A nucleoside diphosphate-linked moiety X (Nudix) hydrolase-like gene, YSA1, has been identified as one of the gromwell plant extract-responsive genes in Cryptococcus neoformans. Ysa1 is known to control intracellular concentrations of ADP-ribose or O-acetyl-ADP-ribose, and has diverse biological functions, including the response to oxidative stress in the ascomycete yeast, Saccharomyces cerevisiae. In this study, we characterized the role of YSA1 in the stress response and adaptation of the basidiomycete yeast, C. neoformans. We constructed three independent deletion mutants for YSA1, and analyzed their mutant phenotypes. We found that ysa1 mutants did not show increased sensitivity to reactive oxygen species-producing oxidative damage agents, such as hydrogen peroxide and menadione, but exhibited increased sensitivity to diamide, which is a thiol-specific oxidant. Ysa1 was dispensable for the response to most environmental stresses, such as genotoxic, osmotic, and endoplasmic reticulum stress. In conclusion, modulation of YSA1 may regulate the cellular response and adaptation of C. neoformans to certain oxidative stresses and contribute to the evolution of antifungal drug resistance.
Toxicological studies have an object of detecting adverse effects of a chemical on an organism based on observed toxicity marker (i.e., serum biochemical markers and chemical-specific gene expression) or phenotypic outcome. To date, most toxicogenomic studies concentrated on hepatic toxicity. cDNA microarray analysis enable discrimination of the responses in animals exposed to different classes of hepatotoxicants. In an effort to further characterize the mechanisms of 2, 3, 7, 8,-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD or dioxin)-mediated toxicity, comprehensive temporal-responsive microarray analyses were performed on hepatic tissue from Sprague-Dawley rats treated with TCDD. Hepatic gene expression profiles were monitored using custom DNA chip containing 490 cDNA clones related with toxicology. Gene expression analysis identified 26 features which exhibited a significant change. In this study, we observed that the genes related with oxidative stress in rats exposed to Dioxin, such as CYPIIA3 and glutathione S-transferase, were up-regulated at 24hr after exposure. In this study, we carried out to discover novel evidence for previously unknown gene expression patterns related to mechanism of hepatic toxicity in rats exposed to dioxin, and to elucidate the effects of dioxin on the gene expression after exposure to dioxin.
Deschampsia antarctica is the only monocot that thrives in the tough conditions of the Antarctic region. It is an invaluable resource for the identification of genes associated with tolerance to various environmental pressures. In order to identify genes that are differentially regulated between greenhouse-grown and Antarctic field-grown plants, we initiated a detailed gene expression analysis. Antarctic plants were collected and greenhouse plants served as controls. Two different cDNA libraries were constructed with these plants. A total of 2,112 cDNA clones was sequenced and grouped into 1,199 unigene clusters consisting of 243 consensus and 956 singleton sequences. Using similarity searches against several public databases, we constructed a functional classification of the ESTs into categories such as genes related to responses to stimuli, as well as photosynthesis and metabolism. Real-time PCR analysis of various stress responsive genes revealed different patterns of regulation in the different environments, suggesting that these genes are involved in responses to specific environmental factors.
Bae, Eun-Kyung;Choi, Young-Im;Lee, Hyoshin;Choi, Ji Won
Journal of Plant Biotechnology
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v.46
no.3
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pp.180-188
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2019
Auxin plays a crucial regulatory role in plant growth and development processes. Three major classes of auxin-responsive transcription factors controlled by the Auxin/indole-3-acetic acid (Aux/IAA), Gretchen Hagen 3 (GH3), and small auxin up RNA (SAUR) genes regulate auxin signaling. Aux/IAA, in particular, encodes short-lived nuclear proteins that accumulate rapidly in response to auxin signaling. In this study, we isolated a PagAux/IAA1 gene from poplar (Populus alba ${\times}$ P. glandulosa) and investigated its expression characteristics. The PagAux/IAA1 cDNA codes for putative 200 amino acids polypeptide containing four conserved domains and two nuclear localization signals (NLSs). Utilizing Southern blot analysis, we confirmed that a single copy of the PagAux/IAA1 gene was present in the poplar genome. The expression of this gene is specific to leaves and flowers of the poplar. PagAux/IAA1 expressed in the early exponential growth phase of cell-cultured in suspension. PagAux/IAA1 expression level reduced in drought and salt stress conditions, and the presence of plant hormones such as abscisic acid. However, expression enhanced in cold stress, cambial cell division, and presence of plant hormones such as gibberellic acid and jasmonic acid. Thus, these results suggest that PagAux/IAA1 participates in cold stress response as well as developmental processes in the poplar.
