We have produced a new monoclonal antibody detecting common acute lymphoblastic leukemia antigen (CALLA) and designated as KP-22. CALIA detected by KP-22 is expressed on the all of the various cefl lines examined including common ALL. Burkitt's lymphoma, human fibroblasts and cultured normal human fibroblasts. However out of cell lines tested, a fraction of J-ALL and all of myelocytic leukemia and all other nonleukemia cell lines except for fibroblast are CALIA negative. Immunoprecipitation of solubilized 125 I-labeled membrane proteins from cultured human fibroblasts and leukemia cell lines with KP-22 revealed a major polypeptide chain with an apparent molecular weight of approximately 100 Kd and 95 Kd, respectively. Even though a microheterogeneity in terms of molecular weight between two CALLAs, the peptide mapping patterns of them &e identical indicating that such a microheterogeneity seems to be partly due to heterogeneous terminal sialic acid compositions added by a posttranslational modification process.
Kim, Ji-Youn;Hwang, Hwan-Jin;Chung, Hak-Jae;Park, Mi-Ryung;Byun, Sung June;Kim, Kyung-Woon
Journal of Life Science
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v.26
no.3
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pp.275-281
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2016
Glycan modification is important in pharmaceutical industry. Especially, sialic acid affects the bioactivity and stability of medicine. Milk of pig has been used as bioreactor to produce various pharmaceutical proteins. Therefore, it is necessary to modify the glycan chain in pig mammary grand. β-1,4-N-Acetylglucosaminyltransferase A (pMGAT4A) is one of the essential enzymes for increase of sialic acid content, but pig MGAT4A is unclear. In this study, the pMGAT4A was identified and characterized. The pMGAT4A has 1638 nucleotides encoding 535 amino acids and type II membrane topology, which is one of the common features in many glycosyltransferases. The gene was strongly expressed in liver and mammary gland, whereas was weakly expressed in small intestine, stomach and bladder. For functional test, HA-tagged MGAT4A was over-expressed in porcine kidney (PK-15) cell line. Forced expression of pMGAT4A gene was identified by qPCR, and we identified that pMGAT4A is located in Golgi complex by co- staining with HA antibody and BODIPY TR ceramide. In addition, we identified the increase of mannose-β-1,4-N-acetylglucosamine structure by ELISA and immunofluorescence using Datura stramonium agglutinin (DSA), which recognizes mannose-β-1,4-Nacetylglucosamine. Through the specific activity analysis, we showed that pMGAT4A modified bi-antennary to tri-antennary. This event affects sialic acid content. Therefore, we thought that over-expression of pMGAT4A will be necessary in pig mammary grand for improved medicine.
In this study, the distribution of lectin receptors in culutured fibroblast was explored using colloidal gold label complexed with lectin WGA purified from wheat germ (Triticum vulgare). The lectin WGA gold complex, shown to recognize GlcNAc (N-acetylgalactosamine) and NeuNAc (N-acetylneuraminic acid) regions, was applied to detect binding sites in Lowicryl HM 20 sections viewed under electron microscope Labeled sections of the culutured fibroblast revealed gold particles specifically distributed on the cytoplasm and cell surface of the fibroblast. Labeling of 24 hours culutured fibroblast was then quantified and compared to that of 72 hours culutured fibroblast. 24 hours culutured fibroblast sections resulted in specific gold particle distribution on the cytoplasmic vesicle of the culutured fibroblast. These results indicate that lectin WGA receptors are located in the cytoplasmic vesicle and cell surface of the 24 hours culutured fibroblast, and on the cell surface of the 72 hours culutured fibroblast. Therefore, the GlcNAc and NeuNAc regions on the cell surface appear to be functionally associated with cell-recognition and protection from other cell of the tissue, and linked with secretion and exocytosis of the fibroblast cytoplasm.
