Fermentation characteristics of Jerusalem Artichoke of yeast K.fragilis CBS 1555 were investigated experimentally and quantitatively according to the change of initial sugar concentrations and initial PHs of fermentation broth. Initial sugar concentrations employed were 26, 45, 65, 105, 180, and 215g/1. And initial PHs of fermentation broth were 3, 5.5, 7 and 9. The maximum specific growth rate was observed as 0.4hr-1 at 65g/1 of initial sugar concentration. The maximum specific alcohol production rate was 1.68g/ghr at 105g/1 of initial sugar concentration Cell yield and ethanol yield represent the maximum values such as 0.14 and 0.49 respectively when the initial sugar concentration was 25g/1. The maximum of ethano1 fermentability, 97% was obtained at the initial concentrations, 26 and 45g/1. However, the maximum of total ethanol yield productivity was 2.78g/1hr when the initial concentration was 215g/1. And also the optimum PH was found 5.5 for both specific growth rate and specific alcohol production rate.
An extracellular polysaccharide, methylan, was produced under the specific conditions by Methylobacterium organophilum from methanol. The specific growth rate of cells was approximately constant regardless of C/N ratio and the specific product yield was maximum at a C/N ratio of 30. Methylan production was suppressed by the deficiency of mineral ions such as Mn$^{++}$ or Fe$^{++}$ ion. The optimal pH for cell growth and methylan production was 7. Whereas the optimal temperature for cell growth was found to be 37$^{\circ}C$, that for methylan production was 3$0^{\circ}C$. The methanol concentration above 4% completely inhibited the cell growth. The initial methanol concentration for the maximal production of methylan was 0.5% (v/v) and above this concentration, methylan production was markedly inhibited. To overcome the substrate toxicity and inhibition for both cell growth and methylan production, a fed-bach culture of intermittent feeding within 5 g/l methanol was conducted under the optimal culture condition. Methylan production of was stimulated by nitrogen limitation and methylan was accumulated up to 8.7 g/1 and cell mass also increased up to 12.4 g/l.
The effect of biomass concentration of Saccharomyces cerevisiae ATCC 24858 on specific growth rates, biomass yields, ethanol yields and productivity in the batch fermentation of rotary shaker was investigated. The specific growth rate decreased according to the increase in the biomass density and finally became zero at a biomass concentration, 55g/L. The ethanol yield $Y_{p/s}$ represented a constant value, 0.43, regardless of the change of biomass concentrations. However, the biomass yield $Y_{x/s}$ showed a trend to diminish in values with augmentation of biomass density and ultimately to reach zero at 55g/L of biomass concentration. The ethanol productivity increased linearly with biomass concentration so that, in case of initial sugar concentration, 170g/L, the productivity for 55g/L of biomass density rose up to 30g/L$\cdot$hr for all the batch fermentations. And also the ethanol concentration inhibiting completely the growth was verified 95g/L by applying experimental data to Luong's equation.
Arthrobacter sp. A-6 was cultivated and DFA III(di-fructofuranose dianhydride) was produced with inulin fructotransferase from the chicory root. The specific growth rate, yield of cell mass and yield of enzyme from the culture in variable chicory root extracts were studied and the results compared. Standard inulin solution(10%) was treated with the crude enzyme solution of inulin fructotransferase from the cell culture, 1.14mg/ml of DFA III was produced. The enzyme reactions were processed with various preparations of chicory root extracts in the same conditions. The highest yield of DFA III production(2.29 mg/ml) was obtained from the chicory roots without washing or extraction. The yield of DFA III from the washed chicory roots without extraction was at lowest(0.44 mg/ml). The production process of inulin fructotransferase and DFA III from the chicory root without prewashing or extraction steps were more efficient.
