The purpose of this work was to examine the antimicrobial activity derived from the lactic acid bacterium, UK-3 isolated from the vaginas of women of childbearing age. Various physiological and biochemical properties of this strain were characterized. Both the BIOLOG system and phylogenetic analysis using 16S rRNA sequencing were utilized for identification, and the strain was designated as Lactobacillus plantarum UK-3, and registered in GenBank as [JK266589]. Growth rate, production of organic acids (e.g., lactic acid and acetic acid), and pH during growth were monitored. The maximum concentrations of lactic acid and acetic acid were approximately 684.11 mM and 174.26 mM, respectively, and pH changed from 7.0 to 3.7 after 72 h of incubation. High performance liquid chromatography was used to confirm lactic acid and acetic acid production. Significant antimicrobial activity of the concentrated supernatant was demonstrated against various Gram-positive (e.g., Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Neisseria species., Listeria monocytogenes), Gram-negative bacteria (e.g., Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis), and yeast (e.g., Candida albicans) by the plate diffusion method. As a result, the concentrated L. plantarum UK-3 cultures had lower acidity and inhibited the growth of all microorganisms tested, whereas the growth of L. acidophilus was not affected.
Aquaporin is a water channel protein, which is classified as Major Intrinsic Protein (MIP), found in almost all organisms from bacteria to human. To date, more than 200 members of this family were identified. There are two major categories of MIP channels, orthodox aquaporins and aquaglyceroporins, which facilitate the diffusion across biological membranes of water or glycerol and other uncharged compounds, respectively. The full genome sequencing of various fungal species revealed 3 to 5 aquaporins in their genome. Although some functions of aquaporins found in yeast were characterized, however, no functional characteristics were studied so far in filamentous fungi, including Aspergillus sp. In this study, one orthodox aquaporin homolog gene, aqpA, and four aquaglyceroporin homologs, aqpB-E, in a model filamentous fungus Aspergillus nidulans were identified and the function of the aqpA gene was characterized. Knock-out of the aqpA gene didn't show any obvious phenotypic change under the osmotic stress, indicating that the function of the gene does not involved in the osmotic stress response or the function could be redundant. However, the mutant showed antifungal susceptibility resistance phenotype, suggesting that the function of the aqpA gene could be involved in sensing the antifungal substances rather than the osmotic stress response.
Journal of Korean Society of Occupational and Environmental Hygiene
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v.22
no.3
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pp.175-183
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2012
Objectives: This study developed a harmonized method for risk assessment based on the Hazard & Risk Evaluation of Chemicals (HREC) according to the Industrial Safety and Health Act (ISHA). Methods: Three preliminary studies, performed during 2010 and 2011 by the Occupational Safety and Health Research Institute and three academic research groups, were compared. The differences in risk assessment, especially in the dose-response assessment method, were analyzed. A new harmonized method for dose-response assessment was suggested and its applicability for the HREC was examined. Results: Considering the various steps of each dose-response assessment, the equivalent steps in quantitative correction, uncertainty factor 2 (UF2) for intra-species uncertainty, and UF3 for the experimental period in the uncertainty correction were relatively high. Using our new method, the total correction values (quantitative correction plus uncertainty correction) ranged from 72~15,789 to 30~60, and the ratio of the threshold limit value (TLV) to the reference concentration decreased from 12.8~1900 to 5.4~11.8. Furthermore, when we performed risk characterization by our new method, hazard quotient (HQ) values for chloroethylene, epichlorohydrin, and barium sulfate became 3.0, 14.1, and 1.13 respectively, whereas three previous studies reported HQ values of 7.1, 4580, and 87.3 considering reasonable maximum exposure (RME) conditions. HQs of the three chemicals were calculated to be 0.6, 2.4, and 0.1 respectively, when compared to their TLVs. Conclusions: Our new method could be applicable for the HREC because the total correction values and the ratio of TLVs were within reasonable ranges. It is also recommended that additional risk management measures be applied for epichlorohydrin, for which the HQ values were greater than 1 when compared with both reference values and the TLV. Our proposed method could be used to harmonize dose-response assessment methods for the implementation of risk assessment based on the HREC according to ISHA.
