An Exponetial feeding strategy has been frequently used in fed-batch fermentation of recombinant E. coli. In this feeding scheme, growth yield and initial cell concentration, which can be erroneously determined, are needed to calculate the feed rate for controlling specific growth rate at the set point. The effect of the incorrect growth yield and initial cell concentration on the control of the specific growth rate was theoretically analyzed. Insignificance of the correctness of those parameters for the control of the specific growth rate was shown theoretically and experimentally.
Batch growth of plant cell suspension cultures of Thalictrum rugosum was studied to clarify the kinetic behaviors. It was found that the product formation was growth associated. The specific growth rate was $0.20-0.25\;day\;^{-1}$/TEX> at the growth phase and the FW/DCW ratio was an interesting parameter which represented the status of the cells or the status of sugar concentration. The cell yield was 0.36 g cells/g sugar. The maximum berberine level was 139 mg/L of which 120 mg/L was intracellular. In terms of the specific content of berberine, the product was 1.10% of dry cell weight. At the growth phase, the relationship between the specific growth rate and sugar concentration was described well by Monod kinetics.
Fermentation parameters were estimated by use of a vent gas analyzer coupled to a computer data acquisition system in cultivation of Phellinus linteus WI-001, pro-ducer of polysaccharides known to have potent anticancer activities. Oxygen uptake rate(OUR), a critical indicator of the cells activities, was calculated by applying oxygen mass balance. In addition, by dividing the oxygen uptake rate hy the total oxygen consumed, on-line estimation of the cells specific growth rate was successfully done. It was also possible to estimate cell concentration directly bt use of oxygen-cell yield($Y_{x/o}$ ) which was obtained based on a correlation between cell growth and total oxygen consumed.
Controlling the light energy and major nutrients is important for high cell density culture of cyanobacterial cells. The growth phase of Anabaena variabilis can be divided into an exponential growth phase and a deceleration phase. In this study, the cell growth in the deceleration phase showed a linear growth pattern. Both the period of the exponential growth phase and the average cell growth rate in the deceleration phase increased by controlling the light intensity. To control the light intensity, the specific irradiation rate was maintained above $10\;{\mu}mol/s/g$ dry cell by increasing the incident light intensity stepwise. The final cell density increased by controlling the nutrient supply. For the control of the nutrient supply, nitrate, phosphate, and sulfate were intermittently added based on the growth yield, along with the combined control of light intensity and nutrient concentration. Under these control conditions, both final cell concentration and cell productivity increased, to 8.2 g/l and 1.9 g/l/day, respectively.
The over-expression of Bcl-2 has greatly improved the culture period, specific growth rate, and maximum viable cell density of NS0 cells culture under low serum condition. Further analysis of these data suggests that a saturation model of the Monod type can be used to represent the relationships of specific growth rate and initial serum concentration. The ${\mu}_{max}$ and $K_s$ for the Bcl-2 cell line is $0.927day^{-1}\;and\;0.947\%(v/v)$ respectively, which are $21\%$ greate and $7\%$ lower respectively than its control counterpart. Study on the amino acid supplementation revealed that Bcl-2 cell lines possess greater improvement in the specific growth rate and maximum viable cell density compared to the control cell lines. A further increase in the amino acid supplementation has resulted a $17\%$ decrease in specific growth rate and no improvement in maximum viable cell density in the control culture. However, the Bcl-2 cell line exhibited a better growth characteristic in this culture condition compared to that of control cell lines. The higher specific growth rate and maximum viable cell density of the Bcl-2 cell line in medium fortified with serum and MEM EM suggested a more efficient nutrient metabolism compared to that in the control cell line. The low serum and amino acid utilisation rate and the higher cell yield may prove to be important in the development of serum/protein free culture.