In order to investigate the effect of dissolved oxygen (DO) level on AVM $B_{1a}$ production by a high yielding mutant of Streptomyces avermitilis, five sets of bioreactor cultures were performed under variously controlled DO levels. Using an online computer control system, the agitation speed and aeration rate were automatically controlled in an adaptive manner, responding timely to the oxygen requirement of the producer microorganism. In the two cultures of DO limitation, the onset of AVM $B_{1a}$ biosynthesis was observed to casually coincide with the fermentation time when oxygen-limited conditions were overcome by the producing microorganism. In contrast, this phenomenon did not occur in the parallel fermentations with DO levels controlled at around 30% and 40% throughout the entire fermentation period, showing an almost growth-associated mode of AVM $B_{1a}$ production: AVM $B_{1a}$ biosynthesis under the environments of high DO levels started much earlier than the corresponding oxygen-limited cultures, leading to a significant enhancement of AVM $B_{1a}$ production during the exponential stage. Consequently, approximately 6-fold and 9-fold increases in the final AVM $B_{1a}$ production were obtained in 30% and 40% DO-controlled fermentations, respectively, especially when compared with the culture of severe DO limitation (the culture with 0% DO level during the exponential phase). The production yield ($Y_{p/x}$), volumetric production rate (Qp), and specific production rate (${\bar{q}}_p$) of the 40% DO-controlled culture were observed to be 14%, 15%, and 15% higher, respectively, than those of the parallel cultures that were performed under an excessive agitation speed (350 rpm) and aeration rate (1 vvm) to maintain sufficiently high DO levels throughout the entire fermentation period. These results suggest that high shear damage of the high-yielding strain due to an excessive agitation speed is the primary reason for the reduction of the AVM $B_{1a}$ biosynthetic capability of the producer. As for the cell growth, exponential growth patterns during the initial 3 days were observed in the fermentations of sufficient DO levels, whereas almost linear patterns of cell growth were observed in the other two cultures of DO limitation during the identical period, resulting in apparently lower amounts of DCW. These results led us to conclude that maintenance of optimum DO levels, but not too high to cause potential shear damage on the producer, was crucial not only for the cell growth, but also for the enhanced production of AVM $B_{1a}$ by the filamentous mycelial cells of Streptomyces avermitilis.
1) To study the productivity of single cell protein from the n-paraffin utilizing yeast, 235 yeast strains were isolatea from 90 samples 2) Optimum cell growth temperature of three strains selected was 40~45$^{\circ}C$ and these were identified as Candida tropicalis, Candida krusei and Torulopsis molischiana. 3) A-28 strain easily assimilated tetradecane, hexadecane and octadecane, but B-8 strain and C-15 strain assimilated more hexadecane than other n-paraffins. 4) Out of the selected three strains, the mass doubling time, specific growth rate and cell yield were 3.4~4.0 hours, 0.170~0.215, 86~98%, respectively. 5) Crude protein, fat, fiber, ash and nitrogen free extract of the selected three strains were found to be 48.2~61.2% 3.7~8.0%, 3.5~4.2%, 5.6~6.7%, 23.5~31.8%, respectively, and thiamine and riboflavin contents of dried yeast cell were 0.78~0.93 mg% and 6.03~7.3 mg%, respectively. 6) Yeast protein contained evenly most of amino acid, but the sulfur-containing amino acids were particularly low.
PASSARINHA L. A.;DIOGO M. M.;QUEIROZ J. A.;MONTEIRO G. A.;FONSECA L. P.;PRAZERES D. M. F.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.1
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pp.20-24
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2006
Plasmid DNA (pDNA) is a product of interest for many biopharmaceutical companies and research laboratories, because of increase in the number of gene therapy protocols that use nonviral vectors. This work was undertaken to study the effect of antibiotic and dissolved oxygen concentration (DOC) on the production of a ColE 1-type plasmid (pVAX1-LacZ) hosted in Escherichia coli $DH5\alpha$ and cultured in a batch fermentor with 0.751 of Terrific Broth. A decrease in the DOC from $60\%\;to\;5\%$ was shown to increase the specific pDNA concentration approximately 1.5-fold, due to the downregulation of growth. Additionally, this increase in the pDNA concentration led to a 2.2-fold increase in the purity of cell lysates obtained after cell lysis. However, the use of higher DOC led to 2.8-fold higher volumetric productivity as a consequence of a faster growth rate, reducing the fermentation time from 24 to 8 h. Interestingly, the specific pDNA concentration, and pDNA productivity and purity were always higher $(10-15\%)$ in the absence of antibiotic. Overall, the data indicate that nonselective conditions can be used without compromising yield, productivity, and purity of pDNA.
