Although it is well established that steroid is effective for treatment of neonatal respiratory distress syndrome (NRDS), the action mechanism of steroid on NRDS is not well known. Several authors have insisted that steroid increases secretion of pulmonary surfactant from type II pneumocyte, but others have insisted that steroid does not affect the secretory function of the type II pneumocyte. And some authors have suggested that steroid may ca use compositional change of pulmonary surfactant phospholipid. From these aspects, it is desirable to confirm the effect of steroid on (he secretory function of the type II pneumocyte. In order to know the effect of steroid on pulmonary surfactant activity, phospholipid phosphorus of lung lavage was measured and composition of pulmonary surfactant phospholipid of lung lavage was analyzed by thin layer chromatography (TLC) in control (C), pneumonectomized (PN), and pneumonectomized with betamethasone treated (PNS) rabbits. And lung weight and lung weight-body weight ratio were measured in each experimental group also. In PN group, right lung pneumonectomy was performed under general anesthesia with pentobarbital sodium (30mg/kg). On the fifth day after the surgery, the left lung was excised and measured above parameters. In PNS group, pneumonectomy was performed as PN group, and one day after the surgery, betamethasone was injected for four days intramusculary (4mg/day) and rabbits were sacrificed. The experiment yielded following results. PNS group's lung weight was significantly (p<0.01) heavier than C group's, but in comparison with PN group's it showed no significant change. PNS group's L/B ratio was significantly (p<0.05) higher than C group's, but compared with PN group's it showed no significant change. The value of phospholipid phosphorus content of PNS group was significantly (p<0.01) higher than that of C group. Even if the value of phospholipid phosphorus content in PNS group was not significantly higher than that of PN group, it showed increasing tendency compared with that of PN group. And in an analysis of the thin layer chromatogram, quantity (${\mu}mol/gm$ of wet weight lung) of phosphatidylcholine in PNS group decreased significantly (p<0.05) compared with C and PN group. From these results, it may be suggested that though steroid inhibits cellular hyperplasia in the compensatory growing lung, it auguments the secretory function of type II pneumocyte and causes compositional change of pulmonary surfactant phospholipid.
In this study, we establish a thin-layer chromatography (TLC) immunostaining method for detecting starfish gangliosides. A new monoclonal antibody (MAb) against AG-2, the major gangliosides molecular species of Acanthaster planci, was produced by fusing hybridoma with splenocytes immunized to liposomal AG-2. BALB/c male mice were injected with liposomal AG-2 antigen, and immunized. Their splenocytos were isolated and fused with hypoxanthine-aminopterine-thimidine (HAT)-sensitive mouse myeloma cells. Hybridomas producing MAb reactive to AG-2 were cloned using the limited dilution method. Established hybridomas were cultured in eRDF medium. Crude MAb produced from clone 8D4 was purified with a magnesium pyrophosphate column. Enzyme immunoassay and TLC immunostaining of AG-2 were performed using the purified MAb. Structurally related gangliosides did not cross-react with anti-AG-2 antibodies. The detection limit of TLC immunostaining was 50 ng of AG-2. The newly established immunostaining method was further developed for detecting AG-2 distribution and qualitative analysis in tissues and/or organs. Our results show that the majority of AG-2 is present in the stomach of male A. planci, while AG-2 is distributed not only in the stomach but also in the the pyloric caeca of female A. planci.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.34
no.4
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pp.954-961
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2017
We investigated the purifications of PE-gal and CPN-gal, synthesized by transgalactosylation reaction using recombinant ${\beta}$-gal. The reaction mixture containing PE and PE-gal was first mixed with EA, and thereafter PE and PE-gal were distributed in two-phase (EA/water) system. In this system, PE and PE-gal was selectively moved into EA and water phase, respectively. Then, the water phase was collected, and silica gel chromatography was carried out using the collected water phase. Finally, we compared two purified PE-gal samples using HPLC and TLC analysis, in which the one was purified only by silica gel chromatography and the other was purified by EA extraction followed by silica gel chromatography. In the latter case, the residual PE was almost completely removed, whereas, in the former case, the residual PE was remained remarkably. Additionally, the purification yield of PE-gal was about 21% on the basis of mole. In the same purification protocol, CPN-gal was able to be purified using EA extraction followed by silica gel chromatography, in which the residual CPN was almost removed when CPN-gal was purified by EA extraction followed by silica gel chromatography.
Antimicrobial activity of Jakyak(Paeonia japonica var. pilosa $N_{AKAI}$) was investigated. Methanol extract of dried Jakyak was fractionated to hexane, chloroform, ethylacetate, butanol and aqueous fraction. Ethylacetate fraction among these fractions showed the highest inhibitory effect on the microorganisms such as B. subtilis, L. monocytogenes, and V. parahaemolyticus at 500 $\mu\textrm{g}$/disc. Ethylacetate fraction was further fractionated into 11 fractions by silica gel column and thin layer chromatography(TLC). The results showed that ethylacetate fractions No. 3, 4 and 5 had the highest antimicrobial activity. They were mixed again, re-separated, and 5 fractions were obtained. Among them, the highest inhibitory effect was obtained in No. 3 fraction, which was identified as cetyl alcohol by HPLC and GC-MS.S.
