질트리코모나스(Trichomenas vaginalis)에 대한 마우스의 복강 대식세포 및 림포카인으 로 활성화시킨 대식세포의 세포독성을 각각 관찰하였다. 세포독성은 질트리로모나스를 3H-TdR로 label시킨 후 대식세포와 반응시켜 사멸한 원충에서 방출되는 방사능 양을 비교하여 측정하였다. 대식세포의 원충에 대한 비율을 1 : 1, 5 :1, 10 : 1, 20 : 1 및 50 : 1로 증가시키고 반응시간을 12시간 및 24시간으로 변화시켰을 때, 대식세포와 원충의 비율 10 : 1 및 24시간 반응의 경우 가장 놓은 세포독성을 보였다. 마우스 비장세포를 phytohemagglutinin으로 자극시켜 얻은 림포카인으로 활성화시킨 대식세포에서는, 아무 처리를 하지 않은 대조 대식세포와 비교하였을 때 세포독성이 유의하게 증가되었으나 세포독성이 림포카인의 희석정도와는 비례하지 않았다. 또한 질트리코모나스에 세포독성을 나타내는 세포는 주로 플라스틱에 부착하는 대식세포임을 알 수 있었다.
Endostatin, a proteolytic fragment of collagen XVIII, is a potent inhibitor of angiogenesis and the growth of several primary tumors. However, the opinions on the activity of endostatin derivatives deleted N- or C- terminal are still controversial. In this regard, we produced mouse endostatin and its derivatives in the prokaryotic system, and studied their anti-tumor activity. The [$^3H$]-thymidine incorporation assay demonstrated that N-terminal deleted mouse endostatin, and a C- and N-terminal deleted mutant, effectively inhibited the proliferation of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). The biological activity of endostatin was also shown by its in vivo anti-angiogenic ability on the chorioallantoic membrane (CAM) of a chick embryo. Treatment of $200\;{\mu}g$ of mouse endostatin, or N-terminal deleted mouse endostatin, inhibited capillary formation of CAM 45 to 71%, which is comparative to a 80% effect of positive control, $1\;{\mu}g$ of retinoic acid. An in vivo mouse tumor growth assay showed that N-terminal deleted mouse endostatin, and the N-/C-terminal deleted mutant, significantly repressed the growth of B16F10 melanoma cells in mice as did the full-length mouse endostatin. According to these results, N-and N-/C-terminal deleted mouse endostatins are the potent inhibitors of tumor growth and angiogenesis.
병원성이 강한 Acanthamoeba culbertsoni를 마우스에 감염시킨 후 경과된 감염기간에 따른 세포매개성 면역반응과 혈청 내 항체가의 변동을 관찰하였다. [9H]-thymidine을 이용한 마우스 비장세포의 아세포화를 관찰하였는데 사용된 mitogen으로는 concanavalin A(Con A)와 lipopoITsaccharide(LPS)였으며, 항체의 측정을 위하여 효소표식 면역검사법(ELISA)을 시행하였다. T림프구 및 B림프구의 아세포화 정도는 A. culbertsoni 감염 7일 후 증가하는 경향을 보였으며 다른 기간에 서는 대조군에 비해 별다른 차이를 보이지 않았다. 또한 감염된 마우스의 혈청 내 항체가도 감염 7 일 후부터 증가하는 경향을 관찰할 수 있었다.
To screen the effective materials for hair loss treatment, the Gamissanghwa-tang extracts were tested. As a result we found that the Gamissanghwa-tang extracts have the hair growth promoting effect. After topical application of each test materials to the back of CS7BL/6 mice, the earlier conversion of telogen-to-anagen phase was induced. In the experiments of 5α-reductase type II inhibition assay, Radix Paeoniae Alba, Semen Cuscutae showed effective potential to inhibit the activity of 5α-reductase type II. And hair growth index of the Gamissanghwa-tang extracts ranked as 1.2, especially the hair growth index of Fructus Rubi is highest as 1.8. But there were no plant extracts which have effect on the DNA proliferation of hair dermal papilla cell measured by [³H]thymidine incorporation, the expression of growth factors such as IGF-I, KGF, HGF estimated by RT-PCR and protein synthesis of vibrissae hair follicle measured by [/sup 35/S] cysteine incorporation. Cortex Cinnamomi showed anti-bacterial effect on P. ovale, Radix Paeoniae Alba has the highest radical scavening activity and Radix Glycyrrhizae has the highest effects of NO synthesis. These results suggest that Gamissanghwa-tang can be used as a potent treatment agent for helping hair growth stimulation.