Ha, Young-Wan;Jeon, Byong-T.;Moon, Sang-H.;Kim, Yeong-Shik
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.34
no.1
s.132
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pp.40-44
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2003
Antler has been used as one of the important traditional oriental medicines for many years. It contains many biochemical components including lipids, peptides, carbohydrates, and inorganic substances. The various biological activities of antler are being considered owing to such biochemical components. The purpose of this research is to compare the biochemical components of antlers after treatment of three different kinds of fodder. They are mulberry (group A), Lycii Fructus (group B) and the complex of herbs (group C). The chemical composition of each antler was determined in three sections (top, middle, and bottom) and compared with those of the control. The contents of sialic acid, uronic acid and glycosaminoglycans increased in the top antlers of the group B. Total lipids content increased in the top antlers of all groups (A, B, and C). The concentration of inorganic ions (Ca, Mg, and P) decreased in all groups. Fattyacid composition was also analyzed by GC-MS and expressed as percentage of total fatty acid concentration. The content of palmitic acid decreased in all groups. The content of 2-hydrox-yhexadecanoic acid, which has not been reported in aster, increased in the top antlers of all groups. These results suggest that the treatment of special fodder may affect the composition of the biochemical components of antlers.
Human milk, which nourishes the early infants, is a source of bioactive components for the infant growth, development and commensal formulation as well. Human milk oligosaccharide is a group of complex and diverse glycans that is apparently not absorbed in human gastrointestinal tract. Although most mammalian milk contains oligosaccharides, oligosaccharides in human milk exhibit unique features in terms of their types, amounts, sizes, and functionalities. In addition to the prevention of infectious bacteria and the development of early immune system, human milk oligosaccharides are able to facilitate the healthy intestinal microbiota. Bifidobacterial intestinal microbiota appears to be established by the unilateral interaction between milk oligosaccharides, human intestinal activity and commensals. Digestibility, membrane transportation and catabolic activity by bacteria and intestinal epithelial cells, all of which are linked to the structural of human milk oligosaccharides, are crucial in determining intestinal microbiota.
Monocrotophos was administered orally to adult male albino mice at dose level of 3.0 mg/kg body weight/day/mice for 50 days. The treatment has found to affect spermatogenesis as well as the endocrine functions of the testis as indicated by gravimetric, histopathological and biochemical changes. The treatment has caused degenerative changes in the seminiferous tubules and Leydig cells of the testis and regression of the epididymis, seminal vesicle, vas deferens, prostate, Cowper's gland and levator ani. Similarly, cauda epididymal sperm count and sperm motility have shown significant reduction. There was a significant reduction in the protein, glycogen, sialic acid, acid and alkaline phosphatase and increase in cholesterol in the testis of monocrotophos treated mice compared with the control. The causative factors for these changes due to monocrotophos administration were discussed.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.9
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pp.1237-1242
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2009
This study was conducted to isolate strain for the preparation of fermented antler (Cervus cornu parvum) and evaluate its physiological activities. The growth degrees of twenty-one samples from Bacillus sp., Lactobacillius sp. and mushroom strain on antler extract agar were evaluated in this study, and Bacillus subtilis KH-15, SCB-3, Cordyceps militaris, Phellinus linteus, Inonotus obliquus 26136, and Inonotus obliquus 26147 were selected. The fermented antler extract by C. militaris had relatively higher contents of total sugar (1619.3 ${\mu}g$/mL), uronic acid (302.0 ${\mu}g$/mL), sulfated-glycosaminoglycan (S-GAGs) (119.9 ${\mu}g$/mL) and sialic acid (21.6 ${\mu}g$/mL) than any other extracts. The anti-complementary activities of all fermented antler extracts were higher than non-fermented antler extract, and among these samples, fermented antler extract by C. militaris showed the highest anti-complementary activity (inhibition of 50% total complement hemolysis, $ITCH_{50}$; 50.1% at 1,000 ${\mu}g$/mL). The ability of fermented antler extract by B. subtilis KH-15 to scavenge 2,2-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical ($IC_{50}$; 4.97 mg/mL) was significantly the highest (p<0.05), whereas the extract from I. obliquus exerted significantly (p<0.05) high 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity ($IC_{50}$; 16.98 mg/mL) among all samples. The results of this study suggest that physiological effects including immuno-modulating and antioxidant activities of the antler may be increased through fermentation process.
