This study was conducted to investigate the effect of different surface soil management practices on soil microflora in volcanic ash soils of citrus orchard. Soil samples were collected from citrus orchards of clean cultivation, grass sod, and grass mulch system in May and September 1997. Soil chemical properties, populations of various microorganisms, enzyme activities, microbial biomass C were analyzed. Average soil pH were 4.7, and average nitrogen and organic matter contents were 6 and $140.2g\;kg^{-1}$, respectively. Aerobic bacteria were distributed at $26,2-47.3{\times}10^6cfu\;g^{-1}$ level. Among the aerobic bacteria Pseudomonas spp., Rhizobium spp., and thermophilic Bacillus spp. were dominant in most of the investigated orchard soils. Density of actinomycetes were low at $1.8-84.6{\times}10^5cfu\;g^{-1}$ level. Fungi were distributed at $26.4-182.1{\times}10^5cfu\;g^{-1}$ level and the density was higher in grass mulch and sward sites. In september, phosphomonoesterase activity was high at $239.6{\mu}g\;PNP\;g\;soil^{-1}\;h^{-1}$ in clean cultivated citrus orchards. Soil cellulase activity were higher at $602.6{\mu}g\;GE\;g\;soil^{-1}$\;24\;h^{-1}$ in grass sward cultivation than any other soil management practices. Soil microbial biomass C was higher in grass mulch cultivated orchards.
Microbial metal reduction influences the biogeochemical cycles of carbon and metals as well as plays an important role in the bioremediation of metals, radionuclides, and organic contaminants. The use of bacteria to facilitate the production of magnetite nanoparticles and the formation of carbonate minerals may provide new biotechnological processes for material synthesis and carbon sequestration. Metal-reducing bacteria were isolated from a variety of extreme environments, such as deep terrestrial subsurface, deep marine sediments, water near Hydrothemal vents, and alkaline ponds. Metal-reducing bacteria isolated from diverse extreme environments were able to reduce Fe(III), Mn(IV), Cr(VI), Co(III), and U(VI) using short chain fatty acids and/or hydrogen as the electron donors. These bacteria exhibited diverse mineral precipitation capabilities including the formation of magnetite ($Fe_3$$O_4$), siderite ($FeCO_3$), calcite ($CaCO_3$), rhodochrosite ($MnCO_3$), vivianite [$Fe_3$($PO_4$)$_2$ .$8H_2$O], and uraninite ($UO_2$). Geochemical and environmental factors such as atmospheres, chemical milieu, and species of bacteria affected the extent of Fe(III)-reduction as well as the mineralogy and morphology of the crystalline iron mineral phases. Thermophilic bacteria use amorphous Fe(III)-oxyhydroxide plus metals (Co, Cr, Ni) as an electron acceptor and organic carbon as an electron donor to synthesize metal-substituted magnetite. Metal reducing bacteria were capable of $CO_2$conversion Into sparingly soluble carbonate minerals, such as siderite and calcite using amorphous Fe(III)-oxyhydroxide or metal-rich fly ash. These results indicate that microbial Fe(III)-reduction may not only play important roles in iron and carbon biogeochemistry in natural environments, but also be potentially useful f3r the synthesis of submicron-sized ferromagnetic materials.
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2001.11a
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pp.46-53
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2001
A commensal thermophile, Symbiobacterium toebii, isolated from hay compost (toebii) in Korea commensally interacted with a thermophilic Geobacillus toebii sp. nov., which was a new species within the genus Geobacillus on the basis of the phenotypic traits and molecular systematic data. S. toebii required the crude extracts and/or culture supernatant of the Geobacillus toebii for axenic growth and could grow on the temperature between 45 and $70^{\circ}C$ (optimum: $60^{\circ}C$; 2.4 h doubling time) and pH 6.0 and 9.0 (optimum: pH 7.5). The G+C content of the genomic DNA was $65 mol\%$, and the major quinones were MK-6 and MK-7. A phylogenetic analysis of its 16S rDNA sequence indicated that Symbiobacterium toebii was closely related with solely reported Symbiobacterium thermophilum. The presence of the commensal thermophile 16S rDNA and accumulation of indole in all the enriched cultures indicate that Symbiobacterium toebii is widely distributed in the various soils. The genome of S. toebii constituted a circular chromosome of 3,280,275 base pairs and there was not an extra-chromosomal element (ECE). It contained about 4,107 predicted coding sequences. Of these protein coding genes, about $45.6\%$ was encoded well-known proteins and annotated the functional assignment of 1,874 open reading frames (ORFs), and the rest predicted to have unknown functions. The genes encoding thermostable tyrosine phenol-lyase and tryptophan indole-lyase were cloned from the genomic DNA of S. toebii and the enzymatic production of L-tyrosine and L-tryptophan was carried out with two thermostable enzymes overexpressed in recombinant E. coli.
