이 연구는 한국 재래 닭에서 부화 후 고환 발달 과정을 명확하게 이해가기 위하여 부화 후 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 21, 28, 32, 44, 52 및 64주령(n=13마리/일령)의 한국 재래닭을 이용하여 수행하였다. 한국 재래 닭의 고환은 2.5 % glutaraldehyde를 이용하여 전신 관류 고정하고 조직 처리 과정을 거쳐 Epon-araldite에 포매하였다. 초박절편기를 사용하여 $1{\mu}m$로 절편한 다음 methylene blue로 염색하여 일반적인 조직의 변화상과 형태 계측을 일반적인 방법에 따라서 정자 생성을 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 부화 후 1주령의 고환의 평균 무게는 0.015 g이었고 점진적으로 증가하여 21주령에는 3.93 g이고 21주령부터 64주령까지는 변화가 없었다. 곱슬정세관의 용적 치밀도는 1주령에 32.6%이었으나 점차적으로 증가하여 64주령에서는 92.89이었다. 1주령의 한국 재래 닭 고환 간질 조직은 고환 실질의 67.4%를 나타내었고 이러한 비율은 성장하는 동안에 점차적으로 감소하여 64주령에 7.11%를 나타내었다. 고환내 총 정자 생성은 18주령부터 28주령까지는 유의성있게 증가하였고 고환 1g당 정자 생성은 $18\sim28$주령까지는 유의성있게 증가하였고 $28\sim52$주령까지는 변화가 없었으나 64주령에 유의성 있게 감소하였다. 곱슬정세관의 평균 직경은 $1\sim21$주령까지 주령에 따라 점진적으로 증가하였고 곱슬정세관의 길이는 1주령에 0.34 m이었고 성장하면서 유의성 있게 증가하여 64주령에서는 72.2 m이었다. 곱슬정세관내 생식세포의 발달 단계는 다음과 같이 분류할 수 있다. 1) 정조세포($1\sim8$주령), 2) 정조세포, 정모세포($10\sim12$주령), 3) 정조세포, 정모세포, 원형의 정자세포($14\sim16$주령), 4) 정조세포, 정모세포, 정자세포 및 정자($18\sim64$주령). 이러한 결과를 종합하여 보면 한국 재래 닭에서 부화 후부터 성숙시기까지 고환 발달의 양상은 신생시기-성 성숙 이전기($1\sim12$주령), 성 성숙시기($14\sim18$주령) 및 성숙시기$(21\sim64)$로 나뉜다.
Most hinnies (female donkey${\times}$male horse) and mules (female horse${\times}$male donkey) are sterile with few reports of equine fertile hybrids. The main cause of this sterility is thought to be a meiotic block to spermatogenesis and oogenesis. This study compared the developmental features of the testes and a histological analyses of spermatogenesis in a male hinny with those of a normal, fertile stallion and Jack donkey. Hinny testes showed a thicker tunica albuginea, fewer blood vessels and more connective tissue in the testis parenchyma than those of the stallion and Jack donkey. Although the mean number of seminiferous tubules was significantly higher in stallion and hinny than Jack donkey (p<0.01), the mean proportion of seminiferous tubules was lower in the hinny (p<0.01) which resulted in a smaller diameter of seminiferous tubules. The mean number of spermatogonia and spermatocytes per unit area were significantly lower in hinny testis (p<0.01) and no spermatids or mature spermatozoa cells were found during immunofluorescent analyses. These results indicated that defects in seminiferous tubule development and structure occur in the testis of hinnies. Furthermore, most spermatogonia and spermatocytes cease development in synapsis during mid-meiosis of spermatocytes, which results in a block to spermatogenesis that prevents the formation of spermatids and matured spermatozoa during meiosis in male hinnies.
Objective: The aim of this study was to investigate the reversibility and safety of KISS1 metastasis suppressor (KISS1) gene vaccine in immunocastration. Methods: Six eight-week old ram lambs were randomly divided into vaccinated and control groups. The vaccine (1 mg/ram lamb) was injected at weeks 0, 3, and 6 of the study. Blood samples were collected from the jugular vein before primary immunization and at weeks 2, 4, 6, 10, 14, 22, and 30 after primary immunization. All ram lambs were slaughtered at 38 weeks of age, and samples were collected. Results: The specific anti-KISS1 antibody titers in vaccinated animals were significantly higher and the serum testosterone level was significantly lower than those in the control groups from week 4 to 14 after primary immunization (p<0.05). No significant difference was observed at weeks 22 and 30 after the primary immunization. Similar results were also found for scrotal circumference, testicular weight, length, breadth, and spermatogenesis in seminiferous tubules in week 30 after primary immunization. KS (KISS1-hepatitis B surface antigen S) fusion fragment of KISS1 gene vaccine was not detected in host cell genomic DNA of 9 tissues of the vaccinated ram lambs by polymerase chain reaction. Conclusion: The effects of KISS1 gene vaccine in immunocastration were reversible and no integration events were recorded.
