Nek2 is a mammalian protein kinase that is structurally homologous to NIMA, a mitotic regulator in Aspergillus nidulans. To understand cellular processes in which Nek2 participates during mammalian development, we investigated the expression and subcellular localization of Nek2 in vivo. The Nek2 protein was detected in spermatocytes and in a fraction of actively dividing ovarian follicle cells and of embryonic tissues. We also observed that Nek2 was localized in both the nucleus and centrosome in embryonic cells. Such localization pattern supports the proposal that Nek2 is a mitotic regulator that is involved in multiple cell cycle events during mammalian development.
Recently, a significant understanding of the molecular mechanisms regulating spermatogenesis has been achieved utilizing small RNA molecules (small RNAs), including small interfering RNAs (siRNAs), microRNAs (miRNAs), and Piwi-interacting RNAs (piRNAs) which emerged as important regulators of gene expression at the post-transcriptional or translation level. piRNAs are only present in pachytene spermatocytes and round spermatids, whereas miRNAs are expressed abundantly in male germ cells throughout spermatogenesis. This review is aimed at providing a glimpse of piRNAs and their interacting family proteins such as PIWIL1, PIWIL2, and PIWIL4 in spermatogenesis.
한국 서해안에서 채집한 돌가자미 Kareius bicoloatus의 정자형성과정 중 생식세포, Cyst 상피세포 및 간질세포들의 미세구조를 전자현미경 관찰에 의해 조사하였다. 제1차 정모세포에서 연접사복합체(synaptonemal complex)들이 성숙분열 중 전기의 쌍사기에 출현하였다. 특히, 감수분열을 위한 테스토스테론 호르몬을 분비하는 세포로 알려진 간질세포(Leydig cell)들은 제1차 정모세포 및 정세포 가까이에서 뚜렷하게 출현하였다. 포상핵을 가지는 이들 간질세포들은 소엽 간 간질조직 내의 섬유모세포들에 의해 둘러싸여 출현하였다. 특히, 이들 세포들은 타원형 또는 구상의 미토콘드리아들을 가지는데, 미토콘드리아들은 관상 크리스테(cristae)를 갖는 것이 특징이다. 또한, 활면소포체와 여러 개의 공포들도 세포질 내에서 출현하였다. 성장 발달 중인 정소 내에서 정소소엽 간 간질조직에서 나타나는 잘 발달된 간질세포들(스테로이드호르몬분비세포)은 포상의 핵과 관상 크리스테를 갖는 미토콘드리아를 가지며, 활면소체를 갖는 형태적 특징을 보였다. 정자형성과정 중, 제1차, 제2차 정모세포들은 cyst 상피세포 (Sertoli cell)들에 인접하거나 부착하여 나타났다. cyst 상피세포들의 핵은 길게 신장된 타원형 또는 삼각형의 핵을 가지며 세포질 내에 여러 개의 미토콘드리아가 출현하였다. 성장 발달 중인 정소 내에서 제2차 정모세포들과 정세포 가까이에 위치한 cyst 상피세포의 세포질 내에는 지방적, 미토콘드리아 로제트(mitochondeial rosettes)들과 글리코겐 입자들이 나타났다. 특히, 후기 성장 중인 정소 내에서 cyst 상피세포의 세포질 내에는 미토콘드리아, 소포체, 작은 지방적 및 다량의 글리코겐입자들이 출현하였다. 정세포 발달(정자변태) 후기에 기부중심립이 핵막에 부착하며, 원위중심립은 편모의 기저체를 형성하고, 편모축사를 형성하였다. 정자 첨체는 다른 경골어류에서와 같이 첨체를 형성하지 않았다. 정자 두부의 길이는 대략 $3{\mu}m$ 정도이며, 미부길이는 약 $30{\mu}m$ 정도이다. 정자 미부편모의 축사(axoneme)는 주변에 9쌍의 주변이중미세관 (nine outer doublet microtubule)이 있고 중앙에 두 개의 중앙미세관(two centrial singlet microtubules)으로 구성되어 9+2구조를 나타내었다. 본 종의 정자는 체외수정 종들이 갖는 두 개의 axonemal lateral fin을 가진다. 본 연구에서 여러 단계의 생식세포들 가까이에서 출현하는 cyst 상피세포(Sertoli cell)들은 영양공급, 식세포작용, 스테로이드형성의 3가지 기능을 나타내었다. 특히, 정소 발달단계 중 퇴화 회복기에 출현하는 cyst 상피세포들의 핵은 배정 후에는 모양이 불규칙하게 나타나며, 식세포작용을 나타내는 여러 특징들이 cyst 상피세포의 세포질 내에서 나타나고 있어, cyst 상피세포들은 배정 후 방출되지 않은 생식세포들의 퇴화 흡수에 관여하는 것으로 추정된다.
