Objectives: The aim of this study was to elucidate the antioxidant effect of solvent fractions of Angelica gigas root. Methods: The ethanol extract of Angelica gigas root was suspended in water and then partitioned with dichloromethane (MC Fr.), ethyl acetate (EA Fr.) and butanol (BuOH Fr.), sequentially. The antioxidant activities of solvent fractions of Angelica gigas root were evaluated for radical scavenging activity against stable free radicals (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) DPPH, hydrogen peroxide and superoxide anion radicals. In addition the antioxidant activities of solvent fractions of Angelica gigas root against peroxyl radicals, hydroxyl radicals and peroxynitrites were determined by the total oxy-radical scavenging capacity (TOSC) assay. Results: Among the solvent fractions of MC Fr., EA Fr., and BuOH Fr., BuOH Fr. was found to have stronger antioxidant activity with $IC_{50}$ values of 59.72, 14.36, 30.96 and $44.75\;{\mu}g/m{\ell}$ on the DPPH radical, nitrite, superoxide anion and hydrogen peroxide, respectively, than BHA used as a positive control. Moreover, specific TOSC values(564.8, 276.4 and 405.5 TOSC/mM) of BuOH fr. against peroxyl radicals, hydroxyl radical and peroxynitrite were 4 times higher than GSH (136.5, 67.4 102.6 TOSC/mM) used as a positive control. Conclusions: These results suggest that the BuOH fr. of Angelica gigas root has a high antioxidant activity and can be useful to develop functional food against oxidative stress conditions.
Hydroperoxyl radical/superoxide anion radical ($HO_2{\cdot}/O_2^-{\cdot}$, $pK_a$=4.8) as an intermediate is of considerable importance in oxidation processes. Hence, the method of detecting $HO_2{\cdot}/O_2^-{\cdot}$ with high sensitivity is necessary to be developed. To achieve this objective, this study newly employed terephthalate (TA) as a probe for the measurement of $HO_2{\cdot}/O_2^-{\cdot}$ in the kinetic method presented in our previous study. This method was based on the hydroxylation of TA to produce mainly hydroxyterephthalic acid or hydroxyterephthalate (OHTA), which was analyzed by fluorescence detection (${\lambda}_{ex}$=315nm, ${\lambda}_{ex}$=425nm). The life-time of $HO_2{\cdot}/O_2^-{\cdot}$ and its concentration formed from the photolysis technique of $H_2O_2$ were reported in this study. At range of pH 2-10, the life-time of $HO_2{\cdot}/O_2^-{\cdot}$ was 51-422 sec. In particular, an increase in the life-time with pH was observed. The sensitivities of the kinetic method by using TA were always higher with 1.7-2.5 times at pH 8.0 than those by using benzoic acid. From these results, this study can contribute to understanding the basic functions of $HO_2{\cdot}/O_2^-{\cdot}$ in oxidation processes.
A novel kinetic method for determination of $HO_2{^{\cdot}}/O_2{^{{\cdot}-}}$ in ozone decomposition in water is described. In this study, potential interferences of $O_3$ and the hydroxyl radicals, $^{\cdot}OH_{(O3)}$, are suppressed by $HSO_3{^-}/SO_3{^{2-}}$. $HO_2{^{\cdot}}/O_2{^{{\cdot}-}}$ formed in ozone decomposition reduces $Fe^{3+}$-EDTA into $Fe^{2+}$-EDTA and subsequently the well-known Fenton-like (FL) reaction of $H_2O_2$ and $Fe^{2+}$-EDTA produces the hydroxyl radicals, $^{\cdot}OH_{(FL)}$. Benzoic acid (BA) scavenges $^{\cdot}OH_{(FL)}$ to produce OHBA, which are analyzed by fluorescence detection (${\lambda}_{ex}=320nm$ and ${\lambda}_{ex}=400nm$). The concentration of $HO_2{^{\cdot}}/O_2{^{{\cdot}-}}$ in ozone decomposition has been determined by the novel kinetic method using the experimentally determined half-life ($t_{1/2}$). The steady-state concentration of $HO_2{^{\cdot}}/O_2{^{{\cdot}-}}$ is proportional to the $O_3$ concentration at a given pH. However, the steady-state concentration of $HO_2{^{\cdot}}/O_2{^{{\cdot}-}}$ in ozone decomposition is inversely proportional to pH values. This pH dependence is due to significant loss of $O_2{^{{\cdot}-}}$ by $O_3$ at higher pH conditions. The steady-state concentrations of $HO_2{^{\cdot}}/O_2{^{{\cdot}-}}$ are in the range of $2.49({\pm}0.10){\times}10^{-9}M(pH=4.17){\sim}3.01({\pm}0.07){\times}10^{-10}M(pH=7.59)$ at $[O_3]_o=60{\mu}M$.
The resistance of Cornyza bonariensis to herbicide paraquat was investigated by evaluating the activities of three enzymes concerning in scavenging paraquat-generated toxic oxygen species such as superoxide radical and hydrogen peroxide in resistant and susceptible biotypes. Conyza bonariensis inhabited in cultivated area was more tolerant to paraquat than that of uncultivated area. This is the first report that a biotype of Cornyza bonariensis has appeared in an area with repeated paraquat treatments of Korea. Superoxide dismutase activity of resistant biotype was 20% higher as 150 than that of susceptible biotype. Ascorbate peroxidase activity of resistant biotype was 44% higher than that of susceptible biotype. Glutathione reductase activity of resistant biotype was 64% higher than that of susceptible biotype. It can be concluded from above results that the resistance of Conyza bonariensis to paraquat depends partially on the toxic oxygen species-scavenging efficiency of protective multienzymatic system which is composed of three enzymes, superoxide dismutase, ascorbate peroxidase, and glutathione reductase.
