Lichen-forming fungi are known to have various biological activities, such as antioxidant, antimicrobial, antitumor, antiviral, anti-inflammation, and anti proliferative effects. However, the immunosuppressive effects of Bryoria sp. extract (BSE) have not previously been investigated. In this study, the inhibitory activity of BSE on the proliferation of $CD8^+$ T cells and the mixed lymphocytes reaction (MLR) was evaluated in vitro. BSE was non-toxic in spleen cells and suppressed the growth of splenocytes induced by anti-CD3. The suppressed cell population in spleen cells consisted of $CD8^+$ T cells and their proliferation was inhibited by the treatment with BSE. This extract significantly suppressed the IL-2 associated with T cell growth and $IFN-{\gamma}$ as the $CD8^+$ T cell marker. Furthermore, BSE reduced the expression of the IL-2 receptor alpha chain ($IL-2R{\alpha}$) on $CD8^+$ T cells and CD86 on dendritic cells by acting as antigen-presenting cells. Finally, the MLR produced by the co-culture of C57BL/6 and MMC-treated BALB/c was suppressed by BSE. IL-2, $IFN-{\gamma}$, and CD69 on $CD8^+$ T cells in MLR condition were inhibited by BSE. These results indicate that BSE inhibits the MLR via the suppression of $IL-2R{\alpha}$ expression in $CD8^+$ T cells. BSE has the potential to be developed as an anti-immunosuppression agent for organ transplants.
CSBHT is known to improve immunological response in mice and humans. In this study, CSBHT effect was examined in the context of CD4+ T cells' survival and TCR/CD3 induced activation responses. Spleen cells from 8 week BALB/c mice were cultured in CSBHT containing medium without activation for 24, 48 hr. The MTS assay and revealed that CSBHT did not stimulate spleen lymphocytes as mitogen. Spleen lymphocytes were treated with anti-CD3e/anti-CD28 antibodies for 48hr. Flow cytometry revealed that activity of T cell decreased with CSBHT concentration. CD4+ T cells were isolated and cultured ,in CSBHT containing medium for 48 hr. CSBHT did not affect survival of sorted CD4+ T cells without any involvement of APC. In order to evaluate the direct effect of CSBHT on helper T cells's proliferative capacity prior to activation, CD4+ T cells are isolated after 24hr of culture in CSBHT containing medium and activated with and without anti-CD3e/anti-CD28 activation for 48hr. A higher level of CD69 was observed in 1 ㎍/㎖ of CSBHT treatment than control using flow cytometry. But low CD69 expression was observed in 5㎍/㎖ of CSBHT treatment. Expression of mRNA for cytokines in CD4+ T cell revealed that IL-2 expression was increased in 1 ㎍/㎖. The expression of IL-2R α, INF- γ were increased with concentration. On the other hand mRNA of IL-4 was decreased in dose dependent manner. Results suggest that CSBHT may be desirable for CD4+ T cell's activity in immune responses. Further more, CSBHT may relatively activate Th1 and inactivate Th2.
Acetylarsonate was prepared for testing antitumor and immunological effects. It showed cytotoxicity directly on Sarcoma 180. L1210 and MOLT-4 by MTT assay. It did not seemed to trigger the mitosis of human lymphocytes in culture, but that showed the cytotoxicity with higher dose. The rosette formation and spleen weight of mouse which acetylarsonate was administered to for 2 weeks were increased. Furthermore, peripheral helper T- and cytotoxic/suppressor T-lymphocytes were increased in acetylarsonate-injected-mice significantly when it was estimated with simultaneous 2 color analysis using anti Lyt2-FITC and L3T4-PE monoclonal antibody by Flow cytometer.
Objectives : The purpose of this study is to observe the effects of Carthami Flos herbal-acupuncture (CF-HA) at Joksamni($ST_{36}$) on arthritis in mice induced by Collagen II. Methods : The author performed several experimental items, including arthritis evaluation, change in weight, spleen size and stenosis rate, change in cytokine level, IgG, IgM and anti-collagen II, change of immunocyte count and histological change of the CIA mouse joint. Conclusions are as follows: Results : 1. In the CF-HA, the arthritis index and rate and the incidence of arthritis were decreased as the experiment proceeded. 2. In the CF-HA, spleen swell and stenosis, joint edema and change were decreased. 3. In the CF-HA, the level of $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$ and $IFN-{\gamma}$ in blood serum were significantly decreased. 4. In the CF-HA, the level of IgG, IgM and anti-collagen II were decreased. 5. In the CF- HA, $IFN-{\gamma}$, $IFN-{\gamma}/IL-4$, IL-10 of the culture fluid was decreased. 6. In the CF-HA, the cell rate of $CD3e^+$ and $CD45R^+$, $CD4^+$ and $CD8^+$, $CD4^+/CD25^+$ in spleen was similar to the cell rate of the normal group. 7. In the CF-HA, the cell rate of $CD4^+/CD25^+$, $CD45R^+/CD69^+$ in a lymph node was decreased as in the normal group. 8. In the CF-HA, the cell rate of $CD3^+/CD69^+$, $CD11b^+/Gr-1^+$ in joints was decreased as in the normal group. 9. In the CF-HA, the cartilage destruction and the inflammation cell growth in the H&E stain were decreased. The collagen fiber in the M&T stain were less destructed, therefore the result was similar to the normal group. Conclusions : These results suggest that CH-HA at $ST_{36}$ has an effect in controlling immune reaction and suppressing inflammation in rheumatoid arthritis therefore, the continuous flow of the following study is expected.
