The mixotrophic growth with methanol plus thiosulfate was examined in nutrient-limited mixotrophic condition for Methylobacterium goesingense CBMB5 and Methylobacterium fujisawaense CBMB37. Thiosulfate oxidation increased the growth and protein yield in mixotrophic medium that contained 150mM methanol and 20mM sodium thiosulfate, at 144 h. Respirometric study revealed that thiosulfate was the most preferable reduced inorganic sulfur source, followed by sulfite and sulfur. M. goesingense CBMB5 and M. fujisawaense CBMB37 oxidized thiosulfate directly to sulfate, and intermediate products of thiosulfate oxidation such as polythionates, sulfite, and sulfur were not detected in spent medium and they did not yield positive amplification for tested soxB primers. Enzymes of thiosulfate oxidation such as rhodanese and sulfite oxidase activities were detected in cell-free extracts of M. goesingense CBMB5, and M. fujisawaense CBMB37, and thiosulfate oxidase (tetrathionate synthase) activity was not observed. It indicated that both the organisms use the "non-S4 intermediate" sulfur oxidation pathway for thiosulfate oxidation. It is concluded from this study that M. goesingense CBMB5, and M. fujisawaense CBMB37 exhibited mixotrophic metabolism in medium containing methanol plus thiosulfate and that thiosulfate oxidation and the presence of a "Paracoccus sulfur oxidation" (PSO) pathway in methylotrophic bacteria are species dependant.
Thiobacillus neopolitanus R-10, which produces a active thiosulfate oxidase was isolated from nightsoil. The optimal culture conditions of Thiobacillus neopolitanus R-10 for the production of enzyme was determined as followed: 0.8% $Na_2S_2O_3$, 0.2% $KH_2PO_4$, 0.2% $K_2HPO_4$, 0.04% $Na_2CO_3$, 0.02% $MgSO_4$.$7H_2O$, 2ml trace elements solution, ann PH 6.5 at 3$0^{\circ}C$ and 72hr cultivation. The oxidase was successively purified 83 folds yield by ${(NH_2)}_2SO_4$ fractionation, DEAE-Cellulose, Sephadex A-50 column chromatogrophy and gel Sephadex G-150 gel filteration with yield of 5.9%. The molecular weight of purified enzyme was estimated to be 43.000 dalton by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and gel filteration column chromatography The enzyme activity was highest at 40t and PH 7.0 The enzyme activity was relatively high by $\beta$-mercaptoethanol but strongly inhibited by cysteine.
This study examined the effects of different day/night temperature regimes or silver ion on growth and flowering of passion fruit 'Tai-nung No.1'. Low temperature treatment ($20/15^{\circ}C$) caused passion fruit cultivar 'Tai-nung No.1' to fail to flower. Flowering induction occurred within a temperature range of $20-30^{\circ}C$, with no significant difference in the days to first flower bud and the total number of flower buds between plants grown at $30/25^{\circ}C$ and $25/20^{\circ}C$. However, plants grown at $30/25^{\circ}C$ exhibited their first flower buds set on the higher nodes and had higher abortion rates of flower buds than those at $25/20^{\circ}C$. Plants grown at $30/25^{\circ}C$ had the most rapid growth and the shortest plastochron. We also evaluated the effect of the ethylene response inhibitors silver nitrate ($AgNO_3$) and silver thiosulfate (STS) on growth and flowering of potted passion fruit 'Tai-nung No.1', when they were exposed to low temperature conditions ($20/15^{\circ}C$) following chemical treatments ($AgNO_3$ or STS, at 0.5 or 1.0 mM). $AgNO_3$ and STS treatments induced flower formation and initial flower bud formation within approximately two weeks at $20/15^{\circ}C$ whereas non-treated control plants exhibited no flower formation. ACC content and activity of ACC oxidase in the leaves of passion fruit 'Tai-nung No.1'exposed to low temperature conditions ($20/15^{\circ}C$) were significantly inhibited by the ethylene inhibitor treatments. These results indicate that ethylene, which is produced under low temperature conditions, plays an important role in inhibiting flower formation in passion fruit.
A study was made on enzymes of carbohydrate metabolism in T. concretivorus grown with and without glucose. The present results show that T. concretivorus possesses high activities of pentose shunt pathway and related enzymes, glucokinase, G-6-P dehydrogenase, 6-PG dehydrogenase, and phosphoglucoisomerase, but low activities of enzymes unique to EMP(fructose-1,6-diphosphate aldolase). Although the synthesis of the latter enzymes remains largely unaffected by the growth enviroment, that of the former is stimulated by glucose. And the failure to detect ED pathway enzymes in cells grown in thiosulate or thiosulfate-glucose medium eliminates the ED pathway as a significant route of glucose catabolism in T.concretivorus. These results suggest that pentose shunt pathway performs an energetic role in glucose metabolism by T.concretivorus with EMP as a subway. The absence of ED pathway and the presence of pentose shunt pathway which is the major route of catabolism in T.concretivorus are similar to those of other obligately chemolitho-trophic thiobacilli. The G-6-P and 6-PG dehydrogenase are both NAD and NADP specific, but MAD predominant. However, the 3-PGAL dehydrogenase is only NAD specific. Since the specific activity of 3-PGAL generated from glucose is converted mainly into pyruvate which is channeled into the TCA cycle. All enzymes of the TCA cycle tested and NADH oxidase are detected in the cells of T.concretivorus grown in thiosulfate. The specific activities of fumarase and isocitrate dehydrogenase are high and others are low. The presence of two isocitrate dehydrogenase (NAD-and NADP-linked) may have important regulatory function for this organism. The activity of NAD-oxidase, which is implicated in the energy generating metabolism, was very high in the crude cell-free extract of T.concretivorus, recording 55.11 m.mu. mole/min/mg protein. This well coincides with the fact that activities of NAD-linked G-6-P dehydrogenase, 6-PG dehydrogenase and 3-PGAL dehydrogenase were high.
