The fungal isolate Isaria javanica pf185 has potential as a mycopesticide because it demonstrates insecticidal activity against the green peach aphid and antifungal activity against Colletotrichum gloeosporioides. For commercialization of this isolate, determination of the optimal and least expensive culture conditions is required; however, these data are not currently available. This study describes the conditions for optimal development of conidia and production of metabolites for the biocontrol of the fungal pathogen. The optimal culture conditions were examined using cultures on solid agar and liquid media. High growth temperature enhanced spore formation but reduced antifungal activity in both solid and liquid media. The highest spore yield was obtained in a medium containing glucose as a carbon source and yeast extract as a nitrogen source. Soybean powder and wheat bran were effective nitrogen sources that promoted spore production and antifungal activity of the isolate. These results revealed the basic, cost-effective growth media for commercial production of a biopesticide with insecticidal and antifungal properties for use in integrated pest management.
To produce economically important indole alkaloids by cell cultures, we selected protoplastsderived clones (protoclones) of vinca (Catharanthus roseus) for high yields of catharanthine and ajmalicine. Protoplasts were enzymatically isolated from suspension-cultured cells. The highest plating efficiency (1%) was obtained when protoplasts were plated at a density of 1$\times$105 protoplasts/ml in a culture medium solidified with 0.4% Seaplaque agarose. The growth rates of 40 protoclones subcultured on a solid medium varied over a wide range. Protoclone VPC-6, which had the highest growth rate, was observed to produce relatively high yields of catharanthine and ajmalicine when cultured in a liquid medium. Although the original cell line did not produce catharanthine at a detectable level by HPLC, protoclone VPC-10 produced it at a level of 5.9$\mu\textrm{g}$/g fresh weight of cells for 10 days of culture. Under the same conditions, protoclone VPC-15 produced ajmalicine at a level of 133.6$\mu\textrm{g}$/g, of which productivity was improved about ,3 times than that of the original cell line. The results indicate that differences in the growth rate and indole alkaloid yield among the protoclones reflect the somaclonal variation in suspnsion-cultured cells.
Allium hookeri L. (Alliaceae family) is an important ethnomedicinal plant native to the Himalayan region of Asia. The aim of this research was to establish a high-frequency plant regeneration system for in vitro propagation of A. hookeri. Among the tissue types examined, receptacle explants derived from immature flower buds showed the highest regeneration rate of shoots ($93.33{\pm}4.63%$), roots ($76.67{\pm}7.85%$), and calli ($80.00{\pm}7.43%$) when cultured on Gamborg B5 (B5) medium containing $10{\mu}M$ 6-benzylaminopurine (BA) + $1{\mu}M$ naphthalene acetic acid (NAA), $0.5{\mu}M$ BA + $5{\mu}M$ NAA, and $1{\mu}M$ BA + $10{\mu}M$ NAA, respectively. Shoot multiplication was superior when cultured in liquid rather than on solid medium and relatively high concentrations of BA, ranging from 5 to $10{\mu}M$. Efficient bulblet formation following root induction from shoot clumps was achieved with culture in liquid B5 medium containing 7% (w/v) sucrose. Regenerated bulblets were successfully acclimatized to ex vitro conditions with a greater than 95% survival rate. By this method, a maximum of 62 plantlets per receptacle could be propagated within 9 weeks of initial culture. The in vitro propagation system established in this study will promote A. hookeri biotechnology, including large-scale production of healthy and aseptic clones, preserving parental genotypes with desirable traits, and genetic manipulation to enhance medicinal value.
