The purpose of the present study is to examine the effect of cell proliferation and alkaline phosphatase activity in osteoblastic cells and to compare the bone healing ability of rat calvarial defects between the control group and the safflower seed extract treated group. Osteoblastic cells were obtained from calvariae of a fetal rat. Cells were cultured containing DMEM and safflower seed extract ($10^{-6}g/ml$, $10^{-3}g/ml$) at $37^{\circ}$ with 5% $CO_2$ in 100% humidity for 3 days. MTT was performed to examine the viability of the cells, and alkaline phosphatase activity was analyzed to examine the mineralization in vitro. Rat calvarial defects($5{\times}5mm$) in 250g Sprague-Dawly were made using round bur. Rats were administrated with safflower seed extract(0.35g/kg/day) for experimental periods. Calvarial defects were studied histopathologically and immunohistochemically at 1,4, and 8 weeks. High concentration group($10^{-3}g/ml$) of safflower seed extract significantly increased in the cell proliferation and alkaline phos phatase synthesis in osteoblastic cells. The infiltration of inflammatory cells and osteoclastic activities were decreased in the safflower seed extract treated group as compared with control group. Bone maturation was accelerated in the safflower seed extract treated group as compared to control group. No difference in osteoinductive process was observed between the control and the safflower seed extract treated group. Immunohistochemical observation revealed that protein expression of TGF-$\beta$and osteonectin during early healing phase in the safflower seed extract treated group was slightly increased as compared to control group. These results indicate that safflower seed extract promotes the healing process in bony defect of rat calvariae, and retains a potential applicability as an adjuvant therapeutic modality for regeneration of periodontal bony defect.
Background: Bone injury is common in many clinical situations, such as surgery or trauma. During surgery, excessive reactive oxygen species (ROS) production decreases the quality and quantity of osteoblasts. Remifentanil decreases ROS production, reducing oxidative stress and the inflammatory response. We investigated remifentanil's protective effects against $H_2O_2$-induced oxidative stress in osteoblasts. Methods: To investigate the effect of remifentanil on human fetal osteoblast (hFOB) cells, the cells were incubated with 1 ng/ml of remifentanil for 2 h before exposure to $H_2O_2$. For induction of oxidative stress, hFOB cells were then treated with $200{\mu}M$$H_2O_2$ for 2 h. To evaluate the effect on autophagy, a separate group of cells were incubated with 1 mM 3-methyladenine (3-MA) before treatment with remifentanil and $H_2O_2$. Cell viability and apoptotic cell death were determined via MTT assay and Hoechst staining, respectively. Mineralized matrix formation was visualized using alizarin red S staining. Western blot analysis was used to determine the expression levels of bone-related genes. Results: Cell viability and mineralized matrix formation increased on remifentanil pretreatment before exposure to $H_2O_2$-induced oxidative stress. As determined via western blot analysis, remifentanil pretreatment increased the expression of bone-related genes (Col I, BMP-2, osterix, and $TGF-{\beta}$). However, pretreatment with 3-MA before exposure to remifentanil and $H_2O_2$ inhibited remifentanil's protective effects on hFOB cells during oxidative stress. Conclusions: We showed that remifentanil prevents oxidative damage in hFOB cells via a mechanism that may be highly related to autophagy. Further clinical studies are required to investigate its potential as a therapeutic agent.
본 연구의 목적은 향신료로서 한국인의 식생활에 중요한 위치를 차지하고 있는 홍고추가루 수용성 추출물의 항염증 활성을 검토해보고자 수행되었다. 그 결과 홍고추가루의 수용성 추출물은 LPS 처리에 의한 NO 및 $PGE_2$의 생성을 현저히 억제시키는 것을 관찰할 수 있었으며, NO의 생합성효소인 iNOS 단백질의 발현 또한 억제시킴을 확인할 수 있었다. 홍고추가루의 수용성 추출물은 염증성 사이토카인인 IL-6의 생성억제 효과도 탁월하였다. 이러한 연구결과로 볼 때 고추의 수용성 추출물이 대식세포에 의해 생성되는 염증반응의 매개물질인 NO, $PGE_2$, IL-6의 생성을 억제함으로 염증반응을 완화시켜 주는 것으로 판단된다. 차후 항염증 활성을 갖는 홍고추가루의 수용성 추출물의 성분을 동정하는 연구가 필요할 것으로 사료되며, 고추가 식품유래의 항염증활성을 갖는 제품 개발에 있어 유용한 식품자원 원료로 사용 될 수 있을 것으로 생각된다.