This study aimed to provide basic information as the foundation for further studies on the assessment of velvet antler quality by investigating the changes in fatty acid, vitamin A and E, minerals and GAGs contents by development stage of antler in spotted deer (Cervus nippon). Twelve stags (aged 4 to 5 years) were divided into two groups and velvet antler harvested 40 days (FDG) and 60 days (SDG) after casting of the buttons from the previous set. Total saturated fatty acid was lower in FDG than SDG (p<0.05). Total monounsaturated fatty acid, conjugated linoleic acid (p<0.05), polyunsaturated fatty acid and ${\omega}$3 fatty acid were higher in FDG than SDG. The vitamin A content of FDG was higher than that of SDG, but the vitamin E content of FDG was lower than that of SDG (p<0.05). SDG had significantly higher calcium and phosphate content than FDG (p<0.05). The magnesium content showed a similar trend to the contents of calcium and phosphate, but there was no significant difference between SDG and FDG. Uronic acid content was higher in FDG than SDG but there was no significant difference. The contents of GAGs and sialic acid were significantly higher (p<0.05) in FDG than SDG. These results indicated that the longer stage of antler development had lower content of activating components and this lead to a decrease of antler quality.
Influenza viruses are RNA viruses that belong to the Orthomyxoviridae family, and those can be divided into three types; A, B, and C, which based on the differences of the inner nucleoproteins and genomic structures. All three genera differ in their genomic structure and nucleoprotein content, they are further classified into various serotypes based on the two surface glycoproteins, hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA). These glycoproteins play crucial roles in viral infection and replication. Hemagglutinin mediates binding of virions to sialic acid receptors on the surfaces of target cells at the initial stage of infection. Neuraminidase cleaves the glycosidic bonds of sialic acids from the viral and cell surfaces to release the mature virions from infected cells, after viral replication. Because NA plays an important role in the viral life cycle, it is considered an attractive therapeutic target for the treatment of influenza. The methanolic extracts of Phellinus baumii and Phellinus igniarius exhibited significant activity in the neuraminidase inhibition assay. Polyphenolic compounds were isolated from the methanolic extracts. The structures of these compounds were determined to be hispidin, hypholomine B, inoscavin A, davallialactone, phelligridin D, phelligridin E, and phelligridin G by spectroscopic methods. Compounds inhibited the H1N1 neuraminidase activity in a dose-dependent manner with $IC_{50}$ values of 50.9, 22.9, 20.0, 14.2, 8.8, 8.1 and $8.0{\mu}M$, respectively. Moreover, these compounds showed anti-influenza activity in the viral cytopathic effect (CPE) reduction assay using MDCK cells. These results suggests that the polyphenols from P. baumii and P. igniarius are promising candidates for prevention and therapeutic strategies against viral infection.
Ji, Min-Young;Lee, Young-Choon;Kim, Kyoung-Sook;Cho, Jin-Won;Jung, Kyu-Yong;Kim, Cheorl-Ho;Choo, Young-Kug
Archives of Pharmacal Research
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v.22
no.3
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pp.243-248
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1999
Sialic acids are key determinants for biological processes, such as cell-cell interaction and differentiation. Sialyltransferases contribute to the diversity in carbohydrate structure through their attachment of sialic acid in various terminal positions on glycolipid and glycoprotein (N-linked and O-linked) carbohydrate groups. Gal$\beta$ 1,3(4)GlcNAc $\alpha$2,3-sialyltransferase (ST3Gal III) is involved in the biosynthesis of $sLe^{X}$ and sLe^{a}$ known as selection ligands and tumor-associated carbohydrate structures. The appearance and differential distribution of ST3Gal III mRNA during mice embryogenesis [embryonic (E) days; E9, E11, E13, E15] were investigated by in situ hybridization with digoxigenin-labeled RNA probes coupled with alkaline phosphatase detection. On E9, all tissues were positive for ST3Gal III mRNA expression whereas ST3Gal III mRNA on E11 was not detected throughout all tissues. On E13, ST3GAl III mRNA was expressed in different manner in various tissues. In this stage, ST3Gal III mRNA was positive only in the liver, pancreas and bladder. On E15, specific signal for ST3GAl III was detected in the liver, lung and forebrain. These results indicate that ST3Gal III is differently expressed at developmental stages of mice embryo, and this may be importantly related with regulation of organogenesis in mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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