To yield high concentrations of protein expressed by genetically modified Escherichia coli, it is important that the bacterial strains are cultivated to high cell density in industrial bioprocesses. Since the expressed target protein is mostly accumulated inside the E. coli cells, the cellular product formation can be directly correlated to the bacterial biomass concentration. The typical way to determine this concentration is to sample offline. Such manual sampling, however, wastes time and is not efficient for acquiring direct feedback to control a fedbatch fermentation. An E. coli K12-derived strain was cultivated to high cell density in a pressurized stirred bioreactor on a pilot scale, by detecting biomass concentration online using a capacitance probe. This E. coli strain was grown in pure minimal medium using two carbon sources (glucose and glycerol). By applying exponential feeding profiles corresponding to a constant specific growth rate, the E. coli culture grew under carbon-limited conditions to minimize overflow metabolites. A high linearity was found between capacitance and biomass concentration, whereby up to 85 g/L dry cell weight was measured. To validate the viability of the culture, the oxygen transfer rate (OTR) was determined online, yielding maximum values of 0.69 mol/l/h and 0.98mol/l/h by using glucose and glycerol as carbon sources, respectively. Consequently, online monitoring of biomass using a capacitance probe provides direct and fast information about the viable E. coli biomass generated under aerobic fermentation conditions at elevated headspace pressures.
Kim, Sang-Yong;Yoon, Sang-Hyun;Kim, Jung-Min;Oh, Deok-Kun
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.28
no.5
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pp.970-973
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1996
Effect of cell density on the xylitol production from xylose by Candida parapsilosis KFCC 10875 was investigated. The concentrated cells were obtained by centrifugation of culture broth. The xylitol production rate was maximum at the cell concentration of 20 g/l and the specific xylitol production rate decreased when the cell concentration was increased due to oxygen limitation. Effect of the initial concentration of xylose on the xylitol production was also examined using the concentrated cells of 20 g/l. The xylitol production rate, specific xylitol production rate, and xylitol yield from xylose were maximum at 170 g/l xylose. Above 170 g/l xylose, the xylitol production rate was remarkably decreased. The concentrated cells could also be obtained by adjusting the dissolved oxygen (DO) during fermentation. The rapid accumulation of cells up to 20 g/l was achieved by maintaining an increased level of DO during the exponential growth phase and then, for the efficient xylitol production, the DO was changed to a low level in the range of 0.7-1.5%. A fed-batch fermentation of xylose by adjusting the DO level was carried out in a fermentor and the final xylitol concentration of 140 g/l from xylose of 200 g/l could be obtained for 56 h fermentation.
An obligatory type II methanotroph Methylosinus trichosporium OB3b was cultivated on methanol as a sole carbon and energy source. The effects of methanol concentration, pH, temperature, nitrogen source and phosphate concentration on cell growth were investigated and the results were compared with the growth on methane, which had been studied previously. When $(NH_4)_2SO_4$ was used as a nitrogen source, the maximal specific growth rate (${\mu}max$) on methanol was $0.20hr^{-1}$ and the carbon conversion efficiency(CCE) was 43%. In comparison, on methane, ${\mu}max$ and CCE were $0.08hr^{-1}$ and 32%, respectively. Ammonia was found to be a better nitrogen source for methanol-growing cells. Cell yield on nitrogen (YX/N) was the same regardless of nitrogen source as 7.14g dry cells/g N, but the yield on methanol(YX/N) was higher with ammonia(0.8g dry cells/g MeOH) than with nitrate(0.64g dry cells/g MeOH). Optimal pH and temperature were 7.0 and $30^{\circ}C$, respectively. Methanol inhibition on cell growth was observed at above 0.5%(v/v). Inhibition by phosphate was observed at above 60mM, although the inhibition on methanol dehydrogenase activity started at a much lower level of 20mM. Based on the experimental findings, the cellular physiology of M. trichosporium OB3b growing on the two closely-related carbon sources were discussed extensively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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