The protein transduction domains have been reported to have potential to deliver the exogenous molecules, including proteins, to living cells. However, poor transduction of proteins limits therapeutic application. In this study, we examined whether imipramine could stimulate the transduction efficiency of PEP-1 fused proteins into astrocytes. PEP-1-catalase (PEP-1-CAT) was transduced into astrocytes in a time- and dose-dependent manner, reducing cellular toxicity induced by $H_2O_2$. Additionally, the group of PEP-1-CAT + imipramine showed enhancement of transduction efficiency and therefore increased cellular viability than that of PEP-1-CAT alone. In the gerbil ischemia models, PEP-1-CAT displayed significant neuroprotection in the CA1 region of the hippocampus. Interestingly, PEP-1-CAT + imipramine prevented neuronal cell death and lipid peroxidation more markedly than PEP-1-CAT alone. Therefore, our results suggest that imipramine can be used as a drug to enhance the transduction of PEP-1 fusion proteins to cells or animals and their efficacies against various disorders.
P18, a member of the INK4 family of cyclin-dependent kinase inhibitors, is a tumor suppressor protein and plays a key cell survival role in a variety of human cancers. Under pathophysiological conditions, the INK4 group proteins participate in novel biological functions associated with neuronal diseases and oxidative stress. Parkinson's disease (PD) is characterized by loss of dopaminergic neurons, and oxidative stress is important in its pathogenesis. Therefore, we examined the effects of PEP-1-p18 on oxidative stress-induced SH-SY5Y cells and in a PD mouse model. The transduced PEP-1-p18 markedly inhibited 1-methyl-4-phenyl pyridinium-induced SH-SY5Y cell death by inhibiting Bax expression levels and DNA fragmentation. Additionally, PEP-1-p18 prevented dopaminergic neuronal cell death in the substantia nigra of a 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6,-tetrahydropyridine-induced PD mouse model. These results indicate that PEP-1-p18 may be a useful therapeutic agent against various diseases and is a potential tool for treating PD.
본 연구는 기능성 지표물질 확인을 위한 동양란 심비디움(Cymbidium) 향기 성분 비교 분석을 목적으로 하며, GC/MS 방법을 사용하여 한국춘란(Cymbidium goerigii L.), 중국춘란(C. forrestii R.)과 일경구화(C. faberi R.)의 향기성분을 비교 분석하였다. 분석은 한국춘란으로 '민춘란', '주금화', 중국춘란으로 '취개', '송매', '용자', 일경구화로 '최매', '남양매', '화자'등을 사용하였다. GC/MS 방법을 통해 검출된 성분들을 peak area(%)값 분석을 사용하여 3%이상의 주요 향기성분으로 분류하였다. 향기 성분 분석 결과 한국춘란에서는 유방암, 자궁경부암, 교모세포종암에 세포독성 기능성을 가진 ${\alpha}$-bergamotene과, 인체 간암 세포(HepG2)의 사멸과 성장 억제, 항진균제 및 바베스열원충, 충치균에 대한 억제 기능성을 가진 nerolidol이 가장 많았다. 중국 춘란에서는 nerolidol과 악성 흑색종 세포(B16-F10), 인체 간암 세포와 백혈병 세포(HL-60, K562)의 사멸과 억제 등의 기능성을 가진 ${\beta}$-bisabolene이 가장 많았다. 일경구화에서는 교모세포종(SF-767)의 억제와 간암세포주(BEL-7402)에 소염작용 억제 효과를 가진 ${\alpha}$-pinene, 위장 보호 효과 기능을 가진 1,8-cineole과 페로몬의 기능을 가진 1,3,7-octatriene이 가장 많았다. 이상에서 동양란의 주요 향기 성분으로 밝혀진 물질들은 인간에게 유익한 다양한 기능성을 갖고 있는 것으로 확인되었다.
본 연구에서는 대두(FS)와 아가콩의 발효추출물(FYA)의 항암활성 기전을 확인하기 위해 AGS 인체위암세포의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. AGS 세포에서 FS 및 FYA 처리로 인하여 암세포의 증식이 처리 농도 의존적으로 강하게 억제하였고, apoptosis 유발을 의미하는 세포의 전반적인 형태 및 핵의 변형 또한 동반하였다. 또한 세포주기 분석을 통하여 이 현상이 apoptosis 유도에 의한 것임을 확인하였다. AGS 세포에 처리된 FS 및 FYA는 pro-apoptotic factor인 Bax의 발현 증가를 통한 intrinsic pathway나, death receptor 관련 유전자의 발현 증가를 통한 extrinsic pathway를 활성화시키며, 더 나아가서 IAP family인자의 발현 억제 및 caspases의 활성 증가를 일으켜 apoptosis를 유발시키는 것을 유추할 수 있었는데, 이러한 효과들은 FS보다 FYA에서 더욱더 탁월하였다. 이는 향후 아가콩 발효추출물이 항암치료를 위한 적용 가능성이 매우 우수함을 제시하여 주는 결과이다.
