Purpose: Small size of recombinant scFv antibody has many advantages such as rapid blood clearances and improved targeting antibodies to tumor region. On the other hand owing to small size, number of amino group is insufficient in conjugation with chelator and fluorescence labeling. This study is to introduce poly lysine tag to the C-terminal end of scFv lym-1 sequence for fluorescence chelator conjugation. Materials and Methods: Poly lysine scFv lym-1 gene, cloned into pET-22b (+) vector, was expressed in E. coli BL21 (DE3) strain. Antibody purification was performed with Ni-NTA column and then size exclusion column chromatography. Expression and purification levels of poly lysine tagged scFv lym-1 antibody were confirmed by western blot analysis. I-124, I-125, I-131 and Tc-99m were used for radiolabeling of purified poly lysine scFv lym-1. Flow cytometry analysis of FIT( conjugated poly lysine scFv lym-1 was performed for confirmation of immunoreactivity of human Burkitt's lymphoma cells. Results: Poly lysine scFv lym-1 antibody was purified through two steps and identified as molecular weight of 48 KDa. Radiolabeling yields of I-124, I-125, I-131 and Tc-99m into poly lysine scFv lym-1 were >99%, >99%, >95% and >99%, respectively. Flow cytometry analysis of poly lysine scFv and scFv lym-1 was showed similar immunoreactivity to human Burkitt's lymphoma cells. Conclusion: Poly lysine tag was useful for the sufficient number of amino groups to scFv lym-1 antibody for chelator conjugation with minimizing loss of immunoreactivity.
Park, Moon-Sung;Kim, Jin-Suk;Kim, Hye-Kyu;Jung, Hoe-Kyung
The KIPS Transactions:PartD
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v.9D
no.5
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pp.915-924
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2002
Conventional Systems for parcel sorting consist of two sequences as loading the parcel into conveyor belt system and post-code input. Using bar code information, the parcels to be recorded and managed are recognized. This paper describes a 32 $\times$ 32 sized mini-block inspection to extract bar code Region of Interest (ROI) from the line Charged Coupled Device (CCD) camera capturing image of moving parcel at 2m/sec speed. Firstly, the Min-Max distribution of the mini-block has been applied to discard the background of parcel and region of conveying belts from the image. Secondly, the diagonal inspection has been used for the extraction of letters and bar code region. Five horizontal line scanning detects the number of edges and sizes and ROI has been acquired from the detection. The wrong detected area has been deleted by the comparison of group size from labeling processes. To correct excluded bar code region in mini-block processes and for analysis of bar code information, the extracted ROI 8 boundary points and decline distribution have been used with central axis line adjustment. The ROI extraction and central axis creation have become enable within 60~80msec, and the accuracy has been accomplished over 99.44 percentage.
Ultrasonography constructs pictures of areas inside the body needs in diagnosis by bouncing high-enorgy sound waves(ultrasound) off internal tissues or organs. In constructing an ultrasonographic image, the weakness of bounding signals induces noises and detailed differences of brightness, so that having a difficulty in detecting and diagnosing with the naked eyes in the analysis of ultrasonogram. Especially, the difficulty is extended when diagnosing muscle areas by using ultrasonographic images in the musculoskeletal test. In this paper, we propose a novel image processing method that computationally extracts a muscle area from an ultrasonographic image to assist in diagnosis. An ultrasonographic image consists of areas corresponding to various tissues and internal organs. The proposed method, based on features of intensity distribution, morphology and size of each area, extracts areas of the fascia, the subcutaneous fat and other internal organs, and then extracts a muscle area enclosed by areas of the fascia. In the extraction of areas of the fascia, a series of image processing methods such as histogram stretching, multiple operation, binarization and area connection by labeling is applied. A muscle area is extracted by using features on relative position and morphology of areas for the fascia and muscle areas. The performance evaluation using real ultrasonographic images and specialists' analysis show that the proposed method is able to extract target areas being approximate to real muscle areas.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.21
no.4
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pp.20-25
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2020
As nanoscience and nanotechnology advance, techniques for selective pattern growth have attracted significant attention. Silica nanoparticles (NPs) are used as a promising nanomaterials for bio-labeling, bio-imaging, and bio-sensing. In this study, silica NPs were synthesized by a sol-gel process using a modified Stöber method. In addition, the selective pattern growth of silica NPs was achieved by the surface functionalization of the substrate using a micro-contact printing technique of a hydrophobic treatment. The particle size of the as-synthesized silica NPs and morphology of selective pattern growth of silica NPs were characterized by FE-SEM. The contact angle by surface functionalization of the substrate was investigated using a contact angle analyzer. As a result, silica NPs were not observed on the hydrophobic surface of the OTS solution treatment, which was coated by spin coating. In contrast, the silica NPs were well coated on the hydrophilic surface after the KOH solution treatment. FE-SEM confirmed the selective pattern growth of silica NPs on a hydrophilic surface, which was functionalized using the micro-contact printing technique. If the characteristics of the selective pattern growth of silica NPs can be applied to dye-doped silica NPs, they will find applications in the bio imaging, and bio sensing fields.