최근 2-bromopropane(2-BP)이 사람과 실험동물에서 정소독성을 유발한다고 보고된 바 있다. 그러나 수컷 생식기계에 있어서 2-BP의 지연효과에 대해서는 세부적으로 조사된 바가 없다. 본 연구는 Sprague-Dawley 랫드에서 2-BP의 정소독성과 정자발생의 회복을 조사하기 위하여 수행하였다. 5주령의 수컷 랫드에게 2-BP를 1,000mg/kg 용량으로 4주간 반복투여하였고, 투여시작후 1, 2, 3, 4 및 12주째에 부검하였다. 정소독성의 평가는 병리조직학적인 질적평가와 생식기관 중량, 정자두부수 및 재생지수 등의 양적평가로 수행하였다. 시험결과 2-BP를 투여한 랫드에서는 체중과 정소 및 정소상체 중량이 대조군에 비해 시간의존적인 방식으로 억제 또는 감소하였다. 병리조직검사에서는 투여 1주째에 stage I~IV에서 정조세포와 stage VII~IX에서 세사전기 및 세사기의 정모세포가 현저하게 소실되었다. 정조세포는 투여 2주째에 모든 stage에서 광범위하게 소실되었으며, 정자발생주기가 진행됨에 따라 2, 3 및 4주째에는 접합기 정모세포, 비후기 정모세포 및 원형 정자세포가 전구세포의 결손에 의해 점진적으로 소실되었다. 지지세포의 기능적 이상을 암시하는 지지세포의 공포화와 정자세포 저류는 상기한 모든 시기에서 관찰되었다. 8주 회복후인 12주째에는 대부분의 곡세정관이 심하게 위축되어 지지세포만 관찰되었으며, 간질조직에서는 간질세포의 과형성이 인정되었다. 또한 2-BP에 의해 유발된 정소의 손상이 비가역적임을 암시해주는 정자두부와 재생지수의 현저한 감소가 관찰되었다. 상기결과는 랫드의 2-BP를 1,000mg/kg의 용량으로 4주간 반복투여하면 정조세포의 결손에 의해 점진적으로 생식세포가 감소하고 이로 인하여 장기적인 정소위축이 유발된다는 것을 암시해준다.
Present study analyzed the changes in peripheral blood testosterone concentrations and testicular cytogram in relation to age and semen quality in crossbred males. Three different age groups of crossbred males viz. bull calves (6 months, n = 5), young bulls (15 months, n = 5) and adult bulls (4 to 6 years, n = 8) were utilized for the study. Testicular fine needle aspiration cytology technique was used to quantify testicular cytology and their indices. Peripheral blood testosterone concentrations were measured using enzyme-linked immunosorbent assay method. Semen samples collected from adult bulls were microscopically evaluated for quality parameters. Mean peripheral blood testosterone concentrations in bull calves, young bulls and adult bulls were $2.28{\pm}0.09ng/mL$, $1.42{\pm}0.22ng/mL$ and $5.66{\pm}1.08ng/mL$ respectively, and that in adult bulls were significantly different (p<0.01) from young bulls and bull calves. There was no significant difference between the proportion of different testicular cells in bull calves and young bulls. Between young and adult bulls, significant differences (p<0.01) were observed in the proportion of spermatocytes, spermatozoa, and sperm: Sertoli cell ratio. The proportions of Sertoli cells showed a significant difference (p<0.01) between the three age groups. The number of primary spermatocytes had a positive correlation with peripheral blood testosterone concentrations in bull calves (r = 0.719, p<0.01). Number of Sertoli cells per 100 germ cells was negatively correlated with blood testosterone concentration in young bulls (r = -0.713, p<0.01). Among different semen parameters in adult bulls, ejaculate volume (r = 0.790, p<0.05) had positive relationship, and sperm motility had significant negative correlation (r = -0.711, p<0.05) with testosterone concentrations. The number of Sertoli cells and Sertoli cell index had a positive correlation with various semen quality parameters (p<0.001). Results of the present study conclude that number of Sertoli cells and Sertoli cell index are good indicators of semen quality, but peripheral blood testosterone concentrations may not have a direct relationship with various seminal attributes in crossbred bulls.
Nicotine(2~15mg/kg 2주간, 100mg/kg 회 투여)을 생후 4개월령 수컷 생쥐에 투여한 후, 고환에 미치는 광학현미경적 소견은 다음과 같다. 1. Nicotine 2mg/kg 투여군에서는 정세관과 정세관 주위의 Leydig 세포도 핵과 세포질이 뚜렷한 정상적인 소견을 나타내었으나, 5 mg/kg 투여군에서는 Leydig 세포의 핵과 세포질이 다소 비후되었으며, 염색정도가 약하였다. 2. 10 mg/kg 투여군은 대부분 정세관내의 정자발생의 배열이 불규칙적으로 존재하여, 정세관의 단계를 구분할 수 없었고, Leydig 세포도 핵이 융해되어 관찰되지 않았고, 세포질 역시 불명확하게 나타났다. 3. 15 mg/kg 투여군에서는 정모세포 및 정자세포의 핵과 세포질이 파괴되었으며, 정세관의 내강이 관찰되지 않을 정도로 섬유화된 결합조직이 채워져 있었다.