파라벤은 화장품, 식품, 의약품 등에 첨가되는 살균성 보존제로 미생물의 성장을 억제한다. 그러나 체내에서 에스트로겐과 유사한 작용을 하는 내분비계 교란물질이며, 특히 독성물질에 민감한 영유아 및 태아에게 노출될 경우 생식기 기형, 고환암, 성조숙증 등 성장발달에 큰 영향을 미친다. 따라서 본 연구에서는 영아가 주로 섭취하는 모유에서의 파라벤 수준을 확인하기 위하여 모유 중 4가지 파라벤(methyl paraben, ethyl paraben, propyl parabne, butyl paraben)의 분석법을 확립하였다. 시료는 액체상추출(Liquid-liquid extraction, LLE)을 통하여 전처리 한 후, 액체크로마토그래피 텐덤 질량분석기(liquid chromatography tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)를 사용하여 정량분석 하였다. 확립된 분석조건에서 얻어진 검량선의 직선성은 r2 > 0.999이고, 검출한계(LOD)는 0.019~0.044 ng/mL이었다. 또한 정확도는 85.3~105.9%, 정밀도는 10% 이하의 값을 나타내었다. 10개의 모유시료 중 파라벤류의 평균농도 ± 표준편차는 MP 0.660 ± 0.519 ng/mL, EP 1.631 ± 2.081 ng/mL, PP 0.326 ± 0.320 ng/mL이었고, BP는 불검출 되었다.
Background: Anticancer agents induce a variety of adverse effects when administered to cancer patients. Busulfan is a known antileukemia agent. When administered for treatment of leukemia in young patients, busulfan could cause damage to the male reproductive system as one of its adverse effects, resulting in sterility. Methods: We investigated the effects of Korean Red Ginseng extract (KRGE) on busulfan-induced damage and/or dysfunction of the male reproductive system. Results: We found that administration of busulfan to mice: decreased testis weight; caused testicular histological damage; reduced the total number of sperm, sperm motility, serum testosterone concentration; and eventually, litter size. Preadministration of KRGE partially attenuated various busulfan-induced damages to the male reproductive system. These results indicate that KRGE has a protective effect against busulfan-induced damage to the male reproduction system. Conclusion: The present study shows a possibility that KRGE could be applied as a useful agent to prevent or protect the male reproductive system from the adverse side effects induced by administration of anticancer agents such as busulfan.
본 연구는 환경호르몬(endocrine disruptors)으로 분류되었으며, 제초제로 널리 사용되었던 Dichlorodiphenyltrichloroethane(DDT)가 설치류의 생식세포 중 Leydig 세포의 testosterone(T)생성억제 및 그 관련 작용메카니즘을 규명코자 수행되었다. 먼저 흰쥐의 웅성 생식세포주인 R2C세포에 T의 양 및 aromatase 활성도를 radio immunoassay (RIA)방법을 이용하여 측정하였다. 그 결과 R2C 세포에 황체형성호르몬(LH)를 처리하여 testosterone생성을 증가시킨 후, DDT를 처리한 군들은 대조군에 비하여 농도 의존적으로 T의 양은 감소하였으며, aromatase 활성도는 증가하였다. 또한 DDT자체만 처리한 군에서도 대조군에 비하여 testosterone의 생성이 감소하였다. 이러한 aromatase활성 증가가 estradiol receptor(ER)와의 상호 관련성을 확인하기 위해 ER antagonist인 ICI 182.780를 처리한 후 T의 양 및 aromatase 활성도를 측정한 결과 DDT에 의해 증가된 aromatase활성도가 ICI 182.780에 의해 다시 감소됨을 확인하였다. 또한 DDT에 의해 감소된 T의 양도 ICI 182.780에 의해 다시 회복되었다. In vivo실험으로 흰쥐에 DDT를 직접 투여한 후 정소 내 성 호르몬들을 측정해 본 결과 T의 양은 유의성 있게 감소하였으며, estradiol(E$_2$)의 양은 증가하였으며, aromatase 활성도도 감소하였다. 이러한 결과를 종합해 볼 때 DDT는 aromatase를 감소시키고, 이렇게 감소된 aromatase에 의해 testosterone 생성량을 억제하고, 이러한 DDT의 aromatase의 감소는 ER을 경유하는 것으로 추정할 수 있다.
