The mobilization of proteins in the cotyledons of germinating soybean seeds (Glycine mar [L.] Merr.) and seedlings was studied by using light microscopy and transmission electron microscopy. The cotyledon tissues of soybean. were packed with protein bodies(diameter $0.1-15{\mu}m$) where storage protein of soybean is deposited. Degradation of protein bodies started in the epidermis and vascular tissues. After swelling of the protein bodies, autolysis of storage proteins began while the external membrane remained unbroken. Hydrolysis of proteins could be internal or peripheral and fusion might begin before complete protein degradation. Possible instances of vacuolar fusion were encountered in some cells. In all cases, the result of degradation was the same; the central vacuole of the cell. At the late stages of seedling growth, breakdown of tonoplast was observed in some cells.
The quinone reductase (QR) inducing activities of mung bean and soybean solvent extracts were compared using murine hepatoma cells (Hepa 1c1c7). The mung bean extracts (ethylacetate and ethanol) showed higher chemoprevention index values (7.88-8.22) than those of soybean extracts (2.9-5.2) from four different cultivars. The mung bean extracts also had significantly higher inhibitory effects (47-62% at 100 ${\mu}g$/mL) than the soybean extracts (15-42% at 100 ${\mu}g$/mL) against the production of nitric oxide and prostaglandin E2 in lipopolysccharide stimulated macrophage RAW264.7 cells without cytotoxicity. Among seven recovered fractions of mung bean ethanol extract obtained by C 18 silica flash column chromatography, the most non-polar fraction exhibited the highest chemoprevention index of 10.4.
L-asparaginase (EC 3.5.1.1) catalyzes the hydrolysis of the amide group of L-asparagine, releasing aspartate and $NH_4{^+}$. We isolated a low temperature-inducible cDNA sequence encoding L-asparaginase from soybean leaves. The full-length L-asparaginase cDNA, designated GmASP1, contains an open reading frame of 1,258 bp coding for a protein of 326 amino acids. Genomic DNA blotting and fluorescence in situ hybridization showed that the soybean genome has two copies of GmASP1. GmASP1 mRNA was induced by low temperature, ABA and NaCl, but not by heat shock or drought stress. E. coli cells expressing recombinant GmASP1 had 3-fold increased L-asparaginase activity. A possible function of L-asparaginase in the early response to low temperature stress is discussed.
Lee, Jong Rok;Kim, Young Woo;Byun, Sung Hui;Kim, Sang Chan;Park, Sook Jahr
The Korea Journal of Herbology
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v.30
no.5
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pp.59-65
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2015
Objectives : Fermentation of herbs has been known to be helpful in improving the immune systems and protecting body against disease. The present study was conducted to evaluate anti-inflammatory effects of the fermentation extracts (FE) consisting of soybean, red ginseng andCitrus UnshiuPeel in lipopolysaccharide (LPS)-activated Raw264.7 cells.Methods : FE were prepared by the fermentation withBacillus Subtilisand then by extraction with ethanol (95%; prepared by the fermentation process). Cell viability was measured by MTT assay. Nitric oxide (NO) production was measured in culture media by Griess assay. The expression of nuclear factor (NF)-κB and inhibitory kappa B alpha (IκBα) was determined by Western blot.Results : LPS-induced production of NO and PGE2was dose-dependently decreased by the treatment of FE in Raw264.7 cells. These suppressive effects of FE on NO and PGE2production were related to the inhibition of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) expression. FE inhibited LPS-induced production of pro-inflammatory cytokines, TNF-α, IL-6, and IL-1βin a dose-dependent manner. Furthermore, FE inhibited the NF-κB signaling pathway through the prevention of LPS-induced degradation of IκBαin cytosol and the nuclear translocation of NF-κB.Conclusions : These findings suggest that FE could have anti-inflammatory effects on LPS-induced inflammatory responses in macrophages.
We previously reported that 1-palmitoyl-2-linoleoyl-3-acetyl-rac-glycerol (PLAG) accelerates hematopoiesis and has an improving effect on animal disease models such as sepsis and asthma. The effects of PLAG supplementation on immune modulation were assessed in healthy men and women. The objective was to evaluate the effects of PLAG supplementation on immune regulatory functions such as activities of immune cells and cytokine production. A randomized double blind placebo-controlled trial was conducted. Seventy-five participants were assigned to one of two groups; all participants had an appropriate number of white blood cells on the testing day. The PLAG group (n=27) received oral PLAG supplements and the control group (n=22) received oral soybean oil supplements. IL-4 and IL-6 production by peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were lower (p<0.001 and p<0.001, respectively) with PLAG than with soybean oil. However, the production of IL-2 and IFN-$\gamma$ by PBMC was unaltered with PLAG supplementation. The B cell proliferation decreased significantly in the PLAG group compared to the soybean oil control (p<0.05). The intake of PLAG in healthy adults for 4 weeks was deemed safe. These data suggest that PLAG has an immunomodulatory function that inhibits the excessive immune activity of immunological disorders such as atopic and autoimmune diseases. PLAG could improve the condition of these diseases safely as a health food supplement.
