산초나무 각 부위별 알코올추출물의 피부사상균에 대한 항균활성은 근피 추출물에서 가장 높게 나타났으며, 각 용매별 분획분의 항균활성은 근피부의 petroleum ether 분획에서 가장 높게 나타났다. 항균활성성분을 분리하기 위해 항균력이 가장 높게 나타난 근피알코올추출물의 petroleum ether 분획분을 silica gel column chromatography를 실시하였으며, 항균활성성분인 CI과 CII가 분리되었다. CI과 CII의 MIC을 측정한 결과 CI의 MIC은 $40{\mu}g/m\ell$였으며, $20{\mu}g/m\ell$의 농도에서도 균액의 접종흔적이 조금 남아있었을 뿐 균사의 생장은 관찰할 수 없었다. 또한 CII의 MIC은 $800{\mu}g/m\ell$였으며, $600{\mu}g/m\ell$의 농도에서도 균액의 접종흔적이 조금 있었을 뿐 다른 농도에서처럼 균사의 생장은 관찰할 수 없었다. 기기 분석 결과 CI과 CII는 기지(旣知)의 alkaloid 화합물들이었다.
연구는 붉노랑상사화 인경에 함유된 살초활성 물질을 분리하여 살초활성을 평가하고 그 화학구조를 구명하고자 수행되었다. Silica gel flash column chromatography, preparative TLC, HPLC 등 일련의 크로마토그래피법들을 통해 붉노랑상사화 인경의 MeOH 추출물을 분리 정제하였다. HPLC에 의해 최종 획득된 활성분획에 대한 GC/MS 분석 결과, galanthine (galanthan-1-ol)과 isoquinoline alkaloid인 montanine ($O^2$-methyl pancracine)이 동정되었다. Montanine은 $20{\mu}g\;mL^{-1}$ 농도에서 돌피 유묘의 생장을 거의 100% 억제시키는 것으로 나타났다. 한편, 붉노랑상사화 인경의 MeOH 추출물은 $1,000{\mu}g\;mL^{-1}$ 에서 대조구에 비해 화영벼 유묘의 신초와 유근의 생장을 각각 약 3.1% 및 8.3% 억제하였다.
우리나라 야산에서 쉽게 구할 수 있는 구황 식물인 질경이를 메탄올과 여러 용매로 추출하여 식품 부패 미생물에 대한 항균력을 실험하고 그 항균활성 물질을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 질경이의 메탄올 추출물은 2000$\mu\textrm{g}$/ml 농도에서 B. subtilis 및 V. parahaemolyticus의 증식을 100% 억제하였다. 그리고 질경이의 ethylacetate 분획물은 1000$\mu\textrm{g}$/disc 농도에서 5종의 모든 실험 균주에 대하여 8.5~11mm 크기의 clear zone을 형성하여 가장 높은 항균력을 보였다. 질경이의 ethylacetate 분획물을 silica gel column chromatography와 TLC로 분리하여 얻은 fraction을 5가지 실험 균주에 대하여 항균 실험을 한 결과 3rd 분획물 중 4번째 분획물이 250$\mu\textrm{g}$/disc 농도에서 모든 균주에 대하여 10 mm 이상의 clear zone을 나타내었다. 항균력을 보인 질경이의 ethylacetate 3rd fraction No. 4를 HPLC로 단일 분리하여 얻은 peak IV로 부터 $^1$H-NMR 및 GC-MSD로 동정한 결과 hexadecanoic acid로 동정되었다.
항균 활성이 우수한 운향 75% 에탄올 추출물을 각종 용매로 분획한 후 일정 수준의 농도로 액체 배지(tryptic soy broth)에 첨가하여 L. monocytogenes 5 균주를 배양시킨 결과 클로로포름 분획물 40 ppm 수준에서 72시간 동안 증식 억제 효과를 나타내었다. 항균 활성과 수율이 우수한 운향 클로로포름 분획물을 silica gel column chromatography로 1회 분획하여 항균 활성이 우수한 획분 R7을 얻었으며, R7 획분은 20 ppm 수준의 농도에서 5 균주 모두 증식을 억제했다. 획분 R7을 4회 연속 분리하여 단일 획분 RTG1-1를 얻었고, RTG1-1를 배지에 20ppm 수준으로 첨가하여 72시간 배양하였을 때 생균이 검출되지 않아 강력한 살균 효과를 나타냈으며, RTG1-1의 구조를 동정 한 결과 gravacridonechlorine으로 확인되었다.