눈동자개, Pseudobagrus koreanus의 성분화 과정을 밝히기 위해 부화 직후부터 250일령까지 생식소의 분화 및 발달을 조사하였다. 원시생식세포는 부화 후 1일(전장: $6.63{\sim}6.95\;mm$)에 나타났으며, 부화 후 5일($7.50{\sim}9.36\;mm$)에 생식융기를 형성하는 원시생식소 구조를 나타내었다. 부화 후 25일($11.58{\sim}13.21\;mm$)에서는 생식소 후단부 한쪽 끝에서 신장된 체세포 돌기가 생식소와 융합되어 작은 난소강이 형성되었다. 부화 후 30일($12.19{\sim}13.72\;mm$)에는 생식소 하단부에 정소관 원기가 출현하여 정소의 분화가 시작되었다. 부화 후 50일째 자어($16.28{\sim}17.06\;mm$)의 난소내에서는 주변인기 난모세포로 채워지기 시작하였으며, 정소내에서는 정원세포(spermatogonia, SG)의 활발한 증식을 관찰할 수 있었다. 부화 후 250일째 자어($35.49{\sim}51.12\;mm$)에서는 난소의 크기가 더욱 커지고 난모세포들로 가득 채워져 있었고, 정원세포의 수가 증가하기 시작하였다. 이상의 결과 눈동자개의 성분화 양상은 자웅이체형 중 분화형이었다.
한국산 살조개 (Protothaca jedoensis)의 새로운 산업화 양식품종으로 개발하기 위한 기초자료를 얻기 위하여 1998년 9월부터 1999년 8월까지 주로 조직학적 방법에 의해 생식소의 발달과정과 생식주기를 조사하였다. 살조개는 자웅이체로서, 생식소는 해부학적으로 소화맹낭과 족부근육 사이에 위치하였다. 난소와 정소는 각각 난자형성소낭과 정자형성소낭으로 구성되어 있었다. 비만도는 2월에 20.6로 가장 높았으며 8월에 최소값 (9.6)을 보였다. 군성숙도의 경우, 생물학적 최소형은 각 장 38.4 mm로 나타났다. 성숙한 난모세포의 크기는 $50-60\mu{m}$였으며, 성숙기의 정소에서 정소란이 관찰되었다. 살조개의 생식주기는 초기 활성기(12-2월), 후기 활성기 (1-4월), 완숙기 (3-7월), 부분 산란기 (6-8월), 퇴화 및 비활성기(7-l월)의 연속적인 5단계로 구분되었다.
광주기(하루 중 빛의 길이)는 골든 햄스터의 생식을 조절하는 주된 요인이다. 광주기 정보는 멜라토닌을 통하여 생식 내분비계로 전달된다. 따라서 멜라토닌이 생식에 미치는 효과를 여러 광주기에 노출시킨 햄스터에서 조사하였다. 단주기(하루 중 12시간 이하의 조명)에 노출시킨 동물들과 저녁에 멜라토닌을 주사한 동물들의 정소 무게는 현저하게 줄어들었으나, 장주기 (하루 중 12.5시간 이상의 조명)에 유지된 동물과 오전에 멜라토닌을 투여한 동물들의 정소 무게는 줄어들지 않았다. 퇴화된 정소를 조직학적으로 조사한 결과, 세정관 직경이 감소되었고, 세정관내 세포수가 두드러지게 줄어들었다. 또한 생식 능력이 퇴화된 동물의 혈중 여포자극호르몬과 황체호르몬의 수준도 생식 능력을 보유하고 있는 동물에 비해 뚜렷하게 감소하였다. 멜라토닌 수용체가 역전사 polymerase chain reaction으로 동정되었고 조직특이성 또한 조사하였다. 동정된 멜라토닌 수용체는 309염기였으며, 시상하부와 뇌하수체를 포함하는 다양한 장기에서 발현되었다. 생식을 조절하는 핵심 물질인 gonadotropin releasing hormone (GnRH) 유전자의 발현 또한 동정되었다. 그러나 멜라토닌 처리와 광주기 처리는 GnRH유전자 발현에 영향을 미치지 않았다. 종합하면, 광주기의 효과는 멜리토닌을 경유하여 발휘되며, 멜라토닌은 GnRH유전자의 발현보다는, 생성된 GnRH의 분비에 영향을 미쳐 생식내분비계에 간접적으로 작용함을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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