The chloroform-soluble fraction of the vinegar treated small black soybean [Glycine max (Leguminosae)] showed antiproliferative activity against human myeloid leukemia HL-60 cells, in terms of inhibition of proliferation and induction of apoptosis. Bioassay-guided chromatography of the chloroform-soluble fraction resulted in the isolation of two isoflavonoid compounds, genistein and daidzein, as active principles. Genistein showed more potent antiproliferative effects against HL-60 cells. Treatment of HL-60 cells with genistein induced apoptosis in a dose dependent manner. Apoptosis was judged by the detection of DNA fragmentation by a flow cytometry and the degree of apoptosis was assayed by RT-PCR.
Early nematode development and subcellular responses in resistant soybean lines PI 88788 and PI 437654 infected with races 3 (R3) and 14 (R14) of soybean cyst nematode (SCN), Heterodera glycines Ichinohe, were compared. SCN R14 nematodes penetrated and developed significantly more than R3 at 5-6 days after inoculation. Both races also penetrated and developed more in PI 88788 than in PI 437654. Syncytia, characterized by cell wall dissolution and cellular hypertrophy, were developed more in PI 88788 than in PI 437654 and more by R14 than R3, for which less necrotic responses occurred in the former than the latter. This suggests that the latter two may be more resistant and less virulent than the former two, respectively. A common structural feature found in each of PI 437654 and PI 88788 in relation to SCN-resistance was the formation of prominent cell wall appositions and nuclear degeneration prior to cytoplasmic degradation in syncytial cells, respectively. Necrosis and cell wall apposition are types of hypersensitive responses occurring at early stages of the nematode infection so that these structural modifications indicate the inhibition of initial syncytial development related to the early nematode development. As soybean cultivars and lines with identical or similar genotypes have the same types of structural features related to SCN-resistance, the structural modifications induced by SCN infection may result from the expression of inheritable resistance genes, of which the information can be used for breeding soybean cultivars and lines specifically resistant to SCN races.
In order to investigate changes in quality and enzyme activity during Chungkookjang fermentation, germinated- and nongerminated yellow soybeans were fermented by Bacillus subtilis and traditional methods. When the soybean was soaked for 6 h and then watered for 4 days with 2 h-interval at $25^{\circ}C$, the highest germination rate was obtained. The germinated soybeans had a higher total isoflavone ($988.4{\mu}g/g$) than that of the nongerminated soybeans ($859.5{\mu}g/g$). Amino type nitrogen contents, protease and amylase activities were higher in germinated soybean Chungkookjang, which was fermented with B. subtilis, than nongerminated soybean Chungkookjang, which was fermented with B. subtilis and traditional methods. Reducing sugar and amino type nitrogen contents, the number of viable cells and protease and amylase activities, were higher for Chungkookjang fermented with B. subtilis, than Chungkookjang fermented by traditional methods. ALP and SOD activities in the Chungkookjang diet group were considerably higher than in the control group. AST activity in the germinated soybean Chungkookjang diet group was higher than in the nongerminated soybean Chungkookjang diet group. In conclusion, it is suggested that Chungkookjang prepared with germinated soybeans using B. subtilis D7 could be practically used as a functional product.
Soybean protein consists of two major components $\beta$-conglycinin and glycinin which together consti-tute 70% of the total seed storage protein at maturity. $\beta$-Conglycinin is trimeric glycoprotein and for-med by the assembly of various combinations of three subunits $\alpha$,$\alpha$' and $\beta$ which have molecular weig-hts of 69,000, 72,000 and 42,000, respectively. Recently $\beta$-conglycinin was identified as powerful LDL lip-oprotein receptor activation hypercholesterolemia and major allergenic proteins. To investigate these reasons we constructed an expression system of cDNA encoding $\alpha$-subunit of $\beta$-conglycinin in Escherichia coli and purified the expressed protein. The pro-$\beta$-conglycinin synthesized in Escherichia coli BL 21 (DE3)comprised approximately 15% of the total bacterial proteins and the expressed protein are formed sol-uble and trimer such as native protein in Escherichia coli cells. The highly expressed protein was purified to homogeneity by salt precipitation with 20~40 % ammonium sulfate ion-exchange chromatography with Q-sepharose and hydrophobic column chromatography with Butyltoyopearl.
This study was conducted to investigate enzymatic maceration of radish, cabbage, soybean sprout and carrot with cell separating enzymes in order to obtain individual cells. We studied the macerating properties of Macerozyme R-200, Macerozyme R-10 and Sumyzyme MC on vegetables. Degree of enzymatic maceration was decreasing order of radish, carrot, cabbage and soybean sprout. The degree of enzymatic maceration among macerating enzymes was decreasing order of Macerozyme R-200, Macerozyme R-10 and Sumyzyme MC. The degrees of enzymatic maceration of radish, carrot, soybean sprout and cabbage treated with Macerozyme R-200 for 2hr were 91.0, 80.6, 62.5 and 35.1%, respectively. Total pectin, color and viscosity of carrot macerates increased as the maceration rate increased.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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