본 연구는 섬애약쑥의 생리활성 규명을 위한 연구의 일환으로 물 추출물의 항염증 활성 및 간 염증에 대한 보호효과를 세포수준에서 확인하였다. 세포독성이 없는 $100{\sim}400{\mu}g/ml$의 농도 범위에서 섬애약쑥 추출물은 HepG2 세포에서 nitric oxide (NO)와 reactive nitrogen species (ROS)생성을 농도의존적으로 저해하였으며, 간염질환과 밀접한 관계가 있는 cytokine인 M-CSF와 IL-8의 발현을 감소시켰다. 또한 직접적인 간 손상을 나타낼 수 있는 지표인 AST와 ALT의 발현을 유의성 있게 감소시키는 결과를 얻을 수 있었다. 본 실험을 통해서 섬애약쑥물 추출물은 세포독성이 없는 $200{\sim}400{\mu}g/ml$의 범위에서 농도의존적으로 간 염증의 개선 효과를 가질 것이라는 단서를 확인하였다.
Objectives: Advancements in nanotechnology have led to nanoparticle (NP) use in various fields of medicine. Although the potential of NPs is promising, the lack of documented evidence on the toxicological effects of NPs is concerning. A few studies have documented that homeopathy uses NPs. Unfortunately, very few sound scientific studies have explored the toxic effects of homeopathic drugs. Citing this lack of high-quality scientific evidence, regulatory agencies have been reluctant to endorse homeopathic treatment as an alternative or adjunct treatment. This study aimed to enhance our insight into the impact of commercially-available homeopathic drugs, to study the presence of NPs in those drugs and any deleterious effects they might have, and to determine the distribution pattern of NPs in zebrafish embryos (Danio rerio). Methods: Homeopathic dilutions were studied using high-resolution transmission electron microscopy with selected area electron diffraction (SAED). For the toxicity assessment on Zebrafish, embryos were exposed to a test solution from 4 - 6 hours post-fertilization, and embryos/larvae were assessed up to 5 days post-fertilization (dpf ) for viability and morphology. Toxicity was recorded in terms of mortality, hatching delay, phenotypic defects and metal accumulation. Around 5 dpf was found to be the optimum developmental stage for evaluation. Results: The present study aimed to conclusively prove the presence of NPs in all high dilutions of homeopathic drugs. Embryonic zebrafish were exposed to three homeopathic drugs with two potencies (30CH, 200CH) during early embryogenesis. The resulting morphological and cellular responses were observed. Exposure to these potencies produced no visibly significant malformations, pericardial edema, and mortality and no necrotic and apoptotic cellular death. Conclusion: Our findings clearly demonstrate that no toxic effects were observed for these three homeopathic drugs at the potencies and exposure times used in this study. The embryonic zebrafish model is recommended as a well-established method for rapidly assessing the toxicity of homeopathic drugs.
The present study investigated the anti-proliferative and chemosensitizing effects of Crinum asiaticum var. japonicum against multi-drug resistant (MDR) cancer cells. The 80% methanol extract, chloroform ($CHCl_3$) fraction and butanol (BuOH) fraction of C. asiaticum inhibited the growth of mitoxantrone (MX) resistant HL-60 (HL-60/MX2) cells. When HL-60/MX2 cells were treated with the $CHCl_3$ and BuOH fractions, DNA ladder and sub-G1 hypodiploid cells were observed. Furthermore, the fractions reduced BcI-2 mRNA levels, whereas Bax mRNA levels were increased. These results suggest that the inhibitory effect of C. asiaticum on the growth of the HL-60/MX2 cells might arise from the induction of apoptosis. Treatment of HL-60/MX2 cells with the fractions markedly decreased the mRNA levels of the multi-drug resistance protein-1 and breast cancer resistance protein. The $CHCl_3$ fraction and hexane fraction increased MX accumulation in HL-60/MX2 cells. These results imply that the $CHCl_3$ fraction of C. asiaticum plays a pivotal role as a chemosensitizer. We suggest that components of C. asiaticum might have a therapeutic potential for the treatment of MDR leukemia.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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