Takahashi, J.;Mwenya, B.;Santoso, B.;Sar, C.;Umetsu, K.;Kishimoto, T.;Nishizaki, K.;Kimura, K.;Hamamoto, O.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.18
no.8
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pp.1199-1208
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2005
Abatement of greenhouse gas emitted from ruminants and promotion of biogas energy from animal effluent were comprehensively examined in each anaerobic fermentation reactor and animal experiments. Moreover, the energy conversion efficiency of biomass energy to power generation were evaluated with a gas engine generator or proton exchange membrane fuel cell (PEMFC). To mitigate safely rumen methanogenesis with nutritional manipulation the suppressing effects of some strains of lactic acid bacteria and yeast, bacteriocin, $\beta$1-4 galactooligosaccharide, plant extracts (Yucca schidigera and Quillaja saponarea), L-cysteine and/or nitrate on rumen methane emission were compared with antibiotics. For in vitro trials, cumulative methane production was evaluated using the continuous fermented gas qualification system inoculated with the strained rumen fluid from rumen fistulated Holstein cows. For in vivo, four sequential ventilated head cages equipped with a fully automated gas analyzing system were used to examine the manipulating effects of $\beta$1-4 galactooligosaccharide, lactic acid bacteria (Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides), yeast (Trichosporon serticeum), nisin and Yucca schidigera and/or nitrate on rumen methanogenesis. Furthermore, biogas energy recycled from animal effluent was evaluated with anaerobic bioreactors. Utilization of recycled energy as fuel for a co-generator and fuel cell was tested in the thermophilic biogas plant system. From the results of in vitro and in vivo trials, nitrate was shown to be a strong methane suppressor, although nitrate per se is hazardous. L-cysteine could remove this risk. $\beta$1-4 galactooligosaccharide, Candida kefyr, nisin, Yucca schidigera and Quillaja saponarea are thought to possibly control methanogenesis in the rumen. It is possible to simulate the available energy recycled through animal effluent from feed energy resources by making total energy balance sheets of the process from feed energy to recycled energy.
A 990 bp full-length gene (xynAHJ2) encoding a 329-residue polypeptide (XynAHJ2) with a calculated mass of 38.4 kDa was cloned from Bacillus sp. HJ2 harbored in a saline soil. XynAHJ2 showed no signal peptide, distinct amino acid stretches of glycoside hydrolase (GH) family 10 intracellular endoxylanases, and the highest amino acid sequence identity of 65.3% with the identified GH 10 intracellular mesophilic endoxylanase iM-KRICT PX1-Ps from Paenibacillus sp. HPL-001 (ACJ06666). The recombinant enzyme (rXynAHJ2) was expressed in Escherichia coli and displayed the typical characteristics of low-temperature-active enzyme (exhibiting optimum activity at $35^{\circ}C$, 62% at $20^{\circ}C$, and 38% at $10^{\circ}C$; thermolability at ${\geq}45^{\circ}C$). Compared with the reported GH 10 low-temperature-active endoxylanases, which are all extracellular, rXynAHJ2 showed low amino acid sequence identities (<45%), low homology (different phylogenetic cluster), and difference of structure (decreased amount of total accessible surface area and exposed nonpolar accessible surface area). Compared with the reported GH 10 intracellular endoxylanases, which are all mesophilic and thermophilic, rXynAHJ2 has decreased numbers of arginine residues and salt bridges, and showed resistance to $Ni^{2+}$, $Ca^{2+}$, or EDTA at 10 mM final concentration. The above mechanism of structural adaptation for low-temperature activity of intracellular endoxylanase rXynAHJ2 is different from that of GH 10 extracellular low-temperature-active endoxylanases. This is the first report of the molecular and biochemical characterizations of a novel intracellular low-temperature-active xylanase.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.21
no.2
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pp.63-70
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2013
Experiments in a pilot-scale hybrid multi-stage unit system (HMUS) combination of ATAD and EGSB followed by SBR process for pig slurry treatment were conducted to demonstrate the feasibility of using autothermal thermophilic aerobic digestion (ATAD) and expended granular sludge bed (EGSB) followed by sequencing batch reactor (SBR) system. Contaminants in pig slurry with high organic matter, nitrogen (N) and phosphorus (P) content were completely removed in the combined process. The highest removal rate for CODcr among contaminants in the feed pig slurry was attained by about 43.3% in ATAD unit process. Also TS removal rate of 96.5% was attained and the highest in the next coagulation unit process. The highest removal rate of CODcr under operating parameter conditions of OLR(organic loading rate), 3-6Kg $COD/m^3{\cdot}day$ and line velocity, 1.5-4m/h was earned at 3days of HRT. The disinfection of pathogens was effective at 50,000mg/L of TS in ATAD unit process. Biogas production per organic removal was $2.3{\sim}8.5m^3/kgTS{\cdot}d$ (average $5.2m^3/kgTS{\cdot}d$) in EGSB unit process. The average removal rates of CODcr 71.7%, TS 64.1%, TN 45.9%, and TP 50.4% were earned in the intermittent aeration SBR unit process.