Male weanling Sprague Dawley rats were used to evaluate the effect of dietary rice starch with different particle size on growth performance, intestinal function and proliferation. There were two dietary treatment: rice starch (RS), ultra finely pulverized rice starch with less than $15{\mu}m$ size (PRS). They were eight rats per treatment. In vitro digestibility, body weight change and organs weight were evaluated. Serum GPT, GOT and blood urea nitrogen were analyzed. Transit time, short chain fatty acid contents of cecum, and cell proliferation of duodenum and jejunum were measured. In vitro digestibility of PRS was higher than that of RS. Rats fed ultra finely pulverized rice starch for 3 weeks grew faster than rats fed rice starch. PRS group has higher weights of liver, kidney, spleen and epididymal fat pad, perhaps as a result of increased digestibility. GPT and GOT were not different between two groups. Blood urea nitrogen was higher in RS-fed rats than that of PRS-fed rats. Feeding ultra finely pulverized rice starch resulted in a proliferation of duodenum significantly. These results suggest that ultra finely pulverized rice starch increases the growth performance in weanling animals with reduced number of cells in the cell cycle of small intestine.
Objective & Methods : The purpose of this study is to observe the effects of Angelicae Pubescentis Radix herbal-acupuncture solution(APR-HAS) at Joksamni(ST36) on collagen IT induced arthritis in DBA/1J mice. The author performed several experimental items to analyze several cytokines and immune cells related with RA. Results : 1. In the APR-HA group, the incidence of arthritis and arthritis index were significantly decreased. 2. In APR-HA group, the levels of IL-6, $INF-{\gamma}$, $TNF-{\alpha}$, IgG, IgM, $IL-{\beta}$ and Anti-collagen II in serum of the CIA mouse were significantly decreased. 3. In APR-HA group, the level of $IFN-{\gamma}$, IL-4 in the CIA mouse spleen cell culture were significantly decreased. 4. In histology, the cartilage destruction and synovial cell proliferation were decreased in the APR-HA group, and the collagen fiber expressions in the APR-HA group were similar with that of the Normal group. 5. In the APR-HA group, CD3e+/CD19+ and CD4+/CD8+ were similarly maintained as Normal group in the CIA mouse lymph nodes, 6. In the APR-HA group, CD3e+/CD69+ was significantly decreased in the CIA mouse joint. 7. In the APR-HA group, CD11a+/CD19+ and CD11b+/Gr-l+ were significantly decreased in the CIA mouse lymph nodes 8. In the APR-HA group, CD4+/CD25+ was decreased in the CIA mouse spleen cell. 9. In the APR-HA group, CD4+/CD25+ was similarly maintained as Normal group in the CIA mouse lymph nodes.
