disc diffusion method with 14 antimicrobials. Enterovirulent E. coli isolates showed the highest antimicrobial resistance to ampicillin 61.3%, followed by tetracycline 54.5% and streptomycin 45.5%. They had low resistance to amikacin 11.4%. Of 44 isolates, 37 (84.1%) were resistant to more than 2 antimicrobials. futher study a highest antimicrobial susceptibility to trimethoprim/sulfamethoxazole 50.0% and florofenicol 47.7%.
Methicillin-resistant Staphylococcus (S.) aureus (MRSA) is one of the most important nosocomial pathogens worldwide and the emergence of this strain has become a major clinical problem. In this study, we investigated the prevalence of MRSA and their genetic characteristics in 69 S. aureus isolated from humans and animals. In human isolates, higher antimicrobial resistance rates were observed against penicillin (80.6%), followed by erythromycin (11.9%) and tetracycline (9.0%). All of them were susceptible to clindamycin, enrofloxacin, novobiocin, pirlimycin, trimethoprim/sulfamethoxazole and vancomycin. The resistance patterns in animal isolates were similar to those of human isolates. Two (2.9%) MRSA strains were isolated from human (n = 1) and animal (n = 1), and these isolates were confirmed as carrying the mecA gene. One isolate originating from human was resistant to 7 drugs and the other isolate derived from animal was resistant to 11 drugs. Staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) variant IIIB was identified in animal isolate but SCCmec type of an isolate from human was not exactly determined. Two MRSA isolates showed unrelated PFGE pattern between them. Our results indicated although the frequency of MRSA isolates from humans and animals was low, a continuous surveillance and monitoring should be called for to prevent the contamination and spread of MRSA in the community. To our knowledge, this is the first time that SCCmec type variant IIIB was detected from animals in Korea.
Two molecular epidemiologic methods, IS6110 restriction fragment length polymorphism (IS6110-RFLP) and 24-locus mycobacterial interspersed repetitive unit-variable-number tandem repeat (MIRU-VNTR), are used worldwide in studies of Mycobacterium tuberculosis (MTB). Conversely, because of its poor resolution, pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) is not widely used for MTB. In this study, we improved the 24-locus MIRU-VNTR and PFGE protocols and compared the effectiveness of these approaches for the molecular typing of MTB using 75 clinical isolates obtained from a cohort investigation of high-risk populations infected with MTB. The 24-locus MIRU-VNTR method demonstrated superior discriminatory ability, followed by PFGE and IS6110-RFLP. Next, we analyzed six isolates with clear epidemiologic connections; that is, isolates from patients who attended the same school. IS6110-RFLP and PFGE identified these samples as the same type. By contrast, according to MIRU-VNTR, two isolates differed from four other isolates at one locus each; one isolate was identified as Mtub29 and the other as QUB-26. In summary, the 24-locus MIRU-VNTR assay was the most useful molecular typing method among the three methods investigated due to its discriminatory power, short time required, and availability as an epidemiologic investigation tool. PFGE was the second-best method. Compared with the other loci assessed in the 24-locus MIRU-VNTR assay, the Mtub29 and QUB-26 loci appeared to exhibit greater variability during transmission.
A simple and easy modification of AST by disk diffusion was tested for the detection of induced clindamycin resistant Staphylococci and their antimicrobial susceptibility at the same time. The incidence of inducible clindamycin resistant staphylococci in blood culture and their MIC characterization at Seoul National University Hospital was analyzed by an AST contained disk approximation test (D-zone test) and Etest, respectively. Of the total 309 staphylococcal isolates, 139 (45%) isolates presented constitutive resistance to ERY and CLI (ERY-R, CLI-R phenotype), and 59 were ERY-I/R and CLI-S phenotypes. Of the 59 isolates, 19 (32%) isolates were inducible resistant to CLI. The incidence was higher in S. aureus (66.7%) than coagulase-negative staphylococci (CNS, 26.0%). Especially, methicillin-resistant staphylococci (MRSA, 100%; MRCNS, 45.5%) presented higher inducibility than methicillin susceptible (MSSA, 50%; MSCNS, 20%). For most of the inducible clindamycin resistant staphylococci (15 of 19 isolates), their ERY MIC were high (>$128_{\mu}g/mL$) and were methicillin resistant. The remaining 4 isolates were methicillin susceptible and their ERY MIC were of intermediate concentrations ($1-4_{\mu}g/mL$). We concluded that suscetibility testing of staphylococci, especially methicillin resistant, should include the D-zone test.