Lee, Wi Young;Ahn, Jin Kwon;Ka, Kang Hyeon;Park, Hyun
Journal of Korean Society of Forest Science
/
v.95
no.3
/
pp.358-364
/
2006
This study was conducted to develop optimal solid culture medium for Tricholoma matsutake. As the solid matrix, granitic soil, perlite, vermiculate, pine sawdust and peat moss were compared regarding their effected on mycelial growth. Ergosterol content which is a fungal wall component was used as the growth index of the mycelia. Among the various solid matrixes, the granitic soil, perlite and mixture of the two supported the growth most. Barely flour appeared to be very effective on the stimulating of the mycelial growth when added to the solid matrix. An mixture of the matrix contained an even (1:1:1:1, v/v/v/v) mixture of granitic soil, perlite, vermiculate and pine sawdust. T. matsutake started growth 2 weeks after inoculation and reached stationary growth phase after 8th weeks in the solid matrix mixture. The mycelial density in the solid matrix was 7 times higher than that in fairy-ring soil. In addition, 30~70% water content and 10% humus soil in the solid matrix also supported good growth suggesting that T. matsutake needs humus soil for a nutrient sources. The solid matrix developed in the present study could be used to study physiological characteristics of T. matsutake as well.
The factors affecting the isolation and culture of the protoplast of embryogenic callus, derived from immature ovule in Citrus junos, were examined. An incubation time in enzyme solution of 16 hrs was preferable for protoplast isolation. Efficient protoplast yields were obtained from the treatment of equal concentration of 0.7 M $\textrm{BH}_{3}$ to the enzyme solution containing 1.0% cellulase, 1.0% macerozyme and 0.2% pectolyase. Protoplast cultured in MT medium with 0.1 mg/L 2,4-D showed vigorous division and some of them formed callus. Induced callus was subcultured on solid MT medium but the callus showed very slow growth. The above results show the possibility to culture from protoplast fusion in Citrus genera.
Cyclosporin A (CyA) produced by Tolypocladium inflatum is a promising drug owing to its immunosuppressive and antifungal activities. From an industrial point of view, the necessity to obtain a suitable and economic medium for higher production of CyA was the aim of this work. The present study evaluated the effect of different fermentation parameters in solid state fermentation, such as selection of solid substrate, hydrolysis of substrates, initial moisture content, supplementation of salts, additional carbon, and nitrogen sources, as well as the inoculum age and size, on production of CyA by Tolypocladium inflatum MTCC 557. The fermentation was carried out at $25{\pm}2^{\circ}C$ for 9 days. A combination of hydrolyzed wheat bran flour and coconut oil cake (1:1) at 70% initial moisture content supported a maximum production of $3,872{\pm}156\;mg$ CyA/kg substrate as compared with $792{\pm}33\;mg/kg$ substrate before optimization. Furthermore, supplementation of salts, glycerol (1% w/w), and ammonium sulfate (1% w/w) increased the production of CyA to $5,454{\pm}75\;mg/kg$ substrate. Inoculation of 5 g of solid substrate with 6 ml of 72-h-old seed culture resulted in a maximum production of $6,480{\pm}95\;mg$ CyA/kg substrate.
Lactobacillus pentosus K1-23 was selected from among 25 lactic acid bacterial strains owing to its high inhibitory activity against several pathogenic bacteria, including Escherichia coli, Salmonella typhimurium, S. gallinarum, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Clostridium perfringens, and Listeria monocytogenes. Additionally, among 13 strains of Aureobasidium spp., A. pullulans NRRL 58012 was shown to produce the highest amount of ${\beta}$-glucan ($15.45{\pm}0.07%$) and was selected. Next, the optimal conditions for a solid-phase mixed culture with these two different microorganisms (one bacterium and one yeast) were determined. The optimal inoculum sizes for L. pentosus and A. pullulans were 1% and 5%, respectively. The appropriate inoculation time for L. pentosus K1-23 was 3 days after the inoculation of A. pullulans to initiate fermentation. The addition of 0.5% corn steep powder and 0.1% $FeSO_4$ to the basal medium resulted in the increased production of lactic acid bacterial cells and ${\beta}$-glucan. The following optimal conditions for solid-phase mixed culture were also statistically determined by using the response surface method: $37.84^{\circ}C$, pH 5.25, moisture content of 60.82%, and culture time of 6.08 days for L. pentosus; and $24.11^{\circ}C$, pH 5.65, moisture content of 60.08%, and culture time of 5.71 days for A. pullulans. Using the predicted optimal conditions, the experimental production values of L. pentosus cells and ${\beta}$-glucan were $3.15{\pm}0.10{\times}10^8CFU/g$ and $13.41{\pm}0.04%$, respectively. This mixed culture may function as a highly efficient antibiotic substitute based on the combined action of its anti-pathogenic bacterial and immune-enhancing activities.