Colostrum contains various kinds of cytokines including TGF-${\beta}$ which is known to be multifunctional in immune response and act as an anti-inflammatory agent. First, we measured the amount of TGF-${\beta}$ in bovine and human colostrum. Expression pattern of TGF-${\beta}$ isotypes was dramatically different between human and bovine colostrial samples. Bovine colostrum collected on day 1 post-delivery retained $41.79{\pm}16.96ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 1 and $108.4{\pm}78.65ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 2 while in human, $284{\pm}124.75ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 1 and $29.75{\pm}6.73ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 2. Thus, TGF-${\beta}$ is the predominant TGF-${\beta}$ isotype in bovine colostrum and vice versa in human colostrum. Both TGF-${\beta}$ isotypes diminished significantly in human and bovine colostrum with time. Next, biological activity of colostrial samples was examined in vitro. Both human and bovine colostrum increased IgA synthesis by LPS-activated mouse spleen B cells, which is a typical effect of TGF-${\beta}$ on the mouse B cell differentiation. Futhermore, we found that anti-proliferative activity in MV1LU cells by colostrum samples disappeared by addition of anti-TGF-${\beta}$ 1 and anti-TGF-${\beta}$ 2 antibody. In conclusion, there are substantial amounts of biologically active TGF-${\beta}$ 1 and TGF-${\beta}$ 2 in bovine and human colostrum. The results that the colostrum can increase IgA expression has important implications since IgA is the major Ig class produced in the gastrointestinal tract. We have previously shown that the stimulatory effect of Bifidobacteria bifidum on spllen B cells was quite similar to that of LPS which is a well-known polyclonal activator for murine B cells. In the present study, we further asked whether B. bifidum regulate the synthesis of IgA by mucosal lymphoid cells present in Peyers patches (PP) and mesenteric lymph nodes (MLN). B. bifidum alone, but not C. perfringens, significantly induced overall IgA and IgM synthesis by both MLN and PP cells. This observation indicates that B. bifidum possesses a modulatory effect on the mucosal antibody production in vivo. We, therefore, investigated the mucosal antibody prodduction following peroral administration of B. bifidum to mice. Ingested B. bifidum significantly increased the numbers of Ig (IgM, IgG, and IgA) secreting cells in the culture of both MLN and spleen cells, indicating that peroally introduced B. bifidum enhances mucosal and systemic antibody response. Importantly, however, B. bifidum itself does not induce the own specific antibody responses, implying that B. bifidum do not incite any unwanted immune reaction. Subsequently, it was found that excapsulation of B. bifidum further augments the total IgA production by increasing the number of IgA-secreting cells in the culture of both MLN and spleen cells. Finally, we found that the immuno-stimulating activity of B. bifidum is due to its cell wall components but not due to any actively secreting component(s) from bacteria. Thus our data reveal that peroral administration of B. bifidum can enhance intestinal IgA production and that encapsulation of B. bifidum further reinforces the IgA production.
한천올리고당을 식품으로 활용하기 위한 전제 조건인 안전성 실험결과, 한천올리고당 LD$_{50}$ 은 1359mg/kg으로 GRAS(Generally Recognized As Safe)등급에 해당하는 무해첨가물에 해당되었다. 또한 5% 한천올리고당의 항돌연변이 효과는 TA 98균주에 88.3%, TA 100균주에 54%의 저해효과를 나타내어 강력한 항돌연변원성 물질임을 알 수 있었다. 한천올리고당의 면역활성을 평가하기 위하여 비장세포에 한천올리고당을 200${\mu}\ell$/$m\ell$ 첨가하여 배양한 결과, 대조군과 비교시 배양 20일 이후에도 비장세포수가 감소하지 않아 한천올리고당의 면역증진 효과를 알 수 있었다.
SCRT (Sochungyong-tang) has been used for immune disease in human. The purpose of this study was effect of Helper T cell, major regulator of immune system. Spleen cell from 8 week BALB/c mice were cultured in SCRT containing medium without activation for 48 h. The MTS assay and flow cytometry revealed that SCRT treated Iympocyte were non-effect in percentage of CD4+ T cell. Subsequently CD4+ T cell were isolated and cultured in SCRT containing medium. SCRT were non-effective on CD4+ T cell without any involvement of APC. In order to evaluate the direct effect of SCRT on Helper T cell, CD4+ T cell isolated after 48 h of culture in SCRT containing medium and activated with and without anti-CD3/anti-CD28 activation for 48 h. A lower level of CD69 was observed in SCRT treated cells in flow cytometry analysis. Subsequently Using RT-PCR analysis the expression of mRNA for IL-2, INF-γ are upregulated and, IL-4 is downregulated in CD4 T cell. The result suggests that SCRT makes Th1 significantly increased and Th2 relatively inhibited. The results suggest that SCRT potentiate Th1 cell and decrease Th2 development at the same time, which is believed to be bemeficial for IgE-mediated responses.
The immunostimulatory activities of Lactobacillus plantarum, the major microorganism in kimchi fermentations were investigated. Five strains of L. plantarum exhibited weak immunopotentiating activity, but L. plantarum PS-21 showed as strong a mitogenic activity as Bifidobacterium adolescentis M101-4, a known positive strain. It is of interest that, L. plantarum PS-21 stimulated proliferation of Peyer's patch cells, one of the most important tissues in the gut-associated lymphoreticular system. Cell' wall fractions from L. plantarum PS-21 also showed strong mitogenic activity compared with the soluble cytoplasmic fraction. A peptidoglycan fraction (PG) extracted from the cell wall of L. plantarum PS-21 was identified as an active mitogenic component when used in murine lymph node and spleen cell test systems. PG showed dose-dependent mitogenic activity and significantly enhanced antibody production in lymph node cells when studied in vitro. The lysosomal enzyme activity of murine peritoneal macrophages was increased when analyzed following injection of PG to the host animal. Furthermore, PG enhanced the production of cytokines such ($TNF-{\alpha}$ and IL-6) in the in vitro culture of RAW 264.7 macrophage cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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