The effect of initial cell concentration on the characteristics of ethanol fermentation was investigated in the batch fermentation of Saccharomyces cerevisiae ATCC 24858. The characteristics were investigated in the range of 60 to 230 g/l of the initial sugar concentrations and 0.5 to 85 g/l of the initial cell concentrations. When the initial cell concentrations were 27 g/l for 60 g/l of the initial sugar and 85 g/l for 230 g/l, the fermentation time required for the complete consumption of the initial sugar was one hour, respectively. The ethanol productivity increased with the initial cell concentration so that, in the case of 100 g/l of initial sugar, the productivity rose up to 55 g/l/hr at 55 g/l of the initial cell concentration. The specific growth rate decreased according to the increase in the initial biomass concentration and finally became zero at around 25 g/l of the cell concentration regardless of the initial sugar concentration. The specific ethanol production rate was constant as 1.02 g/l/hr up to 150 g/l of the initial sugar. However, the rates decreased sharply with the augmentation of concentration of the initial sugar above 160 g/l. The overall ethanol yield represented a constant value, 0.475 g/g irrespective of the initial cell and sugar concentrations. The overall biomass yietd showed a trend to diminish in values with the biomass and ultimately to reach zero more than 25 g/l of the initial cell concentration.
Experimental data for the on-line estimation of cell concentration and growth rate are presented. For this purpose, we utilized the on-line calculation of the oxygen uptake rate (OUR), which was derived from a liquid phase dynamic mass balance for the oxygen during the active growth phase in cyclosporin A (CyA) fermentation. The cell yield coefficient, based on the oxygen $(Y_{x/o})$for both suspended and immobilized cells of Tolypocladium inflatum, was estimated as $1.9 gDCW/gO_2$ from a very good linear correlation between the cell mass produced and the total oxygen consumed. The calculated yield showed a good agreement with the value of $(Y_{x/o})$ generated from the correlation between the cell growth rate and the oxygen uptake rate. In addition, further experimental data are given, which were also applied to determine the specific oxygen uptake rate of T. inflatum cells during the exponential phase of CyA fermentation. A theoretical basis for the analysis of these fermentation parameters is also provided.
In a batch fermentation process using carrot cell suspension culture, the effect of initial concentration of limiting nutrients(glucose and phosphate) on the specific growth rate and cell yield was investigated. The period of exponential growth is about 2 days and the consumption of glucose and phosphate in culture medium was very small when the initial concentrations of glucose and phosphate are 1.49g/1 ~ 3.01g/l and 0.08 ~ 0.32mM respectively. The specific growth rate of cells ranged from TEX>$0.15\;day^{-1}$ to $0.3\;day^{-1}$ irregularly. And the ratio of the initial concentration of glucose to phosphate did not affect the specific growth rate and the cell yield. The increase on cells had linear relationship with the consumption of limiting nutrients. Therefore, the increase of cells was found to be more influenced by the concentration of glucose than that of phosphate.
The investigations of specific growth rate, specific alcohol production rate, cell yield, alcohol yield of K. marxianus LG were performed according to the sugar concentrations, 50, 80, 110, 190, and 250g/l of extracted solution of Jerusalem Artichoke. The functipnal relationship between specific growth rate, specific alcohol production rate, and alcohol concentrations were devoted study to. In case of low concentration of alcohol, the fuctions were linear relationships. But in the region of high concentration of alcohol, they expressed the exponential relationships. The growth rate of K. marxianus was prohibited at higher than 50g/l of alcohol concentrations regardless of concentration of residual sugar. Cell and alcohol yield showed the maximum values around 25g/l of alcohol concentraton without being related to initial sugar concentrations.
Fermentation condition of Streptococcus lactis IFO 12007 for nisin production was examined. The optimal glucose concentration was 60g/ι. The pH and temperature optimum were 6.5 and 31$^{\circ}C$, respectively. The maximum nisin activity in batch culture was 2000IU/$m\ell$. The fermentation quotients after 7 hours of fermentation in batch culture were; specific glucose uptake rate:0.59g/g/h , specific nisin productivity: 34924IU/g/h, product yield: 5944IU/g, growth yield:0.24, biomass:4.81g/ι. The specific growth rate was affected by pH and temperature and the activation energy for growth was 1.35kcal/mole. pH control was essential for nisin production. Fed-batch culture using 20g/$\ell$ glucose medium produced 1420IU/$m\ell$ after 14 hours. The continuous culture could be operated at below 0.38h$^{-1}$ for nisin production. The steady state nisin concentration and specific nisin productivity were 740IU/$m\ell$ and 45000IU/g/h. The growth yield and maintenance energy were 0.144 and 207mg glucose/g-cell/h.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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