Bojungchiseub-tang (BJCST) has been used in symptoms and signs of edema, dampness-phlegm, kidney failure, and so on. BJCST is also expected to have strong anti-obesity activities. However, little is known about the mechanisms of its inhibitory effects on adipocyte differentiation and adipogenesis. In the present study, we examined the effects and mechanism of BJCST on transcription factors and adipogenic genes of 3T3-L1 preadipocytes to understand its inhibitory effects on adipocyte differentiation and adipogenesis. Our results showed that BJCST significantly inhibited differentiation and adipogenesis of 3T3-L1 preadipocytes in a dose-dependent manner. To elucidate the mechanism of the effects of BJCST on lowering lipid content in 3T3-L1 adipocytes, we examined whether BJCST modulate the expressions of transcription factors to induce adipogenesis and adipogenic genes related to regulate accumulation of lipids. As a result, the expression of steroid regulatory element-binding protein (SREBP)1, cytidine-cytidine-adenosine-adenosine-thymidine (CCAAT)/enhancer binding proteins ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$), $C/EBP{\beta}$, $C/EBP{\delta}$, and peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) genes, which induce the adipose differentiation, liver X receptor $(LXR){\alpha}$ and fatty acid synthase (FAS) genes, which induce lipogenesis and adipose-specific aP2, Adipsin, lipoprotein lipase (LPL), CD36, TGF-${\beta}$, leptin and adiponectin genes, which compose fat formation were decreased. BJCST also reduced the expression of acyl CoA oxidase (ACO) and uncoupling protein (UCP) genes related to lipid oxidation. In conclusion, BJCST could regulate transcript factor related to induction of adipose differentiation and inhibited the accumulation of lipids and expression of adipogenic genes.
Ahn, Mi Young;Kim, Ban Ji;Yoon, Hyung Joo;Hwang, Jae Sam;Park, Kun-Koo
Toxicological Research
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제34권2호
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pp.151-162
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2018
Anti-diabetes activity of Catharsius molossus (Ca, a type of dung beetle) glycosaminoglycan (G) was evaluated to reduce glucose, creatinine kinase, triglyceride and free fatty acid levels in db mice. Diabetic mice in six groups were administrated intraperitoneally: Db heterozygous (Normal), Db homozygous (CON), Heuchys sanguinea glycosaminoglycan (HEG, 5 mg/kg), dung beetle glycosaminoglycan (CaG, 5 mg/kg), bumblebee (Bombus ignitus) queen glycosaminoglycan (IQG, 5 mg/kg) and metformin (10 mg/kg), for 1 month. Biochemical analyses in the serum were evaluated to determine their anti-diabetic and anti-inflammatory actions in db mice after 1 month treatment with HEG, CaG or IQG treatments. Blood glucose level was decreased by treatment with CaG. CaG produced significant anti-diabetic actions by inhiting creatinine kinase and alkaline phosphatase levels. As diabetic parameters, serum glucose level, total cholesterol and triglyceride were significantly decreased in CaG5-treated group compared to the controls. Dung beetle glycosaminoglycan, compared to the control, could be a potential therapeutic agent with anti-diabetic activity in diabetic mice. CaG5-treated group, compared to the control, showed the up-regulation of 48 genes including mitochondrial yen coded tRNA lysine (mt-TK), cytochrome P450, family 8/2, subfamily b, polypeptide 1 (Cyp8b1), and down-regulation of 79 genes including S100 calcium binding protein A9 (S100a9) and immunoglobulin kappa chain complex (Igk), and 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoenzymeAsynthase1 (Hmgcs1). Moreover, mitochondrial thymidine kinase (mt-TK), was up-regulated, and calgranulin A (S100a9) were down-regulated by CaG5 treatment, indicating a potential therapeutic use for anti-diabetic agent.
To develope the novel anti-allergic drug, many sophoricoside derivatives were synthesized. Among these derivatives, JSH-II-3, JSH-Ⅵ-3, JSH-Ⅶ-3, and JSH-Ⅷ-3 were selected and subjected to high throughput toxicity screening (HTTS) because they revealed strong IL-5 inhibitory activity and limitation of quantity. Mouse lymphoma thymidine kinase (tk$\^$+/-/) gene assay (MOLY) and single cell gel electrophoresis (Comet) assay in mammalian cells were used as HTTS tool in our laboratory. In MOLY assay, JSH-Ⅶ-3 at 50 ∼ 6 $\mu\textrm{g}$/ml concentrations was not shown significant mutagenic effect in the absence and presence of S-9 metabolic activation system. However, the concentration of ISH-II-3, 38 $\mu\textrm{g}$/ml, induced increased mutation frequency (MF) in the presence of S-9 metabolic activation system. Also in comet assay, DNA damage was not observed in JSH-Ⅵ-3 and JSH-Ⅶ-3, wherase concentration of 32.8 $\mu\textrm{g}$/ml in JSH-II-3 and 13.9 $\mu\textrm{g}$/ml in JSH-Ⅶ-3 were induced DNA damage in the absence of S-9 metabolic activation system. Therefore, we suggest that JSH-Ⅵ-3 and JSH-Ⅶ-3 have no genotoxic effects but JSH-II-3 and JSH-Ⅷ-3 induce some mutagenicity and DNA strand breaks in mouse lymphoma cell line used this study.