A study was made on enzymes of carbohydrate metabolism in T. concretivorus grown with and without glucose. The present results show that T. concretivorus possesses high activities of pentose shunt pathway and related enzymes, glucokinase, G-6-P dehydrogenase, 6-PG dehydrogenase, and phosphoglucoisomerase, but low activities of enzymes unique to EMP(fructose-1, 6-diphosphate aldolase). Although the synthesis of the latter enzymes remains largely unaffected by the growth enviroment, that of the former is stimulated by glucose. And the failure to detect ED pathway enzymes in cells grown in thiosulate or thiosulfate-glucose medium eliminates the ED pathway as a significant route of glucose catabolism in T.concretivorus. These results suggest that pentose shunt pathway performs an energetic role in glucose metabolism by T.concretivorus with EMP as a subway. The absence of ED pathway and the presence of pentose shunt pathway which is the major route of catabolism in T.concretivorus are similar to those of other obligately chemolitho-trophic thiobacilli. The G-6-P and 6-PG dehydrogenase are both NAD and NADP specific, but MAD predominant. However, the 3-PGAL dehydrogenase is only NAD specific. Since the specific activity of 3-PGAL generated from glucose is converted mainly into pyruvate which is channeled into the TCA cycle. All enzymes of the TCA cycle tested and NADH oxidase are detected in the cells of T.concretivorus grown in thiosulfate. The specific activities of fumarase and isocitrate dehydrogenase are high and others are low. The presence of two isocitrate dehydrogenase (NAD-and NADP-linked) may have important regulatory function for this organism. The activity of NAD-oxidase, which is implicated in the energy generating metabolism, was very high in the crude cell-free extract of T.concretivorus, recording 55.11 m$\mu$ mole/min/mg protein. This well coincides with the fact that activities of NAD-linked G-6-P dehydrogenase, 6-PG dehydrogenase and 3-PGAL dehydrogenase were high.
When bougainvilleas are subjected to indoor low-light conditions, flower bracts regularly abscise. This study elucidates the effects of plant growth regulators on bract longevity of potted bougainvillea. Potted 'Taipei Red' bougainvillea in four different bract development stages were treated with 1-MCP (1-methylcyclopropene), NAA (1-naphthaleneacetic acid), SNA (sodium salt of naphthaleneacetic acid), IBA (indolebutyric acid), BA (6-benzylaminopurine), $KH_2PO_4$ (potassium dihydrogen phosphate), Put (diamine putrescine), SA (salicylic acid), or STS (silver thiosulfate) and were moved to indoor low-light conditions after treatments. Experimental results indicate that 1-MCP, NAA, SNA, BA, Put, and SA prolonged bract longevity, and this effect increased as bract stage increased. The effect of STS was significant in early bract stages and decreased as bract stages increased. Additionally, 1-MCP, NAA, SNA, BA, Put, SA, and STS treatment significantly reduced endogenous ACC (1-aminocyclopropene-1-carboxylate) content and ACC oxidase activity, suggesting that the inhibition of ethylene production was achieved via physiological metabolism. However, treatment with IBA or $KH_2PO_4$ had no effect on the bract longevity at any stage. In the combined chemical treatments, NAA + STS or NAA + SA were effectively for prolonging bract longevity and contained less protein or chlorophyll degradation, decrease ACC oxidase or ethylene production than the control. In conclusion, we propose that combined chemical treatment significantly prolonged the bract longevity and more effectively than single chemical treatment at any stage.
Chang, So Youn;Yoon, Joon Sik;Park, Yong Ha;Yang, Song Suk;Yoon, Seong Myeong;Lee, In Hwa;Kim, Si Wouk
Journal of Microbiology
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제35권3호
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pp.165-171
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1997
A sulfer-oxidizing bacterium was isolated from mine wastewater and characterized. The isolate was gra-negative, rod (0.2 * 1.2-1.5.mu.m), nonmotiloe, catalase positive, and oxidase prositive. The opotimal pH and temperature for growth were 7.0 and 30.deg.C. respectively. The optimum thiosulfate concentration was 70 mM and the maximum growth rate was 0.081 hr. The major ubiquinone contained in the isolate was Q-8. The cellular fatty acid composition was $C_{16 : 0}$, $C_{18 : 1}$, $C_{17cyc}$,and $C_{19cyc}$ as nonpolar fatty acids, and 3-OH C10 : 0 and 3-OH $C_{12 : 0}$ as hydroxylated fatty acids. The isolate was a facultative chemolithoautotroph which can grow autotrophically on sodium thiosulfate and sodium sulfide and which can grow heterotrophically on yeast extract. It can also grow mixotrophically on sodium thiosulfate and yeast extract. Comparison of the 16S rRNA gene sequence of the isolate with that of Thiobacillus species and Paracoccus thiocyanatus revealed that it is closely related to T. caldus which belongs to the .betha.-subclass of the class Proteobacteria. However, the isolated could not grow at extremely low pH (pH 1-3.5). On the basis of the phenotypic, chemotaxonomic and phylogenetic data, the isolate was tentatively named Thiobacillus sp. strain C.ain C.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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