Bacillus thuringiensis is a well-known species of entomophathogenic bacteria that is widely used as a biopesticide against many insect pests. It produces parasporal crystals ($\delta$-endotoxin) and endospores during sporulation. In this report, the $\delta$-endotoxin produced by Bacillus thuringiensis BT-1 and BT-2 were characterized by Scanning Electron Microscope(SEM), Transmission Electron Microscope(TEM), SDS-PACE, and solubilization activity by alkaline solution. BT-1, BT-2 were cultured in the GBY medium, and the $\delta$-endotoxin of them was purified with discontinuous sucrose density gradient centrifugation. Their $\delta$-endotoxin was observed by SEM and TEM. Morphologically, the $\delta$-endotoxin of BT-1 was a square and flat type, whose size was $1.73{\mu}m{\times}0.7{\mu}m$, and the $\delta$-endotoxin of the BT-2 was spherical form whose size was $1.1{\mu}m{\times}0.9{\mu}m$ determined by SEM and TEM. The $\delta$-endotoxin of the BT-1 was composed of 28 kDa and 21 kDa, however, it of the BT-2 was composed of 50 kDa, 35 kDa, and 22 kDa bands determined by SDS-PACE. The purified crystals of BT-1 and BT-2 were dissolved gradually in alkaline solution as time goes by, and it was perfectly dissolved after 3 hours. It is supposed that the $\delta$-endotoxin of crystal was converted to a state of activation in the course of time in the intestines of insect.
Hwang, Soong-Taek;Kim, Suk Kyu;Na, Jong Gil;Lee, Jeom Sook;Choi, Dongsu
Journal of Life Science
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v.23
no.2
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pp.182-189
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2013
Halophytes are unique land plants that are capable of thriving in a high-salt environment. They are attracting public attention due to their ability to synthesize bioactive substances such as UV protectants or antioxidizing agents. To achieve unaffected growth under high salinity, halophytes may take advantage of the activities of cell growth factors such as expansins. Expansins are well-known cell wall proteins that are responsible for cell enlargement. They loosen cell walls, thereby contributing to actual plant growth. This study aimed to identify positive roles of expansins in the growth of halophytes. Three expansin cDNA clones were isolated from seedlings of Suaeda japonica. Comparing the deduced amino acid sequences of the expansin genes of S. japonica with those of other plant species suggested that the cDNA clones isolated from S. japonica belong to the EXPA (${\alpha}$-expansin) gene family. A phylogenetic tree based on the deduced amino acid sequences revealed that the expansins of S. japonica share a close evolutionary relationship with those of strawberry (Fragaria ananassa) and jujube (Ziziphus jujuba), both of which are woody dicots. SjEXPAs did not show any remarkable change in the gene expression level in different NaCl concentrations, providing a clue to the unaffected seedling growth of S. japonica in a high-salt environment. In conclusion, the present study presents the first report of expansin genes from halophytes and suggests a putative role for these genes in plant growth under high salinity.
We have established three immortal bovine muscular epithelial (BME) cell lines, one spontaneously immortalized (BMES), the second SV40LT-mediated (BMEV) and the third hTERT-mediated (BMET). The morphology of the three immortal cell lines was similar to that of early passage primary BME cells. Each of the immortal cell lines made cytokeratin, a typical epithelial marker. BMET grew faster than the other immortal lines and the BME cells, in 10% FBS-DMEM medium, whereas neither the primary cells nor the three immortal cell lines grew in 0.5% FBS-DMEM. The primary BME cells and the immortal cell lines, with the exception of BMES, made increasing amounts of p53 protein when treated with doxorubicin, a DNA damaging agent. On the other hand, almost half of the cells in populations of the three immortal cell lines may lack $p16^{INK4a}$ regulatory function, compared to primary BME cells that were growth arrested by enforced expression of $p16^{INK4a}$. In soft-agar assays, the primary cells and immortal cell lines proved to be less transformed in phenotype than HeLa cells. The three immortal epithelial-type cell lines reported here are the first cell lines established from muscle tissue of bovine or other species.