Kim, Seon-Young;Lee, Chang-Hun;Kim, Kyung-Joo;Kim, Yeon-Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제11권2호
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pp.234-241
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2001
The C-terminal 393 bp region of the human interleukin-16 (IL-16) gene was cloned and expressed in E. coli along with mammalian cell lines. Recombinant IL-16 expressed from E. coli was 22 kDa on SDS-PAGE and showed 260% of chemoattractant activity at a concentration of $0.1\;{\mu}g/ml$. HeLa, COS, and Neuro-2a cells were transduced by recombinant retrovirus vector pLNC/IL-16/IRES/TK and the intracellular and secreted amounts of IL-16 produced by HeLa/IL-16/TK, COS/IL-16/TK, and Neuro-2a/IL-16/TK cells were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). HeLa/IL-16/TK $(1{\times}10^5)$ and COS/IL-16/TK $(1{\times}10^5)$ cells secreted 36.1 and 13.3 ng of IL-16 for 48 h, respectively. Forty-nine ng and 86.4 ng of IL-16 remained in the cell lysates of HeLa/IL-16/TK and COS/IL-16/TK. Intracellular and secreted amounts of IL-16 from Neuro-2a/IL-16/TK $(5{\times}10^5)$ cells during 24 h cultivation were 50 ng and 3.3 ng, respectively. Also, HeLa and COS cells wee stably transfected with mammalian expression vector pCRIII/IL-16. Both culture media and cell lysates prepared from HeLa/IL-16 cells and COS/IL-16 cells showed chemoattractant activity ranging from 190% to 460% as compared to the control experiment. Expression of the herpes simplex virus thymidine kinase (HSV0tk) gene in pLNC/IL-16/ IRES/TK bicistronic retroviral expression vector was verified by performing a genciclovir (GCV) sensitivity assay. Finally, IL-16 repressed Tat-transactivated human immunodeficiency virus type 1 long terminal repeat (HIV-1 LTR) promoter activity.
Kim, Mi-Hyoung;Byon, Yun-Young;Ko, Eun-Ju;Song, Jie-Young;Yun, Yeon-Sook;Shin, Taek-Yun;Joo, Hong-Gu
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제13권3호
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pp.169-173
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2009
Ginsan, a Panax ginseng polysaccharide that contains glucopyranoside and fructofuranoside, has immunomodulatory effects. Although several biologic studies of ginsan have been performed, its effects on dendritic cells (DCs), which are antigen-presenting cells of the immune system, have not been studied. We investigated the immunomodulatory effects of ginsan on DCs. Ginsan had little effect on DC viability, even when used at high concentrations. Ginsan markedly increased the levels of production by DCs of IL-12 and TNF-${\alpha}$, as measured by ELISA. To examine the maturation-inducing activity of ginsan, we measured the surface expression levels of the maturation markers MHC class II and CD86 (B7.2) on DCs. It is interesting that ginsan profoundly enhanced the expression of CD86 on DC surfaces, whereas it increased that of MHC class II only marginally. In $^3H$-thymidine incorporation assays, ginsan-treated DCs stimulated significantly higher proliferation of allogeneic $CD4^+$ T lymphocytes than did medium-treated DCs. Taken together, our data demonstrate that ginsan stimulates DCs by inducing maturation. Because DCs are critical antigen-presenting cells in immune responses, this study provides valuable information on the activities of ginsan.
Linoleic acid [LA; 18: 2 (n-6)] is the most abundant polyunsaturated fatty acid in human skin. The exclusion of LA from diet induces epidermal hyperproliferation, which is reversible by the inclusion of LA in diet, and hence, LA is heralded as an essential fatty acid (EFA). Since safflower oil (SO) has been widely recognized as the major dietary source of LA and Arctii Fructus (Arctium lappa L.) is recently reported to contain high level of LA, we compared the antiproliferative effects of SO and Arctii Fructus in this study. Epidermal hyperproliferation was induced in guinea pigs by hydrogenated coconut oil (HCO) diet for 8 wk. During following 2 wk, EFA deficient guinea pigs were fed diets of safflower oil (group HS), water extract of Arctii Fructus (group AW) or organic extract of Arctii Fructus (group AO). Normal control group was fed SO containing diet (group SO) and EFA deficient group was fed HCO containing diet (group HCO) for 10 wk. Epidermal hyperproliferation was reversed in groups AO (55.9% of group HCO) and HS(74.1% of group HCO). However, the thymidine incorporation into epidermal DNA of group HS was greater than of normal control group SO. Epidermal hyperproliferation was not reversed in group AW. The accumulations of LA into phospholipids and ceramides, and of 13-hydroxyoctadecadienoic acid (13-HODE), the potent antiproliferative metabolite of LA in the epidermis of group AO were greater than of group HS. In contrast, the de novo synthesis of ceramides, the major lipids maintaining epidermal barrier, did not differ between all of groups. Together, our data demonstrate that organic extract of Arctii Fructus is more prominent than safflower oil in reversing epidermal hyperproliferation by inducing the higher accumulations of LA and 13-HODE in the epidermis of guinea pigs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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