Kim, Young-Il;Jeong, Se-Hyung;Seok, Joon-Sang;Yang, Si-Yong;Huh, Jung-Won;Kwak, Wan-Sup
Journal of Animal Science and Technology
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v.50
no.5
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pp.713-720
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2008
This study was conducted to isolate and identify xylanase- and cellulase-producing thermophilic bacteria from stacked spent mushroom substrates and to determine the optimal medium conditions for their growth. Bacteria with the highest xylanase and CMCase activities were strain 3 and 201-7. Both of them were identified as Bacillus spp. and named Bacillus subtilis KU3 and Bacillus subtilis KU201-7. The optimal medium condition of Bacillus subtilis KU3 was obtained when 3%(w/v) of yeast extract and 1%(w/v) of maltose were used as nitrogen and carbon sources, respectively. That of Bacillus subtilis KU201-7 was obtained when 0.5%(w/v) of yeast extract and 0.5%(w/v) of CMC were used as nitrogen and carbon sources, respectively.
HAN Bong-Ho;CHO Hyun-Duck;YU Hong-Sik;KIM Sang-Ho;CHUNG Youn-Soo
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.27
no.6
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pp.675-681
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1994
[ $F_0$ ]-values of the canned tuna in cottonseed oil (CTCO) were investigated under different sterilizing conditions to optimize the energy consumption and microbiological safety. The $F_0$-values were measured using a microcomputer based technique. The exact cold point was not the volumetric center of the cans, and it was located in the center of meat mass in can which had ca. $6\%$ of head space. Location of the test cans in retort showed no remarkable influence on the $F_0$-values when the cans were jumble loaded. The process time before sterilization should be shortened as much as possible to prevent the contamination of microorganisms. Thermophilic spore forming bacteria found from raw and precooked tuna were Bacillus subtilis, Bacillus cereus and Bacillus pasteurii, and the most heat resistant was Bacillus subtilis. The rational $F_0$-value for the CTCO obtained from the preservation test was regarded as 6min.
Park, Yongjin;Tsuno, Hiroshi;Hidaka, Taira;Kim, SeogKu
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.15
no.2
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pp.89-97
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2007
In this study, thermalpretreatment was used to solubilize organic matter contained in sewage sludge before acid fermentation. By thermal pretreatment, solubilization of particulate CODcr, carbohydrate and protein increased. By thermal treatment at $120^{\circ}C$ for 30 minutes, CODcr solubilization efficiency of the primary sludge reached 8.3%. Meanwhile, for the secondary sludge, CODcr solubilization efficiency reached 16.5% because of high solubilization ratio of protein under the same pretreatment conditon. The results of anaerobic biodegradability test showed that both VFAs conversion ratio and hydrolysis rate of organic compounds in sewage sludge were improved by thermal pretreatment. Meanwhile, the optimum thermal pretreatment condition was varied with composition of organic compounds in sludge. In this study, the optimun thermal pretreatment condition of the primary sludge, containing high concentration of carbohydrate, was $80^{\circ}C$ for 30 minutes. Meanwhile, for the secondary sludge, mainly composed of protein, the sludge treated at $120^{\circ}C$ for 30 minutes showed the effective organic removal and VFAs production.