Rhizomes of the common reed (Phragmites communis Trin.) were incubated for three days in the dark. Methanol extract of the shoots was thin layer chromatographed with several solvent systems and visualized with five reagents. The results may be summarized as follows: 1. Serotonin, tryptophan, and tryptamine were identified by cochromatography with the respective authentic compounds. Bufotenine, N-methylserotonin, and N,N-dimethyltryptamine were tentatively identified by their Rf values and colour reactions. The presence of skatole and gramine was suggested. 2. It was esteemed that the common reed might have an active methylation/hydroxylation system of indole compounds at least for a period of time. 3. The presently devised 'overlap' thin layer chromatographic technique may be a useful tool for the identification of a compound whose Rf value was diverse from that of the authentic one by the interferance containing in a sample material.
In order to identify the sugars of saponin originated from Korean ginseng, experimentations were made on the four kinds of ginseng. The results are summarized as follows. 1. The starch content of Ginseng-tail, White-ginseng 3 and 6 years old-whole ginseng were 10.4, 31.5, 8.2, 25.6% and total sugar of its were 37.0, 61.5, 64.5, 62.5% and free sugar were 7.6, 10.5, 11.3, and 10.7% respectively. 2. Saponins were separated from Ginseng-tail, White-ginseng, 3 and 6 years old-whole ginseng by modified SHIBATA method. looms of crude saponin was used for the Thin layer Chromatography (TLC) and thirteen to twelve spots of saponin were isolated by double development $(Solvent:\;CHCL_3\;:\;MeOH\;:\;H_2O=65\;:\;35\;:\;10)$ and by two dimensional development. $(Solvent:\;nBuOH\;:\;HOAC\;:\;H_2O=4\;:\;1\;:\;5)$ The Pattern of spot was not significantly different according to Ginseng sample. 3. Glucose was identified from the acid-hydrolyzate of Ginsen-tail saponin by paper chromatography and isolated the unknown chromatogram seems to be pentose.
Lipids of Kidney bean were extracted by the mixture of chloroform-methanol-water (1:2:0.8, v/v) and from these lipids, triglycerides were separated by thin-layer chromatography(TLC) and then reseparated into different fractions by high performance liquid chromatography (HPLC) depending on the polarity of the triglycerides. The triglyceride and fatty acid composition of these fractions were determined by gas liquid chromatography (GLC). From these results, the major triglycerides of Kidney bean lipids were estimated to be $C_{18:2}C_{18:3}C_{18:3}$ (26.6%), $C_{18:2}C_{18:2}C_{18:3}$ (18.5%), $C_{18:3}C_{18:3}C_{18:3}$ (14.9%).
Xu, Ming Lu;Wang, Lan;Hu, Jian He;Wang, Myeong-Hyeon
Preventive Nutrition and Food Science
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v.14
no.4
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pp.354-357
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2009
Three compounds, vanillic acid, p-hydroxylcinnamic acid, p-hydroxybenzaldehyde have been isolated from the ethylacetate extract of Sparganium stoloniferum Buch.-Ham roots using silica gel open column chromatography, preparative thin-layer chromatography (pTLC) and reverse phase high performance liquid chromatography. The structures of the compounds were established on the basis of IR, extensive 1D NMR, and MS analyses. The ethylacetate (EtOAc) extract, vanillic acid, and p-hydroxybenzaldehyde showed $\alpha$-glucosidase inhibition activity of 72.71%, 20.13%, and 30.42%, at the concentration of 10 ${\mu}g/mL$, respectively. The EtOAc extract exhibited strong antioxidant activity with an $IC_50$ value of 24.37 ${\mu}g/mL$ against DPPH radical scavenging activity, the vanillic acid, p-hydroxylcinnamic acid, and p-hydroxybenzaldehyde with an $IC_50$ value of 2.10 ${\mu}M$, 1.59 ${\mu}M$, and 2.72 ${\mu}M$ against DPPH, respectively.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.33
no.2
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pp.255-263
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2016
Antimicrobial properties of Licorice(Glycyrrhizae radix L.) against food spoilage microorganism, Bacillus subtilis KCTC 1021 was investigated. Antibacterial activity of the essential oil was as equivalent as Potassium metabisulfite and myconazole. The licorice extracts was fractionated to hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water fraction. Chloroform fraction showed the highest inhibitory effect on the Bacillus subtilis KCTC 1021. Chloroform fraction was further fractionated by silica gel column chromatography and thin layer chromatography(TLC). The antibacterial compound was isolated from their fractions and its chemical structures was identified as (R)-glabridin by ESI-MS, $^1H$-NMR and $^{13}C$-NMR.
Sterol compositions of three solanaceous plant seed oils i.e., tobacco(Nicotiana tabacum L.), datura (Datura stramonium L.) and Chinese lycium (Lycium chinense Mill.) were analyzed by thin layer chromatography, gas liquid chromatography and gas liquid chromatography-mass spectrometry. Cholesterol, cholest-7-enol, campesterol, 24-methylenecholesterol, stigmasterol, sitosterol, and 28-isofucosterot were identified in 4-des-methylsterol fraction. 31-Norlanost-8-enol, $4{\alpha}$-methylcholest-8-enol, lophenol, 31-norlanosterol, obtusifoliol, 31-norcycloartenol, cyloeucalenol, gramisterol (24-methylenelophenol), and citrostadienol in 4-monomethylsterol fraction, and lanost-8-enol, cycloartanol, lanosterol, ${\beta}$-amyrin, 24-methylenelanost-8-enol, cycloartenol, lupeol and 24-methylenecycloartanol in 4,4-dimethylsterol fraction were identified respectively.
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