팽화홍삼으로부터 용매추출, 용매분획 및 silica gel column chromatography를 반복하여 두 개의 화합물을 분리하였다. 이들 두 화합물의 결정특성, 녹는점, 비선광도, Infrared spectrum 분석 결과, TLC에서의 Rf값, HPLC에서의 retention time 및 NMR 데이터를 측정하여 고찰한 결과 두 개의 화합물은 20(S)-ginsenoside Rg3와 ginsenoside Rg5임을 확인할 수 있었다. 특히 $^{1}H$- 및 $^{13}C$-NMR 데이터를 HSQC 및 HMBC와 같은 2D-NMR 실험을 통하여 더욱 정확하게 동정하였다.
감국에 존재하는 항충치활성 물질 및 glucosyltransferase 저해 효과에 대한 정보를 얻고자 본 연구를 시도하였다. 감국 ethanol 추출물의 항충치활성을 S. mutans 및 구강세균에 대해 검색한 결과, S. mutans와 2종의 구강세균에 대하여 활성이 높게 나타났다. 감국 ethanol 추출물의 농도에 따라 GTase 저해효과는 $78.4{\sim}92.3%$의 범위로 나타나 농도가 증가할 수록 활성도 함께 증가하는 경향을 나타냈다. 감국을 ethanol로 추출, 용매분획하여 얻어진 활성성분을 silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, TLC 그리고 HPLC 등의 방법으로 분석한 결과, 감국에 존재하는 항충치활성 물질은 약간의 극성을 띠는 중성물질로 분자량이 200-400정도 되는 저분자 물질인 것으로 확인되었다.
각종 토양시료로부터 M배지와 AMP배지에서 생육하는 500여종의 방선균을 분리하였으며, 그 중 전배양배지(GMY 배지)에서 가장 뛰어난 항암활성능을 소유한 균주를 불리하고 배양하여 세포외 항암성물질을 분리하여 이 물질을 완전정제하고 MTT 정량분석을 실시하여 암세포에 대한 세포독성검사를 실시하였다. 1. 정제는 배양한 균체를 완전히 제거하고 동량의 ethylacetate를 처리하여 배양액중의 항암성분을 추출하고 무수 magnesium sulfate로 건조 후 농축, ethanol로 용해, 10배량의 water을 첨가하여 $4^{\circ}C$에서 overnight 시킨 후 추출액을 원심분리(12,000 rpm, 30분)하여 methylene chloride로 용해시켜 silica gel 60 column(${\phi}35{\times}600mm$, Merck Co.), methylene chloride-ethanol(96:4) 용매로 용출하고 sephadex LH-20 column(${\phi}15{\times}300mm$, Pharmacia LKB)에서 100% methanol로 용출하여 HPLC(Waters, ODS)를 이용하여 최종적으로 완전 정제하였다. 2. Compound는 Gram(+) 세균(6균주), Gram(-) 세균(11균주), 효모(2균주), 곰팡이(1균주)에 대하여 항균 효과를 나타내었다. 3. 완전 정제된 물질에 대한 항암효과를 측정한 결과, 모든 실험 암세포에 대해서 뛰어난 항암효과를 나타내었으며 protein성 물질은 아닌 것으로 추정되었다.