A microorganism (strain AR1) producing an extracellular lipolytic enzyme was isolated from hot springs located in Beppu, Japan. Phylogenetic analysis based on the 16S rDNA sequence and biochemical studies indicated that AR1 belongs to the genus Geobacillus. This study focused on novel strategies to increase extracellular lipolytic enzyme production by this novel Geobacillus sp. AR1. Cultures of the AR1 strain grew within a wide temperature range (from 35 to $75^{\circ}C$); the optimum temperature was $65^{\circ}C$. The pH for optimal growth was 6.5, whereas the optimum pH for lipolytic enzyme production was 8.5. The presence of oils in the culture medium led to improvements in lipolytic enzyme activity. Soybean oil was the most efficient inducer, and it yielded better results when added in the exponential phase. On the other hand, the addition of chemical surfactants led to lipolytic enzyme production. Their addition to the culture could affect the location of the enzyme activity. The addition of Tween 20 in the stationary phase significantly increased the proportion of the extracellular enzyme activity. According to the results, following the addition of soybean oil and Tween 20 in the exponential and stationary phases, the extracellular lipolytic activity was increased 2.4-fold compared with that of a control.
Economic feasibility is one of the most important factors in energy production from regenerative biomass. From the aspect, biogas from anaerobic digestion of wastewater sludge is regarded as the most economical because of its cheap substrate and additional income from the disposal of waste sludge. Sludge hydrolysis has been regarded as the rate limiting step of anaerobic digestion and many sludge pre-treatment technologies have been developed to accelerate anaerobic sludge digestion for enhanced biogas production. Various sludge pre-treatment technologies including biological, thermo hydrolysis, ultrasonic, and mechanical methods have been applied to full-scale systems. Sludge pre-treatment increased the efficiency of anaerobic digestion by enhancing hydrolysis, reducing residual soilds, and increasing biogas production. This paper introduces the characteristics of various sludge pre-treatment technologies and the energy balance and economic feasibility of each technology were compared to prepare a guideline for the selection of feasible pre-treatment technology. It was estimated that thermophilic digestion and thermal hydrolysis were most economical technology followed by Cell rupture$^{TM}$, OpenCEL$^{TM}$, MicroSludge$^{TM}$, and ultrasound. The cost for waste sludge disposal shares the biggest portion in the economic analysis, therefore, water content of the waste sludge was the most important factor to be controlled.
We isolated 120 strains of wild yeasts from the water and riverside soils of Daejeoncheon and Gapcheon in Daejeon, Korea. We identified Debaryomyces udenii JSF601, Kazachstania telluris JSF602, Trichosporon faecale JSF614, Candida infanticola WJSL0039, Candida palmioleophila WJSL0048, Pichia spartinae WJSL0087, and Trichosporon coprophilum WJSL0093 from Daejeoncheon, and Leucosporidium golubevii WJSL0108 and Ustilentyloma graminis WJSL0118 from Gapcheon, as newly recorded yeast strains in Korea and investigated their microbiological characteristics. All of these previously unrecorded yeasts were oval- or ellipsoidal-shaped with ascospores, except C. infanticola WJSL0039, C. palmioleophila WJSL0048, and D. udenii JSF601. L. golubevii WJSL0108 and U. graminis WJSL0118 grew in vitamin-free medium, and C. infanticola WJSL0039 was halotolerant and grew in 10% NaCl-containing YPD broth. K. telluris JSF602 and P. spartinae WJSL0087 were thermophilic yeasts, which grew at $37^{\circ}C$.
Kim Gon-Sup;Jung Tae-Sung;Shin Gee-Wook;Han Dae-Young;Cha Hye-Jin;Kim Yong-Hwan
Journal of Veterinary Clinics
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v.23
no.1
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pp.41-49
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2006
In this study, antimicrobial activity of oriental herbal medicine extract (OHME) was tested for some organisms and the preventive effects of OHME for the colonization of Campylobacter jejuni on epithelium of small intestine were examined in Korean native broiler chickens fed a forage added 1.0% OHME. The isolated Campylobacter spp were biotyped, serotyped and the susceptiblility of isolates to antimicrobial agent were examined. The growth of Staphylococcus aureus was inhibited in 0.25% OHME. C. jejuni and C. coli were inhibited in 0.1% OHME, and Salmonella spp, Lactobacillus acidophilus and Escheichia coli 0157 were inhibited in 2.0% OHME. For the application of forage added 1.0% OHME in broiler chicken farm, the frequency of Campylobacter spp from feces, liver and spleen sample of chickens were examined during 2 weeks interval. The frequence of Campylobacter spp in feces from chickens fed assorted forage (control group) was increased from 25% in first week to 75% in seventh week. But the frequence of Campylobacter spp in feces sample from chickens 134 forage added OHME was slightly reduced from 25% in first week to 15% in seventh week. The frequence of Campylobacter spp in liver, and spleen was 13.7% and 10% respectively after seventh week in control group, but the Campylobacter spp was not isolated after fifth week in live and spleen from chickens fed forage added OHME. Isolated 56 strains of thermophilic Campyiobacter from Korean native chickens was classified as C. jejuni (76.7%), C. coli (214%) and C. laridis (1.6%). The majority of 43 isolates of C. jejuni was classified on biotype I (60.4%), II (30.2%). Most of 12 isolates of C.coli were biotype I (83.3%). Isolated 31 strains C. jejuni of showed 11 different serotype, and serotype 36 (18.6%), 17 (13.9%)were most frequent. Isolated 10 strains of C. coli showed 5 different serotypes and serotype 31 (33.3%) and 21 (25%) were relatively common. Isolated Campylobacter spp were highly susceptible to nalidixic acid, amikacin, gentamicin, colistin and chloramphenucol.