Koo, Sung Cheol;Choi, Man Soo;Chun, Hyun Jin;Park, Hyeong Cheol;Kang, Chang Ho;Shim, Sang In;Chung, Jong Il;Cheong, Yong Hwa;Lee, Sang Yeol;Yun, Dae-Jin;Chung, Woo Sik;Cho, Moo Je;Kim, Min Chul
Molecules and Cells
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v.27
no.4
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pp.467-473
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2009
Our previous study suggested that OsBWMK1, a gene which encodes a member of the rice MAP kinase family, generates transcript variants which show distinct expression patterns in response to environmental stresses. The transcript variants are generated by alternative splicing and by use of alternative promoters. To test whether the two alternative promoters, pOsBWMK1L (promoter for the OsBWMK1L splice variant) and pOsBWMK1S (promoter for the OsBWMK1S splice variant), are biologically functional, we analyzed transgenic plants expressing GUS fusion constructs for each promoter. Both pOsBWMK1L and pOsBWMK1S are biologically active, although the activity of pOsBWMK1S is lower than that of pOsBWMK1L. Histochemical analysis revealed that pOsBWMK1L is constitutively active in most tissues at various developmental stages in rice and Arabidopsis, whereas pOsBWMK1S activity is spatially and temporally restricted. Furthermore, the expression of pOsBWMK1S::GUS was upregulated in response to hydrogen peroxide, a plant defense signaling molecule, in both plant species. These results suggest that the differential expression of OsBWMK1 splice variants is the result of alternative promoter usage and, moreover, that the mechanisms controlling OsBWMK1 gene expression are conserved in both monocot and dicot plants.
Al-containing titanium silicalite-1 ([Al]-TS-1) catalyst was prepared hydrothermally, and the effects of synthesis parameters such as silica/alumina sources, $SiO_2/TiO_2$ ratio, and aging treatment were investigated. The structure, crystal size, and shape were examined by XRD and SEM, and the extent of titanium incorporation into the zeolite framework was examined using UV-vis DRS spectroscopy. For [Al]-TS-1 catalyst preparation, aging of ca. 24h was essential, and the faster crystallization rates were achieved with Cab-O-Sil than with Ludox or TEOS as a silica source. In addition, the higher crystallinity and faster crystallization rate were obtained using sodium aluminate as an aluminum source. 2-butanol oxidation using $H_2O_2$ as an oxidant was carried out to confirm the redox property of the [Al]-TS-1. Acid sites catalyzed toluene alkylation study indicated that lattice titanium species in [Al]-TS-1 weakened the acid strength, and the para-ethyltoluene selectivity was enhanced as a results.
Rapid and reliable identification of microorganisms is important to maintain food quality and to control safety. MALDI-TOF MS-based identification methods are relatively fast and simple compared to other conventional methods including gram staining and biochemical characterization. A colony on subcultured media can be directly prepared on the analysis plate without further complex treatments. In this study, we confirmed the applicability of MALDI-TOF MS-based identification of foodborne pathogens such as Salmonella Enteritidis/Typhimurium, Staphylococcus aureus, Vibrio parahaemolyticus, Clostridium perfringens, Listeria monocytogenes, Yersinia enterocolitica, Bacillus cereus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, and Cronobacter sakazakii on the Korea Food Standard Codex. MALDI-TOF MS data of the pathogenic reference strains were incorporated into a commercial MicroID (ASTA Inc.) database. Other pathogenic reference strains and seven isolates from various food samples were correctly identified to the species level by using the MicroID database. In conclusion, MALDI-TOF MS is comparable with commercial biochemical identification.
Lee, Eon Sil;Kim, Yong Sang;Ryu, Myeong Seon;Jeong, Do Yeon;Uhm, Tai Boong;Cho, Sung Ho
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.29
no.1
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pp.40-46
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2014
We have screened Bacillus strains suitable for the fermentation of soybean products with respect to the control of Bacillus cereus and the reduction of biogenic amines. Of 26 isolates, a strain named as the SCK A08 carried antimicrobial activity against B. cereus and Staphylococcus aureus, major food poisoning species in soybean products. PCR analysis revealed that the SCK A08 strain did not contain genes for Bacillus cereus toxins including nonhemolytic enterotoxin, hemolytic enterotoxin, cytotoxin K, cereulide and certrax. The SCK A08 strain could degrade histamine, tyramine, putrescine, and cadaverine by 67.41%, 76.59%, 57.32%, and 50.69%, respectively, during fermentation in cooked soybeans containing 0.5% (w/w) of each biogenic amine. The morphological and biochemical properties and phylogenetic relationships based on 16S rRNA gene sequences indicated that the isolate was most closely related to Bacillus licheniformis. Use of the strain SCK A08 would be a potential measure to overcome two hygienic problems that were frequently faced during manufacture of traditionally fermented soybean products.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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