An extracellular pigment production of three Phellinus sp. (Phellinus 421, P. linteus and P. hartigil) through submerged cultivation was investigated. The maximum brown pigment from culture broth was obtained from the precipitate by addition of 10% 1M HCI solution. This precipitate showed absorption characteristics with ${\lambda}_{max}$ of 360nm. The maximum production of extracellular pigment obtained at optimum medium and culture condition was 3.54 ($A_{360}$). The precipitate was fractionated by Sephadex G-75 gel chromatography, and the isolated brown pigment contained a large amount of polyphenol and the small amounts of sugar and protein. The brown pigment fraction was stable in temperature range of $30{\sim}60^{\circ}C$, pH range of $4{\sim}6$, sugar addition ranges of $1{\sim}5%$ and salt addition concentration of 3 molarity. Antioxidative activity of the brown pigment by TBA method was better than that of vitamin E (${\alpha}$-tocopherol).
Exo-polysaccharide (BWS) obtained from submerged cultivation of Ganoderma lucidum mycelium was fractionated. Antitumor activity of their fractions was investigated in comparison with the mycelial polysaccharide fractions. Eight kinds (BWS-DN, BWS-DA, BWS-DN-GI, BWS- DA-GI, MWS-DN, MWS-DA, MWS-DN-GI and MWS-DA-GI) of polysaccharide fractions were obtained by DEAE-cellulose ion exchange chromatography and Sepharose CL-4B gel chromatography from BWS and MWS, which were isolated from culture fiuid and mycelial cell, respectively. The anticomplementary activities (ITCH$_{50}$%) of the exo-polysaccharide fractions showing 15% to 30% were lower than those of mycelial polysaccharide fractions showing 15% to 70%. The acidic fractions of BWS-DA and BWS-DA-GI fractionated from BWS, showed the highest activity of 30%. In the MTT assay, BWS-DN and MWS against mouse leukemia L1210 exhibited high inhibition ratio of 86 and 89%, respectively at the concentration of 600 $\mu$g/ml. High inhibition ratio of 50% (IC$_{50}$) was achieved for BWS, BWS-DA and MWS-DA fractions against human colon adenocarcinoma COLO-205 and for BWS-DA, BWS-DN and MWS-DN fractions against human leukemia HL-60 at the concentra- tion of 300 $\mu$g/ml among the six polysaccharide fractions, respectively.
The optimum conditions of the production of exo-polymer by Ganoderma lucidum WK-003 and it's hepatoprotective effect was studied. Optimum conditions for the production of exo-polymer (3.18 g/$\ell$) by using shaken flask culture of G. lucidum WK-003 were pH 4.5, 30$^{\circ}C$, 120 rpm for 18 days cultivation. Also exo-polymer productio (7.15 g/$\ell$) was optimized by 5$\ell$ jar fermenter cultivation with condition of pH 4.5, 30$^{\circ}C$, 200 rpm, 1.0 vvm for 6 days cultivation. Glutamic pyruvic transaminase(GPT) activities in serum of intoxicated Sprague-Dawley rat were decreased from 704 IU/L to 330 IU/L by oral administration of the exo-polymer (20mg/kg$.$day)f or 4 consecutive days.
Sikhae is a Korean traditional beverage of saccharified rice. Its factory waste(SFW) is usually thrown away instead of being used. We developed a cheap substrate of SFW for use in liquid spawn that is known for its higher fruit body yields than grain spawn in sawdust cultivation. Mycelia of Lentinula edodes ASI 3046, which is regarded as the most suitable strain for sawdust cultivation, were cultured on six kinds of previous known media and SFW. As the seven kinds of media were applied, a Sikhae Factory Waste(SFW) was most excellent in growth. The dried mycelial weight in SFW was almost four times as much as that in the other media. In the flask culture, optimum culture conditions for the mycelial growth were obtained after 13 days of cultivation at media volume of 100 ml, 100 rpm, initial pH 4.5, and $25^{\circ}C$. The best mycelial growth was observed when $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ and D-sucrose were added as a supplement in SFW. SWM must be a remarkable medium for L. edodes because of its simple preparation and low cost.