Sugar beet (Beta vulgaris L.) is known as a key product for agriculture in several countries across the world. Beet soil-borne virus (BSBV) triggers substantial economic damages to sugar beet by reducing the quantity of the yield and quality of the beet sugars. We conducted the present study to report the complete genome sequences of two BSBV isolates in Turkey for the first time. The genome organization was identical to those previously established BSBV isolates. The tripartite genome of BSBV-TR1 and -TR3 comprised a 5,835-nucleotide (nt) RNA1, a 3,454-nt RNA2, and a 3,005-nt RNA3 segment. According to sequence identity analyses, Turkish isolates were most closely related to the BSBV isolate reported from Iran (97.83-98.77% nt identity). The BSBV isolates worldwide (n = 9) were phylogenetically classified into five (RNA-coat protein read through gene [CPRT], TGB1, and TGB2 segments), four (RNA-rep), or three (TGB3) lineages. In genetic analysis, the TGB3 revealed more genetic variability (Pi = 0.034) compared with other regions. Population selection analysis revealed that most of the codons were generally under negative selection or neutral evolution in the BSBV isolates studied. However, positive selection was detected at codon 135 in the TGB1, which could be an adaptation in order to facilitate the movement and overcome the host plant resistance genes. We expect that the information on genome properties and genetic variability of BSBV, particularly in TGB3, TGB1, and CPRT genes, assist in developing effective control measures in order to prevent severe losses and make amendments in management strategies.
Screening of effective fungicides, determination of effective fungicide application time and investigation of the emergence of resistant isolates to fungicides were conducted to establish effective chemical control strategy of gray blight of tea (Camellia sinensis) in Korea. Systemic fungicides, such as bitertanol, were effective for controlling gray blight when the fungicides were sprayed within 3 days after cutting tea leaves for harvest. Sprayed immediately after cutting, contact fungicides such as chlorothalonil were also effective, but control efficacy rapidly decreased with lengthening of the intervals between cutting and spraying. Korean isolates of P. longiseta and P. theae were still sensitive to bitertanol or fluazinam. However, the isolates highly insensitive to copper hydroxide or thiophanate-methyl have already emerged in Korea. Therefore, careful attention should be paid to use of fungicides and spraying programs for the effective control of gray blight of tea in Korea.
Antifungal activity of 20 chemicals registered to turfgrass diseases was evaluated. Among the chemicals, iprodione, benomyl, iprodione+thiram, pencycuron+tebuconazole, hexaconazole, and iprodione+thiophanate-methyl exhibited high antifungal activity to the dollar spot fungus. All isolates were greatly inhibited by the chemicals at the concentration over 32ppm($\mu\textrm{g}$/ml). However, sensitivity of the isolates to chemicals was varied at the lower concentration as 8 and 16 ppm as follows. The isolate originated from Ora golf course was resistant to iprodione and iprodione+thiophanate methyl, Gonjiam isolate to iprodion, Youngpyung isolate to iprodione+thiram, and Dogo isolate to iprodione+thiram, pencycuron+tebuconazole, and tebuconazole. It was found from this study that the varied chemical resistance among the isolates was positively related to the application time of the chemical in the golf course. Consequently, when a chemical was applied more often times than the others to the golf course, the fungal isolates originate from the field showed higher resistance to the former chemical. Effects of the chemicals on control of the dollar spot was evaluated in the field. All tested chemicals revealed over 70% disease control efficacy, however, mepronil+propiconazole was the best showing 83% control efficacy and followed by fenarimo, iprodione, terbuconazole, thiram, and thiophanate-methyl.
Targeting the pathogen viability using drugs is associated with development of drug resistance due to selective pressure. Hence, there is an increased interest in developing agents that target bacterial virulence. In this study, the inhibitory effect of ciclopirox, an antifungal agent with iron chelation potential, on the microbial virulence factors was evaluated in 26 clinical MDR Pseudomonas aeruginosa isolates collected from Alexandria Main University Hospital, a tertiary hospital in Egypt. Treatment with 9 ㎍/ml ciclopirox inhibited the hemolytic activity in 70% isolates, reduced pyocyanin production, decreased protease secretion in 46% isolates, lowered twitching and swarming motility, and decreased biofilm formation by 1.5- to 4.5-fold. The quantitative real-time PCR analysis revealed that treatment with ciclopirox downregulated the expression levels of alkaline protease (aprA) and pyocyanin (phzA1). Ciclopirox is used to treat hematological malignancies and the systemic administration of ciclopirox is reported to have adequate oral absorption with a satisfactory drug safety profile. It is important to calculate the appropriate clinical dose and therapeutic index to reposition ciclopirox from a topical antifungal agent to a promising virulence-modifying agent agent against P. aeruginosa, a problematic Gram-negative pathogen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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