This experiment was carried out to obtain a hybrid with potent ethanol fermenting ability, by means of protoplast fusion between a thermophilic strain (D-71) of Saccharomyces cerevisiae and an osmotolerant strain (SR-S) of Zygosaccharomyces rouxii. The conditions for formation of protoplasts from both strains and for their fusion and regeneration were studied. Favorable conditions for formation of protoplasts from Saccharomyces cerevisiae D-71 were : treatment of the cells at late-exponential phase with 2-mercaptoethanol (l% v/v) for 10 minutes in the presence of 0.5M sorbitol, then incubation for 60 minutes in the set medium containing Zymolyase-20T (4mg/$m\ell$) ; and from Zygosaccharomyces rouxii SR-S were : treatment of the cells at mid-exponential phase with 2-mercaptoethanol (1% v/v) for 10 minutes in the presence of 0.5M or 1M mannitol, then incubation for 120 minutes in the set medium containing Zymolyase-20T(4mg/$m\ell$). The protoplasts of parental cells were fused in the presence of 20mM CaCl$_2$, 0.5M sorbitol and 40% of polyethyleneglycol (M.W 4000), then fusants obtained were selected as regenerated colonies which embedded and grown in the minimal medium containing 3% of agar. The frequencies of fusant formation were 1.2$\times$10$^{-6}$ to 9.1$\times$10$^{-6}$ for the regenerated protoplast.
Totally 91 strains of wild yeasts were isolated from the humus rich soil in the Bogyong city park of Daejeon city, Korea. Majority of the strains belonged to Cryptococcus spp., which included 11 strains of Cryptococcus aureus. Among them, Kwoniella mangroviensis JSS0500, Candida corydalis JSS0501, Candida bombi JSS0503, Candida multigemmis JSS0504, Cryptococcus dimennae JSS0506, Cryptococcus saitoi JSS0507, Cryptococcus victoriae JSS0508, Metschnikowia pulcherrima JSS0502, Papiliotrema aurea JSS0505, Debaryomyces vanrijia JSS0509, Occultifur externus JSS0510, Filobasidium floriforme JSS0511 and Yamadazyma scolyti JSS0512 represented newly recorded yeast strains in Korea, and their microbiological characteristics were investigated. All of these unrecorded yeasts showed oval shape and also formed ascospores and pseudomycelia, except for Kwoniella mangroviensis JSS0500, Candida bombi JSS0503, and Metschnikowia pulcherrima JSS0502. Seven strains including Candida corydalis JSS0501 grew in vitamin-free medium, and 4 of the wild yeasts including Cryptococcus victoriae JSS0508 were halotolerant, i.e., capable of growing in 10% NaCl-containing yeast extract-peptone-dextrose (YPD) broth. Debaryomyces vanrijia JSS0509 was found to be a thermophilic yeast that grew at $37^{\circ}C$.
For the optimization of thermal processing conditions in soymilk process, 4 strains of thermoresistant flat-sour bacteria were isolated from soymilk. The isolates were aerobic spore-forming rods, and grew at $-65^{\circ}C$. Based on the morphological and physiological properties, all of the isolated strains were identified as Bacillus stearothermophilus. The heat resistance of spores of 3 isolates and Bacillus stearothermophillus ATCC 12980 as a reference was determined in soymilk(pH 7.0) and pH 7.0 buffer solution. For each of the spores studied, linear regression equations with standard error were presented for the thermal destruction at 110, 115, 121, and $125^{\circ}C$. It was not obvious that the components of soy milk increased the heat resistance of spores. Between the strains studied, variability was noted in the D values at the different temperature, and no one strain was consistently the most heat resistant at all the given temperatures. The average D value for the 4 strains was 77.27, 20.20, 2.76 and 1.39 min at 110, 115, 121 and $125^{\circ}C$, respectively, and the average z value was $8.36^{\circ}C$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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