Nitric oxide (NO) and calcium-binding proteins occur in various types of cells in the central nervous system. They are important signaling and calcium buffering molecules, respectively. In the present study, using immunocytochemistry we examined the distribution and the co-localization pattern of neurons containing neuronal nitric oxide synthase (nNOS) and parvalbumin in the visual cortex of hamster. The overall number of parvalbumin-immunoreactive (IR) neurons was 17 times higher than that of the nNOS-IR neurons in the hamster visual cortex. The highest differences were found in layer V, where parvalbumin-IR neurons were 54.7 times more abundant than nNOS-IR neurons. Many nNOS- and parvalbumin-IR neurons were similar in size, shape, and manner of distribution in the visual cortex. However, two-color immunofluorescence revealed that no neurons in the hamster visual cortex expressed both nNOS and parvalbumin. The present results indicate that there are subtle species differences in the co-localization pattern between nNOS and calcium-binding proteins. The present results also suggest not only the heterogeneity and functional diversity of nNOS-IRneurons in the visual cortex, but also the importance of understanding animal diversity
The morphological features of neuronal dendritic spines are changed their shapes, sizes and density in response to physiological or pathological conditions . Therefore, exact analysis of spines warrants understanding of neuronal function. The size of the spine is at the borderline of resolution with light microscopy. High voltage electron microscopy Provide excellent resolution of the spines with proper stain techniques thanks to its higher resolution and penetration power. We evaluated more effective staining method for observing dendritic spines after labeling Purkinje cells with anti-calbindin 28 kD immunohistochemistry or Golgi staining methods. 4 fm thickness sections were observed with high voltage electron microscopy and some morphometric analyses were performed. Both Golgi staining and immunohistochemistry revealed the detail structures of the Purkinje cell such as soma, dendrites, and dendritic spines. High voltage electron micrographs with Golgi staining provide more precise morphology and are easy to measure. Average density of spine is $24.5{\pm}3.6/10{\mu}m$ and its length is $1.12{\pm}0.22{\mu}m$. For quantitative analysis of the spines, high voltage electron, micrographs with Golgi staining are more effective. This preliminary result is expected to be useful for further study of spine plasticity in various conditions.
This study was designed to investigate the effects of superovulation on the growing and mature follicles following gonadotrophin treatments in mature rat by immunohistochemical methods. Eighteen mature rats (Sprague-Duwely, 190~230gm) were randomly alloted into 3 groups. One group was control group, another FSH-treated group was injected intramuscularly with 0.5 units of follicular stimulating hormone(FSH) / rat, and third PMS and HCG-treated group was injected intramuscularly with 20~25IU of pregnant mare serum(PMS) / rat and then at the 48 hrs later, with 20~25IU of human chorionic gonadotropin(HCG) / rat. Half the number of rats were administrated intraperitoneally with bromodeoxyuridine(Brdur, 0.2mg/gm BW once) at 2 hours before exanguination and the remainder of rats were sacrified without Brdur administration. The investigation by immunohistochemical methods using paraffin sections of ovaries was performed by using anti-Brdur antibody and PCNA(proliferating cell nuclear antigen) antibody for labeling proliferating cells in follicles. In immunohistochemical findings, follicles squeezed by peripheral corpus luteum or follicles large follicles with loosly and irregularly distributed granulosa cells and although with compacted granulosa cells, middle follicles with dilated round or oval follicular antrum were confirmed as atretic follicles. The proportions of atretic follicles in control group were 29.8%, 21.7% and 14.2% respectivley at large, middle and small follicles and mean proportions of these all 3 grade follicles were 26.7%. The proportions of atretic follicles in FSH-treated group were 35.4%, 24.9% and 10.4% respectively at large, middle and small follicles and mean proportions of these all 3 grade follicles were 28.1%. The proportions of atretic follicles in PMS and HCG-treated group were 44.7%, 24.0% and 12.7% respectively at large, middle and small follicles, and mean proportions of these all 3 grade follicles were 29.7%. The above findings reveal that the group with higher proportion of atretic follicles were ordered as large, middle and small follicles in size, and these proportions were increased in hormone treated two groups with more number of more growing and mature follicles when compared with control group.