Jumonji domain-containing proteins (JMJD) catalyze the oxidative demethylation of a methylated lysine residue of histones by using $O_2$, ${\alpha}$-ketoglutarate, vitamin C, and Fe(II). Several JMJDs are induced by hypoxic stress to compensate their presumed reduction in catalytic activity under hypoxia. In this study, we showed that an H3K27me3 specific histone demethylase, JMJD3 was induced by hypoxia-inducible factor (HIF)-$1{\alpha}/{\beta}$ under hypoxia and that treatment with Clioquinol, a HIF-$1{\alpha}$ activator, increased JMJD3 expression even under normoxia. Chromatin immunoprecipitation (ChIP) analyses showed that both HIF-$1{\alpha}$ and its dimerization partner HIF-$1{\beta}$/Arnt occupied the first intron region of the mouse JMJD3 gene, whereas the HIF-$1{\alpha}/{\beta}$ heterodimer bound to the upstream region of the human JMJD3, indicating that human and mouse JMJD3 have hypoxia-responsive regulatory regions in different locations. This study shows that both mouse and human JMJD3 are induced by HIF-1.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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1995.06b
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pp.55-75
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1995
Induction of HMG-Co A reductase (HMGR) is essential for the biosynthesis of sesquiterpenoid phytoalexins and steroid derivatives in Solanaceous plants following wounding and pathogen infection. To better understand this complex step in stress-responsive isoprenoid synthesis, three classes of cDNAs for HMGR (hmg1, hmg2, and hmg3) were isolated from a potato tuber library. The potato cDNAs had extensive homology in open reading frames but had low homology in the 3'-untranslated regions. RNA gel blot analysis using gene-specific probes revealed that hmg1 is induced by wounding but wound induction is strongly suppressed by arachidonic acid or by inoculation with Phytophthora infestants. In contrast, hmg2 and hmg3 are slightly induced by wounding and strongly enhanced by arachidonic acid or inoculation. The induction and suppression of HMGR genes parallel the suppression of steroid and stimulation of sesquiterpenoid accumulations observed in earlier investigations. Treatment of the tuber disks with a low concentration of methyl-jasmonate doubled the wound induced accumulation of hmg1 transcripts and steroid-glycoalkaloid accumulation, but did not affect the abundance of transcripts for hmg2 or hmg3 nor induce phytoalexins. High concentration of methyl-jasmonate suppressed hmg1 mRNA and steroid-glycoalkaloid accumulation, induced hmg3 mRNA, and did not elicit phytoalexins. Lipoxygenase inhibitors suppressed the accumulation of of hmg1 transcripts and steroid-glycoalkaloids, which were restored by exogeneous methyl-jasmonate. Methyl-jasmonate applied together with arachidonic acid enhanced the elicitor induced accumulation of sesquiterpenes and sustained steroid-glycoalkaloid levels with transcript levels for the various HMGR mRNAs equal to or greater than wound-only treatment. These results domonstrate that the consequences of wound- and pathogen-responses of plants are different at the levels of gene expression and associated secondary metabolism.