담쟁이 덩굴 추출물로부터 항암예방제로서의 물질을 탐색코자 항산화 비효소활성 및 효소활성을 조사해 본 결과, 부위별 항산화력 및 효소활성들은 차이를 나타내었다. 부위별 에틸아세테이트 분획물은 잎에서 DPPH 소거활성이 가장 높았으며, 실리카겔 컬럼크로마토그래피에서 잎, 줄기, 뿔리에서 각각 7.06, 6.99, 12.39($\mu\textrm{g}/m\ell$)이었다. 에틸아세테이트 분획에서 활성이 가장 높은 분획을 Sephadex LH-20 column chromatography로 분리 정제한 결과 잎, 줄기 그리고 뿔리에서 각각 5.5, 6.11, 5.29 ($\mu\textrm{g}/m\ell$)의 DPPH 활성이 높은 분획을 얻었다. Sephadex LH-20에 의해 활성이 가장 높은 분획을 GC/MS로 분석한 결과, Benzoic acid(Gallic acid), 1,2,3-Benzenetriol, 4-amino-Benzenemethanol과 같은 페놀화합물의 항산화물질들이 동정되었다. 줄기와 뿌리에서 POD활서은 잎에서 보다 활성이 높았고, SOD 활성은 잎, 줄기 그리고 뿌리 순으로 높은 활성을 나타내었으며 특히, 잎은 뿌리보다 2배 이상의 높은 활성을 보였다.
녹병은 다양한 작물의 품질과 수확량에 큰 영향을 끼친다. 따라서 이들을 방제하기 위하여 효과적이고 환경친화적인 살균제의 개발이 절실하다. 본 연구에서는 한약재로부터 항균 물질을 탐색하는 과정에서, 당귀 메탄올 추출물이 Puccinia recondita에 의해 발생하는 밀 붉은녹병에 대하여 우수한 방제효과를 나타내는 것을 확인하였다. 밀 붉은녹병에 대하여 활성을 보이는 한 개의 항균물질을 silica gel chromatography, alumina column chromatography와 $C_{18}$ preparative HPLC를 통해 분리, 정제하였다. 분리한 항균물질은 EI-MS와 $^1H$-NMR의 기기 분석 결과 decursinol angelate로 동정되었다. 이 물질은 시험한 6개의 식물병 중에서 밀 붉은녹병과 고추 탄저병에 대하여 우수한 항균활성을 보였다. 또한, 당귀의 에틸아세테이트 추출물의 수화제도 밀 붉은녹병에 대해 우수한 항균활성이 보였다. 따라서 decursinol angelate와 이를 포함한 당귀 추출물을 이용할 경우 밀 붉은녹병을 방제할 수 있는 새로운 살균제의 개발이 가능하리라 생각된다. 본 논문에서 decursinol angelate에 의한 밀 붉은녹병 방제 효과를 처음 보고하는 바이다.
Gingko biloba is one of the oldest trees on earth. It can be traced 300 million years or more into past. In recent years, this tree has become increasingly popular because of its longevity. Amount of comsumption of Gingko leaves in Korea is increased to produce drugs for blood circulating system's disorder. The workers who work at the company of product drug with Gingko leaves complain pruritus at belt position of west, however toxic substance from extracts of Gingko biloba was carried out to determine what kind of the toxic substance from extract could induce a contact dermatitis by means of histopathological study. Dried leaves of Korean G. biloba were exhaustively extracted with chloroform. The aqueous chloroform residue was extracted with hexane. After evaporation, the hexane extract was passed through a silica gel column chromatography, it was separated into 9 fractions by means of gradient solvent (benzene: acetone/ 98~93 : 2~7%). The 4th and 7th fraction were idendified as bilibol and gingkolic acid by silica gel thin layer chromatography and NMR spectrophotometer. The 4th and 7th fractions of Korean Gingko leaves have an irritant substances which can be induced ear swelling and increased thickness of stratum cornium of rabbit ear exposed with the fractions (3 time/3 day, $100{\mu}l$ of 50mg/ml ethyl alcohol). In the 4th fraction, the substance have induced the surface of ear to swell and mass of unknown cell like inflammatory cell were infiltrated within the stratum corneum, and the 7th fraction have the surface of ear to loss the hairs, and sebaceous gland and follicle of hair were infiltrated with inflammatory cells. and other fractions at all did not induced a certain contact dermatitis and also Deutschen drug of Gingko (named as Gerigeron) have induced the contact dermatitis such as dematitis of Korean Gingko extract.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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