우리나라 낙동강 하류에 서식하는 뻘조개, Anodonta (Sinanodonta) woodiana의 생식소발달 과정 및 생식주기 그리고 임란기 등을 조사하였다. 1. 생식소는 내장낭의 간중사선 하방으로부터 족부의 외벽근층내에 있는 섬유성 망상결제조직까지 분포되어 있다. 난소는 많은 난소소낭으로 구성되어 있는데, 이들 소낭의 내공상피가 생식상피 기능을 하고 있다. 2. 초기난소 몇 정소의 생식상피상에는 호산성 과립세포와 부분화 간충조직들이 풍부하게 나타나고 있으며, 이들은 생식소 발달과 함께 그 량이 감소하고 있다. 3. 산란은 고수온기인 8월과 9월을 제외하고 년중 일어나고 있는데 1월에서 3월과, 6월에서 7월의 2회에 걸쳐 성기를 나타내고 있다. 4. 보육낭내에 trochophore 유생을 임란한 개체는 8월과 9월을 제외하고 년중 나타났으며 glochidia 유생을 임란한 개체는 9월을 제외하고 연중 나타났는데, 5월이 $72.7\%$ 년중 가장 높은 임란율을 나타내고 있다.
본 시험은 6가지 다른 사양방법이 White Plymouth Rock 육용종 웅계의 생체중, 정소, 계관 그리고 뇌하수체의 발육 및 성성숙에 미치는 영향을 구명하기 위하여 부화후부터 22주령까지 2주간격으로 생체중, 정소, 계관 그리고 뇌하수체의 중량이 조사되었으며, 또한 정소조직과 정액성상이 조사되었다. 그 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 생체중, 정소, 계관의 발육은 10주령 이후부터 무제한급이군들이 제한급이군들(무제한급이군들의 70%급이)보다 2주 더 빠름을 나타내었다. 정소 및 계관의 급증시기는 무제한급이군들에서 20주령이었고, 제한급이군들에서 22주령이었다. 2. 뇌하수체의 무게는 부화후부터 22주령까지 4주령, 14주령, 16주령을 제외하고 각 주령별, 각 처리군간에 유의성이 나타나지 않았다. 뇌하수체의 중량은 주령이 경과하면서 완만한 증가를 나타내었다. 3. 22주령까지에서 주령, 생체중, 정소, 계관 및 뇌하수체간에는 고도의 유의적인 상관관계를 나타내었다. 4. 세정관의 관경과 강경은 부화후부터 10주령까지 점진적으로 증가되다가 무제한 급이군들에서는 12주령부터 제한급이군들에서는 14주령부터 급증하기 시작하였고, 그 후에도 22주령까지 계속증가되었다.
This study was carried out to evaluate the testicular toxicity of 2-bromopropane (2-BP), which recently caused occupational intoxication on the reproductive and hematopoietic system in Koreans, using light microscopy, immunohistochemistry and flow cytometry. 10 weeks old male Sprague-Dawley (SD) rats were treated with 0.5 g/㎏/day of 2-BP orally for 8 consecutive weeks. The testes of the rats were vascularly perfused with Karnovsky's solution or immersed in Bouin's solution, embedded in plastic and evaluated with light microscopy. And relative proportions of haploid, diploid, and tetra-ploid states of DNA ploidy in the testicular cell suspensions of the SD rats were examined by flow cytometry. 2-BP induced severe testicular atrophy, depletion and degeneration of spermatogonia, spermatocytes, and spermatids and mild hyperplasia of Leydig cells without significant morphological changes. The Leydig cell hyperplasia was confirmed by immunohistochemistry using proliferating cell nuclear antigen (PCNA). The immunopositive cells against PCNA were observed in the nuclei oj some interstitial cells. Relative proportions of haploid states of DNA ploidy decreased in the atrophic testicular cell suspensions comparing with those of the control. In conclusion, 2-BP induced testicular atrophy with Leydig cell hyperplasia as examined by histopathology, immunohistochemistry and DNA flow cytometry.
Lung fluke, Paragonimus heterotremus, is a flatworm causing pulmonary paragonimiasis in cats, dogs, and humans in Southeast Asia. We examined the ultrastructure of the testis of adult P. heterotremus with special attention to spermatogenesis and spermiogenesis using scanning and transmission electron microscopy. The full sequence of spermatogenesis and spermiogenesis, from the capsular basal lamina to the luminal surface, was demonstrated. The sequence comprises spermatogonia, spermatocytes with obvious nuclear synaptonemal complexes, spermatids, and eventual spermatozoa. Moreover, full steps of spermatid differentiation were shown which consisted of 1) early stage, 2) differentiation stage representing the flagella, intercentriolar body, basal body, striated rootlets, and electron dense nucleus of thread-like lamellar configuration, and 3) growing spermatid flagella. Detailed ultrastructure of 2 different types of spermatozoa was also shown in this study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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