A scaling up study for the exopolysaccharide (EPS) production by submerged culture of Ganoderma lucidum was carried out in jar fermenter systems (2.6, 20 and 75 L) under bi-staged pH process. Profiles of dissolved oxygen (DO) and volumetric coefficient of oxygen transfer ($k_La$) as a function of operating variables (agitation speed and aeration rate) was investigated, and a correlation between $k_La$ and operating variables was analysed statistically. Under bi-staged pH process, no limitation of DO was observed at agitation speeds tested in the range of 200 and 600 rpm, and the highest EPS production was obtained at the level of DO of $40{\sim}80%$. From the regression analysis, the relation between $k_La$, gas velocity (Vs), stirrer speed (N) and impeller diameter (Di) could be expressed as : $$k_La=0.555{\times}Vs^{0.42}{\times}(N^3{\times}Di^2)^{0.33}\;(R^2=0.925,\;p<0.05)$$ It was found that under 2.6 L jar fermenter, the optimum agitation speed and aeration rate was 400 rpm and 1 vvm, respectively, obtaining the EPS production of 15.43 g/L. Under the submerged cultivation of G. lucidum in jar fermenters of $2.6{\sim}75\;L$, the similar EPS yields at each fermenter were achieved during scaling up based on $k_La$, and $k_La$ value for maximum EPS production was $85.4{\pm}26.70\;h^{-1}$.
The production of polysaccharide according to various developmental stages(mycelium growth, primordium appearance, and fruiting-body formation) in the edible mushroom Grifola frondosa was studied. The cap of the mature mushroom showed the highest amount of polysacchride. Mycelial growth and polysaccharide synthesis were optimal at pH 5 and $20^{\circ}C$. Polysaccharide synthesis was maximal after 12 days of cultivation, whereas maximum mycelial growth was shown after 18 days. Mannose, cellobiose and starch increased the level of polysaccharide as well as growth in submerged culture. Glucose and sucrose appeared to be good substrates for fruiting of Grifola frondosa.
The optimum conditions for the production of Lentinus edodes mycelia and it's hypoglycemic effect was studied. Optimum pH and temperature for the production of mycelia in shaken flask culture were 5 and $30^{\circ}C$, respectively, for 24 days cultivation. Culture period for maximum production of mycelia (8.13 g/l) in 5-l jar fermenter cultivation was shortened as much as 6 days compared to shaken flask culture. The mycelial dose of 5 % proved almost equally effective in lowering the plasma glucose, total cholesterol, and triglyceride level as much as 23.0, 20.7, and 27.1%, respectively. The values of alanine transaminase and aspartate transaminase were also estimated and exhibited a substantial reduction (29.6 and 34.3%, respectively) in activity after the administration of dried mycelia.
Recently, it has been known that Hericium erinaceum is a one of the very useful functional materials with great attention in mushroom processing industry. In present study, a liquid culture which was not studied systematically until now, was conducted as a method of cultivation for H. erinaceum, and also examined the characteristics of the liquid culture and conditions of process optimization. A good basal medium was selected through the cultivation of 16 species mushroom media and the optimum condition for medium and cultivation were chosen by response surface method. From these results, the optimum condition of medium for mushroom was 3% glucose, 0.2% yeast extract/peptone(1:1) and 0.1% $KH_2PO_4/MgSO_4$(1:1) and also the optimal culture condition was obtained at inoculum of 13.42%, temperature of $22.3^{\circ}C$ and pH of 5.7. The mycelial dry weight of 9 g/I was obtained under these conditions and this amount was about 1.7 times higher than that which were cultivated in basal medium for 8 days.
These studies were carried out to investigate the effects of rice straw on microflora in relation to nitrogen metabolism in submerged soil. Rice plants were cultured in submerged soil to which rice straw was applied. In the submerged soil applied with rice straw the value of Eh lowered. pH was higher in the upper layer than in the lower. The content of iron(II) in submerged soil increased, while that of ammonium nitrogen decreased when rice straw was applied and nitrate-nitrogen was hardly detected during the rice cultivation period Under application of rice straw the number of denitrifying bacteria observed to increase at the early growing stage of rice plant and to decrease thereafter, and that of nitrate reducing bacteria increased at the late growing stage. The number of ammonium oxidizing bacteria and that of nitrite oxidizing bacteria decreased continually but the latter were rather sharply decreased.
The ginseng residue, a by-product of ginseng tea manufacture, was used as growth promoting substance in the submerged cultivation of Basidiomycetes for its effective utilization. Ginseng residue contained about 46% of total sugar, 14% of crude protein, 12% of ash, and 0.16% of crude saponin. Among inorganic substances in ginseng residue, amount of Mg, Na, K and Ca were much more than other inorganic substances. All ginsenosides existed in red ginseng residue. Ganoderma lucidum and Pleurotus ostreatus could be excellently cultured in potato dextrose broth. Most effective additional concentration of residue extract for growth of these fungi was shown to be 0.2%, and the contents of crude protein and amino acid in mycelium were increased when 0.5% of residue extract were added to the medium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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