Proceedings of the Zoological Society Korea Conference
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1998.10b
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pp.113-113
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1998
In Saccharomyces cerevisiae UV irradiation and a variety of chemical DNA -damaging agents induce the transcription of specific genes, including several involved in DNA repair. One of the best characterized of DNA -damage inducible genes is PHRI, which encodes the apoenzyme for DNA photolyase. Basal-level and damage-induced expression of PHRI require an upstream activation sequence, UASPHRI. Here we report the identification of the UlvIE6 gene of S. cerevisiae as a regulator of UASPHRl activity. Surprisingly, the effect of deletion of UME6 is growth phase dependent. In wild-type cells PHRI is induced in late exponential phase, concomitant with the initiation of glycogen accumulation that precedes the diauxic shift. Deletion of UNIE6 abolishes this induction, decreases the steady-state concentration of photolyase molecules and PHRI mRNA, and increases the UV sensitivity of a rad2 mutant. The results suggest that UM E6 contributes to the regulated expression of a subset of damage-responsive genes in yeast. Furthermore, the upstream repression sequence, URSPHRI, is required for repression and damage-induced expression of PHRl. Here we show identification of YER169W and YDR096W as putative regulators acting through $URS_{PHRI}$. These open reading frames were designated as RPHI (YERl69W) and RPH2 (YDR096W) indicating regulator of PHRI. Simultaneous disruption of both genes showed a synergistic effect, producing a four-fold increase in basal level expression and a similar decrease m the induction ratio following treatment of methyl methanesulfonate(MMS). Mutation of the sequence ($AG_4$) bound by Rphlp rendered the promoter of PHRI insensitive to changes in RPHI or RPH2 status. The data suggest that RPHI and RPH2 act as damage-responsive negative regulators of PHRI. Surprisingly, the sequence bound by Rphlp in vitro is found to be $AG_4$ which is identical to the consensus binding site for the regulators Msn2p and Msn4p involved in stress-induced expression. Deletion of MSN2 and MSN4 has little effect on the induction$.$ ratio following DNA damage. However, all deletions led to a significant decrease in basal-level and induced expression of PHRI. These results imply that MSN2 and MSN4 are positive regulators of P HRI but are not required for DNA damage repression. [Supported by grant from NIH]om NIH]
Toxin-antitoxin (TA) systems are ubiquitous genetic modules that are evolutionally conserved in bacteria and archaea. TA systems composed of an intracellular toxin and its antidote (antitoxin) are currently classified into five types. Commonly, activation of toxins under stress conditions inhibits diverse cellular processes and consequently induces cell death or reversible growth inhibition. These effects of toxins play various physiological roles in such as regulation of gene expression, growth control (stress response), programmed cell arrest, persister cells, programmed cell death, phage protection, stabilization of mobile genetic elements or postsegregational killing of plasmid-free cells. Accordingly, bacterial TA systems are commonly considered as stress-responsive genetic modules. However, molecule screening for activation of toxin in TA system is available as development of antimicrobial agents. In addition, cytotoxic effect induced by toxin is used as effective cloning method with antitoxic effect of antitoxin; consequently cells containing cloning vector inserted a target gene can survive and false-positive transformants are removed. Also, TA system is applicable to efficient single protein production in biotechnology industry because toxins that are site-specific ribonuclease inhibit protein synthesis except for target protein. Furthermore, some TA systems that induce apoptosis in eukaryotic cells such as cancer cells or virus-infected cells would have a wide range of applications in eukaryotes, and it will lead to new ways of treating human disease. In this review, we summarize the current knowledge on bacterial TA systems and their applications.
Kim, Hyung-Tae;Park, Joo-Cheol;Lee, Chang-Seop;Park, Heon-Dong
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.30
no.2
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pp.308-319
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2003
Mechanical forces are known to have an effect on bone formation, maintenance and remodeling, and there is evidence that the development of the mandibular condyle in the rat or mouse is influenced by altered functional force. However, studies are lacking in molecular-biologic mechanism such as the identification of differentiation factor induced from functional force. Here a mouse model was used to investigate the functional stress-responsive gene or factors which is related to the altered force by comparing the expression genes of functional state and hypo-functional state of the mouse mandible. ICR mice were provisioned with either a soft, mushy diet (soft-diet group) or hard rat pellets (hard-diet group) beginning at weaning for the alteration of functional force and subsequently sacrificed at 89 days of age. Incisor of mice in group 1 were trimmed twice a week to reduce occlusal forces. After killing the animals, mandibular bone including condyle were collected for RNA extraction, subtractive hybridization, northern blot analysis and mRNA in-situ hybridization. The results as follows; 1. A total of 39 clones were sequenced, and 11 individual sequence types were subsequently identified by subtractive hybridization, as 28 clones were represented twice in the analyzed sets. 2. Consequently four candidate clones, FS-s (functional stress-specific)2, -5, -18, and -22 were identified and characterized by homolgy search and northern analysis. Four of these clones, FS-s2, -5, -18, and -22, were shown to be expressed differentially in the hard-diet group. 3. Histologic sections showed that osteoblastic activity along the bone trabeculae and active bone remodeling were significantly lower in soft than in hard diet animals. A soft diet seems to enable a longer period of endochondral ossification in the mandibular condyle. 4. Although the mRNAs of FS-s2, -5, -18, and -22 were expressed rarely by cells of the soft-diet group, highest expression was detected in the cells of the hard-diet group. Together with the above results, it is suggested that FS-s2, -5, -18, and -22 could act as an important factors controlling the tissue changes in response to functional stress. The exact functional significance of these findings remains to be established.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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