1) Two xylanase (designed as A and B) of Myriococcus albomyces were purified from an extract of wheat koji culture. Puriscation steps included first ammonium sulfate fractionation followed successively by SE-Sephadex column chromatgraphy. DEAE-Sephadex column chromatography and gel filtration on Sephadex G-100 repectively. 2) The optimum pH and pH stability for crude xylanse were found to be pH 5.0 and pH 4.0-7.0 respectively. 3) The optimium temperature was found to he 5$0^{\circ}C$ and for the thermal statbility of xylanase, the enryme incubated at $65^{\circ}C$ for 60min did not affect their stability. 4) The purised xylanase A and B were considered as liquefying xylanase and saccharogenic xylauase repectively. 5) The Bylanase A was most active at pH 4.0 and range of pH 3.0-8.0 at 3$0^{\circ}C$ for six hrs. The B was most active at pH 5.0 showing stability range of pH 4.0 to 8.5 at 3$0^{\circ}C$ for 6 hrs. incubation respectively. The Optimum temperature of xylanase A and B were found to be 7$0^{\circ}C$ and $65^{\circ}C$ for 60min repectively.
Microorganism (strain DF 218) producing thermostable pretense was isolated from Korean soil and compost. It was Gram-positive, rod-shaped, aerobic, and spore-forming with yellowish white colony color, Temperature range for growth at pH 6.5 was $30-65^{\circ}C$, with optimum growth at $60^{\circ}C$. pH range for growth at $60^{\circ}C$ was 5-7 with optimum of 6.5, which indicates strain DF 218 to be thermophilic. The 16S rDNA sequence of strain DF 218 had 95% sequence similarity with that of Bacillus flexus. Based on physiological properties and phylogenetic analysis, we proposed the isolated strain as Bacillus sp. DF 218. Pretense was produced aerobically at $60^{\circ}C$ for 32 hr in a medium (pH 6.5) containing 1% each trypton, glucose, and NaCl. Its molecular weight was estimated as 61 kDa, with optimum temperature and pH of $60^{\circ}C$ and 7.5, respectively.
est19 is a gene from Bacillus sp. K91 that encodes a new esterase. A comparison of the amino acid sequence showed that Est19 has typical Ser-Gly-Asn-His (SGNH) family motifs and could be grouped into the SGNH hydrolase family. The Est19 protein was functionally cloned, and expressed and purified from Escherichia coli BL21(DE3). The enzyme activity was optimal at 60℃ and pH 9.0, and displayed esterase activity towards esters with short-chain acyl esters (C2-C6). A structural model of Est19 was constructed using phospholipase A1 from Streptomyces albidoflavus NA297 as a template. The structure showed an α/β-hydrolase fold and indicated the presence of the typical catalytic triad Ser49-Asp227-His230, which were further investigated by site-directed mutagenesis. To the best of our knowledge, Est19 is a new member of the SGNH hydrolase family identified from thermophiles, which may be applicable in the industrial production of semisynthetic β-lactam antibiotics after modification.
The enzyme xylose isomerase (E.C. 5.3.1.5, XI) is responsible for the conversion of an aldose to ketose, especially xylose to xylulose. Owing to the ability of XI to isomerize glucose to fructose, this enzyme is used in the food industry to prepare high-fructose corn syrup. Therefore, we studied the characteristics of XI from Anoxybacillus kamchatkensis G10, a thermophilic bacterium. First, the gene coding for XI (xylA) was inserted into the pET-21a(+) expression vector and the construct was transformed into the Escherichia coli competent cell BL21 (DE3). The expression of recombinant XI was induced in the absence of isopropyl-thio-${\beta}$-galactopyranoside and purified using Ni-NTA affinity chromatography. The optimum temperature of recombinant XI was $80^{\circ}C$ and measurement of the heat stability indicated that 55% of residual activity was maintained after 2 h incubation at $60^{\circ}C$. The optimum pH was found to be 7.5 in sodium phosphate buffer. Magnesium, manganese, and cobalt ions were found to increase the enzyme activity; manganese was the most effective. Additionally, recombinant XI was resistant to the presence of $Ca^{2+}$ and $Zn^{2+}$ ions. The kinetic properties, $K_m$ and $V_{max}$, were calculated as 81.44 mM and $2.237{\mu}mol/min/mg$, respectively. Through redundancy analysis, XI of A. kamchatkensis G10 was classified into a family containing type II XIs produced by the genera Geobacillus, Bacillus, and Thermotoga. These results suggested that the thermostable nature of XI of A. kamchatkensis G10 may be advantageous in industrial applications and food processing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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