Based on the recently derived general expression for the rates of diffusion-controlled reactions, we calculate the rates of dismutation of the superoxide anion radical catalyzed by Cu/Zn superoxide dismutases (SOD). This is the first attempt to calculate the absolute rates of diffusion-controlled enzyme reactions based on the atomiclevel molecular dynamics simulations. All solvent molecules are included explicitly and the effects of the structural flexibility of enzyme, especially those of side chain motions near the active site, are included in the present calculation. In addition, the actual mobility of the substrate molecule is taken into account, which may change as the molecule approaches the active site of enzyme from the bulk solution. The absolute value of the rate constant for the wild type SOD reaction obtained from MD simulation is shown to be in good agreement with the experimental value. The calculated reactivity of a mutant SOD is also in agreement with the experimental result.
A four-week feeding trial was conducted to investigate the effects of dietary soybean meal (SBM) and powdered Cheongkukjang (CKJ) on non-specific immune responses of parrotfish Oplegnathus fasciatus. Three isonitrogenous (42% crude protein) and isocaloric (17.1 MJ/kg) diets were formulated to replace fish meal by 0, 25% SBM or 25% CKJ (designated as FM, 25SBM and 25CKJ, respectively). Ninety fish (initial body weight 122 g) were randomly allotted into nine 150 L tanks. One of the three experimental diets was fed to triplicate groups of fish for 4 weeks. After the feeding trial, no differences were observed in growth performances and feed utilization among fish groups. Liver superoxide dismutase activity of the fish fed CKJ containing diet was significantly higher than that of the control groups. DPPH radical scavenging and $Fe^{2+}-chelating$ activities of the experimental diets containing SBM or powdered CKJ were significantly higher than that of the control diet. The results of the present study suggest that dietary inclusion of powdered 25CKJ significantly increased liver superoxide dismutase activity and did not affect the growth performances, feed utilization, morphological parameters, as well as hematological values of parrotfish.
It was reported that high doses of sodium selenite can induce apoptosis of cancer cells, but the molecular mechanisms are poorly understood. Manganese superoxide dismutase (MnSOD) converts superoxide radical to hydrogen peroxide within the mitochondrial matrix and is one of the most important antioxidant enzymes. In this study, we showed that 20 ${\mu}M$ sodium selenite could alter subcellular distribution of MnSOD, namely a decrease in mitochondria and an increase in cytosol. The alteration of subcellular distribution of MnSOD is dependent on the production of superoxide induced by sodium selenite.
In an attempt to define the effects of hyperbaric oxygen treatment on the lipid peroxidation and oxygen free radical reactions in rats exposed to carbon monoxide, we studied malondialdehyde (MDA) level and activities of catalase and superoxide dismutase in the kidney of the rats exposed to carbon monoxide. Male Sprague-Dawley albino rats weighing 240 to 260 gm were used. Experimental groups consist of Control group (=breathing with air), HBO group (=exposed to hyperbaric oxygen 〔HBO, 3ATA, 100%〕 after air breath), CO group (=exposed to CO〔3,970 ppm〕after air breath), CO-Air group (=exposed to CO after air breath followed by air breath) and CO-HBO group (=exposed to CO after air breath followed HBO treatment). The CO group showed significantly higher MDA level, catalase activity and SOD activity as compared to that of control group. The CO-HBO group showed significantly lower MDA level as compared to that of CO group, and did not show significantly lower catalase activity and SOD activity as compared to that of CO group. These results suggest that the excessive oxygen free radicals is an important determinant in pathogenesis of CO-induced nephrotoxicity and HBO inhibits the lipid peroxidation caused by excessive oxygen free radicals in the kidney of the rats exposed to carbon monoxide.
Verbena officinalis (Verbenaceae) has been used as herbal medicine or health supplement in both Western and Eastern countries for centuries. In the present study, we examined the anti-inflammatory and antioxidant activities of the methylene chloride fraction of V. officinalis (VMC). To elucidate the anti-inflammatory properties of VMC, we investigated the inhibition effects of nitric oxide production in interferon-gamma (IFN-$\gamma$) and lipopolysaccharide-stimulated mouse peritoneal macrophages. VMC suppressed nitric oxide production, inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 expression dose-dependently without notable cytotoxicity. In various radical scavenging assays, VMC exhibited strong scavenging effect on DPPH radical, superoxide radical, nitric oxide radical and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid) radical. VMC also showed potent reducing power. These findings strongly suggest that VMC may be beneficial in oxidative stress-mediated inflammatory disorders.
The possible mechanism of the DNA strand breaking activity of the hot-water extract of Fructus Chaenomelis (dried fruit of Chaenomeles sinensis) in a closed circular duplex replica form DNA (RFI DNA) was studied through agarose gel electrophresis under various conditions. Induction of DNA strand scission by the hot-water extract of C. sinensis occurred in dose and time-dependent manners. $Cu^{2+}$ was indispensable for the induction of DNA strand breakage. Exogeneous chelating agents inhibited the DNA breaking activity, conforming the catalytic action of $Cu^{2+}$ on generation of free radicals responsible for oxidative damage. Antioxidant enzymes and some radical scavengers were used to investigate the major radical species triggering the DNA strand scission, demonstrating that a highest inhibitory activity was found in the presence of catalase, while less in the presence of tiron (a scavenger for superoxide radical), 2-aminoethyl-isothiuroniumbromide-HBr, cysteamine (scavengers for hydroxyl radical), and 1,4-diazabicyclo [2,2,2] octane (a scavenger for singlet oxygen) in decreasing order. The findings implied that oxygen radical species generated in presence of transition divalent cation during the oxidation of some compounds contained in the hot-water extract of C. sinensis is mainly responsible for inducing genotoxicity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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