우리나라 야산에서 손쉽게 구할 수 있는 구황식물인 목단피를 건조시켜 분쇄한 후 methanol과 여러 용매로 추출하여 식품 부패 미생물의 증식 억제 효과를 검색하고 그 항균물질을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 목단피의 methanol 추출물은 1500$\mu\textrm{g}$/mL 농도에서 B. subtilis, L. monocytogenes, V parahaemolyticus의 증식을 100% 억제하였으며 S. aureus, E. coli도 같은 농도에서 각각 36.31%와 67.81%의 억제 효과를 보였다. 목단피의 ethylacetate 분획 추출물은 낮은 농도인 500$\mu\textrm{g}$/disc의 농도에서 식품 부패 미생물 5종 모두에 대하여 clear zone을 형성하여 항균력을 나타내었다. 특히 L. monocytogenes, E. coli균에 대해서는 낮은 농도인 500$\mu\textrm{g}$/disc에서 각각 12mm, 11mm의 clear zone을 형성하였다. 목단피의 ethylacetate추출물을 silica gel colum chromatography(7cm${\times}$1.2 cm)한 후 thin layer chromatography(TLC)를 실시하여 항균 실험을 한 결과 B. subtilis의 경우 500 $\mu\textrm{g}$/disc 농도에서 2nd fra. 1이 21mm, V. parahaemolyticus는 250$\mu\textrm{g}$/disc 농도에서 14mm를 형성하여 목단피의 methanol 추출물로부터 각 용매별로 계통 분획하여 분리한 ethylacetate 분획으로부터 silica gel column chromatograpy와 TLC를 하여 항균성을 보인 2nd fra. 1의 성분을 알아보기 위하여 HPLC로 단일분리하여 얻은 peak Ⅸ에 대한 compound를 GC-MS로 분석한 결과 peak Ⅸ에서는 isobutyl isopentanoate가 있는 것으로 추정되었다.
The methanol extract of Arachis hypogaea shell showed antioxidative and antimicrobial activity. The methanol extract was successively purified by solvent fractionation, silica gel adsorption column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography and octadecylsilane column chromatography. The purified active substances were isolated by high performance liquid chromatography, and were identified as 3-methoxy-4-hydroxybenzoic acid and 4-hydroxybenzoic acid by LC-MS and GC-MS. The amount of 3-methoxy-4-hydroxybenzoic acid and 4-hydroxybenzoic acid were 3.8mg and 9.8 mg per kg of shell, respectively.
지초(Lithospermum efthrorhizon)뿌리는 예로부터 한방약제로 이용되어져 왔으며, 지초 뿌리에 함유된 naphtoquinon계 색소물질인 shikonin은 항암, 항균, 항바이러스, 항염증 등의 효과가 있다고 보고되었다. 그러나 지초뿌리에 함유된 기능성 물질에 관한 연구는 미비한 실정이다. 이에 본 연구에서는 지초뿌리에서 기능성 물질의 탐색 및 기능성 해명연구를 위하여 지초뿌리를 ethanol로 추출한 후 이 추출물을 n-hexane, EtOAc, MeOH로 순차적으로 추출하여 MeOH추출물을 얻었다. 이 MeOH추출물을 silica gel adsorption column chromatography, ODS column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography로 순차 정제한 후 Shodex Asahipak column을 이용한 GPC-HPLC에 의해 활성 물질을 분리하였다. 분리된 물질들은 1H-NMR, 13C-NMR, COSY, HSQC, HMBC, FAB-MS 등의 기기분석을 통해 당 관련 화합물인 것으로 판명되었다.
까치복(Fugu xanthopterus) 알을 총지질 함량과 silica gel column chromatography로 조성별 분획하여 얻은 TG, 인지질, wax ester의 지방산과 wax ester의 알코올 조성을 GC로 분석하였다. 까치복 알의 총지질 함량은 12.6%였고 알 지질의 분획별 함량에서는 TG가 59.37%로 가장 많았고 인지질이 15.46%였으며 wax ester가 6.9%로 나타났다. 까치복 알의 지방산 조성은 각 분획마다 DHA의 함량이 높게 나타났으며 DPA, EPA의 함량도 높았음을 알 수 있었고 인지질 분획에서는 DHA가 19.3%로 가장 높게 나타났다. 포화 지방산, 모노 불포화 지방산, 고도 불포화 지방산의 함량은 각각 35.3, 27.4, 37.3%로 고도 불포화 지방산의 함량이 높게 나타났음을 알 수 있었다. 한편 까치복 알의 wax ester의 지방산 분획에서는 포화 지방산, 모노 불포화 지방산, 고도 불포화 지방산이 5.8, 47.0, 47.4%로 나타났는데, 알코올 분획에서는 C16:0가 62.6%로 높은 함량을 나타내어 포화 알코올이 86.3%로 가장 많았음을 알 수 있었으며 고도 불포화 알코올은 1.2%의 아주 낮은 함량을 보인 것이 특징적이었다.