Background: Panax ginseng Meyer (Asian ginseng) has a large nuclear genome size of > 3.5 Gbp in haploid genome equivalent of 24 chromosomes. Tandem repeats (TRs) occupy significant portions of the genome in many plants and are often found in specific genomic loci, making them a valuable molecular cytogenetic tool in discriminating chromosomes. In an effort to understand the P. ginseng genome structure, we characterized an ultrahigh copy 167-bp TR (Pg167TR) and explored its chromosomal distribution as well as its utility for chromosome identification. Methods: Polymerase chain reaction amplicons of Pg167TR were labeled, along with 5S and 45S rDNA amplicons, using a direct nick-translation method. Direct fluorescence in situ hybridization (FISH) was used to analyze the chromosomal distribution of Pg167TR. Results: Recently, we reported a method of karyotyping the 24 chromosome pairs of P. ginseng using rDNA and DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) bands. Here, a unique distribution of Pg167TR in all 24 P. ginseng chromosomes was observed, allowing easy identification of individual homologous chromosomes. Additionally, direct labeling of 5S and 45S rDNA probes allowed the identification of two additional 5S rDNA loci not previously reported, enabling the refinement of the P. ginseng karyotype. Conclusion: Identification of individual P. ginseng chromosomes was achieved using Pg167TR-FISH. Chromosome identification is important in understanding the P. ginseng genome structure, and our method will be useful for future integration of genetic linkage maps and genome scaffold anchoring. Additionally, it is a good tool for comparative studies with related species in efforts to understand the evolution of P. ginseng.
Jeon, Sun Jeong;Song, Si Nae;Kang, Shin Jae;Kim, Hee Taik
Korean Chemical Engineering Research
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v.53
no.3
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pp.357-363
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2015
The development of the environment-friendly tire that meets the standard requirements according to tire labeling system can be improved through using highly homogeneous silica immobilized zinc oxide nanoparticles. In this study, a considerable amount of nanoporous silica was essentially added into nano zinc oxide to improve the physiochemical properties of the formed composite. The introduction of nanoporous silica materials in the composite facilitates the improvement of the wear-resistance and increases the elasticity of the tread. Therefore, the introduction of nanoporous silica can replace carbon black as filler in the formation of composites with desirable properties for conventional green tire. Herein, mesoporous silica immobilized zinc oxide nanoparticle with desirable properties for rubber compounds was investigated. Composites with homogeneous dispersion were obtained in the absence of dispersants. The dispersion stability was controlled through varying the molar ratio, ageing time and mixing order of the reactants. A superior dispersion was achieved in the sample obtained using 0.03 mol of zinc precursor as it had the smallest grain size (50.5 nm) and then immobilized in silica aged for 10 days. Moreover, the specific surface area of this sample was the highest ($649m^2/g$).
Remote sensing technique has offered better understanding of our environment for the decades by providing useful level of information on the landcover. In many applications using the remotely sensed data, digital image processing methodology has been usefully employed to characterize the features in the data and develop the models. Random field models, especially Markov Random Field (MRF) models exploiting spatial relationships, are successfully utilized in many problems such as texture modeling, region labeling and so on. Usually, remotely sensed imagery are very large in nature and the data increase greatly in the problem requiring temporal data over time period. The time required to process increasing larger images is not linear. In this study, the methodology to reduce the computational cost is investigated in the utilization of the Markov Random Field. For this, multiresolution framework is explored which provides convenient and efficient structures for the transition between the local and global features. The computational requirements for parameter estimation of the MRF model also become excessive as image size increases. A Bayesian approach is investigated as an alternative estimation method to reduce the computational burden in estimation of the parameters of large images.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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