FK506 hyper-yielding mutant, called the TCM8594 strain, was made from Streptomyces tsukubaensis NRRL 18488 by mutagenesis using N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, ultraviolet irradiation, and FK506 sequential resistance selection. FK506 production by the TCM8594 strain improved 45.1-fold ($505.4{\mu}g/mL$) compared to that of S. tsukubaensis NRRL 18488 ($11.2{\mu}g/mL$). Among the five substrates, wheat bran was selected as the best solid substrate to produce optimum quantities of FK506 ($382.7{\mu}g/g$ substrate) under solid-state fermentation, and the process parameters affecting FK506 production were optimized. Maximum FK506 yield ($897.4{\mu}g/g$ substrate) was achieved by optimizing process parameters, such as wheat bran with 5 % (w/w) dextrin and yeast extract as additional nutrients, 70 % (v/w) initial solid substrate moisture content, initial medium pH of 7.2, $30^{\circ}C$ incubation temperature, inoculum level that was 10 % (v/w) of the cell mass equivalent, and a 10 day incubation. The results showed an overall 234 % increase in FK506 production after optimizing the process parameters.
Zygotic embryos just after harvest of seeds were immature globular to heart stage. Maturation of zygotic embryos rapidly proceed when zygotic embryos together with small excised parts of endosperm were cultured on 1/3-strength MS solid medium with 2% sucrose, and the zygotic embryos were germinated within two months. Embryogenic callus was formed from the excised segments of germinating zygotic embryos of Eleutherococcus pedunclus on Murashige and Skoog (MS) medium with $4.5{\mu}M$ 2,4-D. The embryogenic callus formation occurred at a low frequency (less than 7%) from hypocotyl segments. The embryogenic calli were maintained on the same medium as primary medium. High frequency somatic embryogenesis was obtained after the cells were transferred to medium lacking 2,4-D. Cotyledonary embryos were germinated and converted into plantlets on medium with $20{\mu}M$$GA_3$. Embryogenic callus and somatic embryos were produced spontaneously on the surfaces of roots and/or hypocotyls of plantlets. The frequency of embryogenic callus formation was 85% in roots and 34% in hypocotyls. Therefore maintain of cell lines performed very easily. Plantlets with developed epicotyls at more than 3 cm acclimatized at high frequency (89%). While plantlets with small epicotyls (less than 1 cm) were acclimatized at low rate (32%). The soil survived plantlets produced new sprouts after over wintering in the field.
To obtain transformed plants, we cocultured cotyledonary explants of Codonopsis lanceolata with Agrobacterium tumefaciens LBA4404, a disamed strain harboring a binary vector pBI121 carrying the CaMV35S promoter-$\beta$-glucuronidase (GUS) gene fusion used as a reporter gene and NOS promoter-neomycin phosphotransferase gene as a positive selection marker in MS liquid medium with 1mg/L BA. After 48 h of culture, explants were transferred onto MS solid medium with Img/L BA, 250mg/L carbenicillin, and 100mg/L kanamycin sulfate and cultured in the dark. Numerous adventitious buds formed on the cut edges of the explants after 2 weeks of culture. When subjected to GUS histochemical assay buds showed a positive response at a frequency of 15%. Explants formed adventitious shoot at a frequency of 56.7%, after 6 weeks of culture. Upon transfer onto the basal medium, most of the shoots were rooted and subsequently the regenerants were transplanted to potting soil. Southern blot analysis confirmed that the GUS gene was incorporated into the genomic DNA of the GUS-positive regenerants.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.