토양으로부터 tyrosinase 저해제를 생산하는 방선균 F-97을 분리하여, 이 균이 생산하는 tyrosinase 저해제를 정제하였다. 먼저 배양액을 원심분리하고 이 여액을 pH 4.0으로 조절한 후 IRC-120($NH_4^+$ type column chromatography, Silica gel column chromatography, C18 column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography를 사용하여 정제하였다. 정제도 확인은 ODS HPLC를 이용하여 확인하였으며, 최종 정제 수율은 5.24%이었다. 물리 화학적 특성으로 tyrosinase 저해제는 water, methanol, ethanol 등에는 잘 녹았으나, acetone, butanol, ethylacetate, chloroform 등에는 녹지 않는 수용성 물질이었다. 물을 용매로 UV 흡광도를 측정한 결과 194nm에서 최대 흡광도를 나타내었다. 본 tyrosinase 저해제는 Iodine, Ninhydrin, Millon, Sakaguchi, Xanthoproteic, Emerson 시험에서는 음성이었고, Molish, Benedict, conc. $H_2SO_4$, $KMnO_4$ 시험에서는 양성이었다. 저해제의 열 안정성은 $100^{\circ}C$ 50분까지 안정하였고, pH $4{\sim}9$에서 안정하였다. Tyrosinase 저해제의 mushroom tyrosinase에 대한 $IC_{50}$ 값은 $19.2{\mu}g/ml$이었고, Streptomyces bikiniensis NRRL B-1049에 대한 저해활성은 $1,000{\mu}g/ml$ 일 때 27mm이었다. 그리고 본 저해제의 저해 양상은 경쟁적 저해로 확인되었다.
Three lupane type triterpenoids were isolated from the methanol extract of Pyrus pyrifolia fruit peel through repeated silica gel column chromatography. Based on the spectroscopic methods, their structures were determined to be lupeol (1), betulin (2), and betulinic acid (3).
31-Hydroxycarbowyacetylquercinic acid, a lanostenoid hydroxyl acid has been isolated from D. dickinsii by solbent extraction, silica gel column chromatography and recrystallization. The structure of this compound has been determined to be 31-hydroxycarboxyacetylquercinic acid by a combinationof spectral data and by HM-BC. This compound showed antimicrobial activities against human pathogenic fungi and bacteria.
In order to confirm the exact antipyretic component in the earthworm, etherial extract of American earthworm(Red Worm) was fractionated into five fractions by using silica gel column chromatography and thin layer chromatography. The fraction including free fatty acids was found to possess artipyretic response and standard arachidonic acid showed marked antipyretic response on typhoid vaccinated rabbits. Arachidonic acid was identified from the free fatty acid fraction of the earthworm by using gas liquid chromatography. Thus it was considered that the antipyretic activity of the free fatty acid may be due to the presence of arachidonic acid. Lipid-free earthworm powder was extracted with phosphate buffer (pH, 8.0, 0.1M) and all the proteins was salted out by ammonium sulfate. The crude precipitate was dialyzed and the impure proteins were eliminated at pH 5.4 and 4.6. The remaining protein solution was fractionated with various concentrations of acetone. The acetone fractions were identified by using S.D.S. polyacrylamide gel electrophoresis and disc gel electrophoresis. The precipitate at 85% acetone concentration and the remaining proteins in the supernatant did not exhibit the antipyretic activity.
본 연구는 Streptomyces sp. BH-405의 배양액으로부터 유기용매로 추출하여 지질과 산화에 대한 항산화 효과를 실험하였다. Streptomyces sp. BH-405의 배양액을 ethylether로 추출한 후 silica gel column(100$\times$10 cm) chromatography로 분획한 획분을 POV로 측정한 결과 fraction 3에서 향산화 활성이 가장 높았다. 항산화 활성이 높은 fraction 3 획분을 다시 preparative TLC와 column chromatography로 더욱 정제하여 band 2를 얻었다. Band 2의 항산화 효과를 알아보기 위해 기존의 항산화제와 비교한 결과 이-$\alpha$-tocopherol, BHA보다 산화억제 효과가 높았으며 DPPH에 의한 수소 공여능은 실험결과가 우수하였다. 한편 band 2는 쥐 간의 microsome에 있어서 유리기의 소거기능이 있었고 NADPH 및 Fenton 시액에 위한 효소적 과산화 지질의 생성을 억제하였다. 그리고 mitochondria와 리놀산의 과산화 유도계에서도 지질의 과산화 과정에 생성하는 유리기의 형성을 차단하였다. 결론적으로 Streptomyces sp. BH-405의 배양액에서 얻은 획분인 band 2는 산화를 억제하는 활성이 있었다.
배추김치의 dichloromethane 획분의 수율은 약 1.66% 이었으며, 이로부터 silica gel column chroamtography, Sepadex LH-20 column chromatography, Sep-pack catridge 등을 이용하여 활성물질을 분리 정제하였고, IR, EI-MS, GC-MS. $^{1}H-NMR,\;^13C-NMR$로 구조를 확인하여 분자량 226인 3-(4'-hydroxyl-3',5'-dimethoxyphenyl)propionic acid로 밝혀다. 비추김치 활성성분의 DPPH 유리기 소거능은 vitamin C에 비해 3.4배 높았고, LDL 산화억제 효과는 대조군에 비해 현저히 높아 인체에서 지질저하 효과 및 동맥경화 억제 효과가 있을 것으로 예상된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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